da der ikke er nogen systematiske klinikopatologiske undersøgelser af CK7-og GATA3-negative brysttumorer og begrænsede undersøgelser, der karakteriserer den prognostiske anvendelighed af GATA3-ekspression i brystkræft, leverede den aktuelle undersøgelse detaljerede oplysninger, der er beskrevet i mangler litteratur.
CK7-farvning anvendes ikke rutinemæssigt i den primære brystkræftdiagnose undtagen i sjældne tilfælde, hvor kliniske og patologiske beviser beder om behovet for at udelukke en sekundær kræftkilde. CK7 negative brysttumorer kan være diagnostisk udfordrende i metastatiske tumorer og kræftformer af ukendt oprindelse. En omfattende karakterisering af CK7 negativ brystkræft kan være videnskabeligt og diagnostisk nyttig.
i den aktuelle undersøgelse fandt vi, at så højt som 13% af grad 3 brystkræft og 30% af metaplastiske kræftformer var CK7-negative. CK7-ekspression var ikke signifikant forbundet med alder, stadium, receptorstatus og molekylær subtype. Blandt de 11 histologiske typer inkluderet i undersøgelsen blev tab af CK7-ekspression kun set i duktale eller metaplastiske tumorer.
baseret på Grad 3 brystkræft viste overlevelsesanalyse, at CK7-ekspression ikke havde nogen indflydelse på de samlede resultater (Fig. 2). I betragtning af det faktum, at grad 1 og 2 tumorer er mere tilbøjelige til at bevare CK7-ekspression og er forbundet med bedre prognoser, overlevelsesanalyse af brysttumorer med forventet gradfordeling (ca.34% af Grad 3 i stedet for 55% i denne serie, se nedenfor) vil sandsynligvis vise signifikant tilknytning af CK7-ekspressionstab med dårligt patientresultat. Faktisk, hvis grad 1 og Grad 2 tumorer blev inkluderet i den nuværende serie, blev der set en signifikant sammenhæng mellem dårligere samlet overlevelse og patienter med CK7-ekspressionstab (P = 0,0084) (yderligere fil 1: Figur S1A). Tab af CK7 i tumoren kunne indikere initiering af en anden differentieringsvej, tilstedeværelse af epithelial til mesenkymal overgang, dedifferentiering eller forbedret tumor “stemness”. Flere undersøgelser bør udføres for yderligere undersøgelser.
i modsætning til CK7-negative tumorer har GATA3-negativ brystkræft fået mere opmærksomhed fra både diagnostiske patologer og kræftbiologer. Procentdelen af gata3-negative brystkræft varierer fra undersøgelse til undersøgelse, der spænder fra 0 til 46% I er-positive tumorer og fra 17 til 97% i østrogen-negative kræftformer . I den aktuelle undersøgelse var de negative satser 1,7% I er-positive og 48,6% i er-negative tumorer. Blandt de offentliggjorte undersøgelser, hvor det samme antistof og den samme positivitetsafskæring blev anvendt som i denne undersøgelse, gata3 negative satser varierede fra 17 til 56%, i overensstemmelse med vores fund på 17,1%. Rapporterede gata3-negative rater i metaplastiske kræftformer varierede fra 44 Til 82%, hvilket var i overensstemmelse med 70% (7 ud af 10) i den aktuelle undersøgelse. Derudover fandt vi, at ingen af de lobulære tumorer og dem med blandede lobulære og duktale træk var gata3-negative, hvilket var kompatibelt med de fleste offentliggjorte undersøgelser .
GATA3 er påkrævet for ER-afhængige cellulære processer, og GATA3 og ER deltager i positive feedback-sløjfer, der hver stimulerer udtrykket af den anden . Tvungen ekspression af GATA3 i mus brystkræft model viste en beskyttende virkning med forbedret prognose . Mutationer af GATA3 i brystkræft er relativt almindelige. Baseret på analyser udført gennem cBioPortal på det største offentligt tilgængelige brystkræftdatasæt, Molekylær taksonomi af Breast Cancer International Consortium (METABRIC) , 11,5% (250/2173) af brysttumorer indeholdt somatiske mutationer af GATA3. Ud af de 250 mutationer var 193 (77,2%) afkortede, 52 (20,8%) var missense og 5 (2%) var inframemutationer. Gata3-mutationer blev hyppigere set i blandede invasive og mucinøse kræftformer (P = 0, 0124) og mere sandsynligt at være østrogenreceptorpositive (P < 0, 0001), Her2-negative (P = 0, 0002) med lavere kvaliteter (P < 0.0001) og med lavere pT-trin (grad 1 og 2) (P = 0,0254) (yderligere fil 1: tabel S1). Gata3 muterede tumorer var forbundet med bedre patientresultater (P = 0,0018) (yderligere fil1: figur S2). Mutante gata3-proteiner interfererer hovedsageligt med DNA-bindingen, men transaktiveringsdomænerne er stort set intakte . GATA3 antistof vi brugte (klon L50–823) blev rejst mod peptid segment mellem transaktivering og DNA-bindende domæner og formentlig indfanger både vildtype og mutant protein versioner. I den aktuelle undersøgelse var GATA3 positiv i halvdelen af de ER-negative tumorer, der bestod af 28% af alle Grad 3-tumorer (tabel 3). Yderligere undersøgelser bør fokuseres på mekanismerne hvordan GATA3 opretholder sit udtryk uden at aktivere er.
offentliggjorte data vedrørende GATA3 som en prognostisk markør er modstridende. Tab af gata3-ekspression har været forbundet med ugunstigt klinisk resultat og dårligere overlevelse . Der er dog ikke observeret nogen sammenhæng med resultatet i andre undersøgelser . I en undersøgelse viste det sig, at gata3-ekspression var forbundet med et positivt resultat i alle brysttumorer i undersøgelsen, mens foreningen gik tabt, da kun ER-positive kræftformer blev analyseret . GATA3-udtryk er tæt forbundet med ER og PR-udtryk, og tab af GATA3-udtryk postuleres til at svare til tab af er-udtryk prognostisk. Vores undersøgelse så imidlertid ikke lignende fund i 196 grad 3 brystkræft. Flere faktorer kan bidrage. For det første var sagsnummeret ikke stort nok til at bære tilstrækkelig statistisk styrke. For det andet er ER og GATA3 tæt beslægtede i den hormonelle vej, men de kan stadig have forskellige funktioner med hensyn til tumorprogression. For det tredje er langt størstedelen af ER-positive tumorer i den nuværende praksis blevet behandlet hormonelt. Behandlingen kan påvirke prognosen. Fire, vores overlevelsesundersøgelse omfattede kun grad 3-tumorer, og tilføjelsen af mere Grad 1 og Grad 2-tumorer vil sandsynligvis omfatte flere GATA3-positive tumorer med bedre prognose og dermed med en signifikant prognostisk forskel. Faktisk viste gentagen analyse ved at tilføje grad 1 og Grad 2 tumorer i den nuværende serie signifikant dårligere overlevelse af gata3-negative kræftpatienter (P = 0,0063) (yderligere fil 1: Figur S1B).
vores undersøgelse er begrænset af en høj andel af Grad 3 brystkræft (55%), mens det blev estimeret, at kun en tredjedel af brystkræft er Grad 3 . En betydelig mængde yderligere arbejde ville være involveret, hvis alle de samtidige grad 1 og Grad 2 tumorer blev inkluderet i undersøgelsen. Resultater, der ville blive påvirket af uforholdsmæssig grad 1 og Grad 2 tilfælde inkluderer overlevelsesanalyser og associeringsundersøgelser, når markører ikke var jævnt fordelt mellem karakterer, såsom ER, PR, Her2 og pTNM status. Derfor blev disse analyser kun udført i grad 3 tumorer undtagen associeringsundersøgelser, der direkte involverede karakteren.
en anden mulig begrænsning handler om proportionerne af hver speciel type kræft i denne undersøgelse. Vores undersøgelse omfattede 10 metaplastiske (0,28% af alle tumorer), 6 cribriform (1,6%), 4 mikropapillære (1,1%), 5 mucinøse (1,4%), 3 rørformede (0.8%) og 1 apokrin kræft (0, 3%). Cribriform-og tubulære tumorer var lidt overrepræsenterede, og mucinøse og apokrine tumorer var lidt underrepræsenterede sammenlignet med kendte procenter for hver speciel type: 0,2 til 5% for metaplastisk, 0,3–0,8% for cribriform, 0,9–2% for mikropapillær, 2% for mucinøs, 2% for tubulær og 4% for apokrine kræftformer . Forskellene påvirker imidlertid ikke signifikant de vigtigste konklusioner i denne undersøgelse.
hovedformålet med undersøgelsen er at forstå patobiologien af CK7 negativ og gata3 negativ brystkræft. Hvis vi ønsker at anvende resultaterne i denne undersøgelse for at lette diagnosen metastatisk brystkræft, er vi nødt til at kende CK7-og GATA3-udtrykket i matchede par af primær og metastase. Det kræver bestemt en separat undersøgelse. En lille del af CK7-og / eller gata3-negative tilfælde i vores serie udviklede senere tumormetastase; imidlertid blev CK7-og GATA3-immunosains ikke brugt til at danne diagnoserne af disse metastaser. Nogle af metastaserne opstod, før gata3-immunontain blev tilgængelig. Imidlertid var klinisk information, mikroskopisk morfologi og andre brystkirtelmarkører ofte nok til at etablere diagnoserne. I en pilotundersøgelse indsamlede vi 12 par primær tumor-og levermetastase og 12 par primær tumor-og knoglemetastase. Der var ingen gata3-ekspressionsændring i primærvalg og levermetastaser: alle 10 gata3-positive primærvalg bevarede GATA3-ekspression i deres parrede levermetastaser, og GATA3-ekspression i 2 negative primærvalg forblev negativ i de parrede levermetastaser. Noget af gata3-udtrykket gik tabt i knoglemetastase: Gata3-ekspression i 8 positive primærvalg blev kun bevaret i 4 parrede knoglemetastaser, og GATA3-ekspression i 4 negative primærvalg forblev negativ i de parrede knoglemetastaser. Den nøjagtige årsag til, at gata3-ekspression gik tabt i nogle knoglemetastaser, er uklar. Det kan være sandt tab af ekspression (såsom Post-kemoterapi), men det er mere sandsynligt, at det er relateret til vævsbehandling, såsom afkalkning eller prøveudtagningsfejl på grund af den lille størrelse af knoglebiopsi. Den samme type prøveudtagningsfejl kan ske med kernebiopsi eller finnålsaspiration (FNA). Yderligere undersøgelser er nødvendige for at undersøge GATA3 og CK7 ‘ s rolle i diagnosticering af metastaser af specielle kræftformer, såsom metaplastiske, mucinøse og apokrine tumorer.
i den nuværende serie identificerede vi 8 tilfælde af CK7 og GATA3 dobbelt negativ brystkræft. Alle otte tilfælde er blevet betragtet som primær brystkræft og patologiske diagnoser blev foretaget uden CK7 og/eller GATA3 pletter. Det kunne have været udfordrende, hvis CK7-og GATA3-immunosystemer blev udført på diagnosetidspunktet. Under den aktuelle undersøgelse, vi havde retrospektiv kortgennemgang for disse tilfælde inklusive enhver opfølgningshistorie, og der blev ikke identificeret nogen primær tumor uden bryst. I vores praksis udføres gata3-immunontain rutinemæssigt på enhver triple-negativ kræft, der ikke har en in situ-komponent. I sidste ende kan kun historie og opfølgning definitivt bekræfte brystets oprindelse i nogle tilfælde.
