Da es keine systematischen klinisch-pathologischen Studien zu CK7- und GATA3-negativen Brusttumoren und begrenzte Studien gibt, die den prognostischen Nutzen der GATA3-Expression bei Brustkrebs charakterisieren, ist die aktuelle die Studie lieferte detaillierte Informationen, die in der Literatur fehlen.
Die CK7-Färbung wird bei der primären Brustkrebsdiagnose nicht routinemäßig angewendet, außer in seltenen Fällen, in denen klinische und pathologische Beweise den Ausschluss einer sekundären Krebsquelle erforderlich machen. CK7-negative Brusttumoren können bei metastasierten Tumoren und Krebs unbekannter Herkunft diagnostisch herausfordernd sein. Eine umfassende Charakterisierung von CK7-negativem Brustkrebs kann wissenschaftlich und diagnostisch sinnvoll sein.
In der aktuellen Studie fanden wir heraus, dass bis zu 13% der Brustkrebs Grad 3 und 30% der metaplastischen Krebserkrankungen CK7-negativ waren. Die CK7-Expression war nicht signifikant mit Alter, Stadium, Rezeptorstatus und molekularem Subtyp assoziiert. Unter den 11 in die Studie einbezogenen histologischen Typen wurde ein Verlust der CK7-Expression nur bei duktalen oder metaplastischen Tumoren beobachtet.
Basierend auf Brustkrebs Grad 3 zeigte die Überlebensanalyse, dass die CK7-Expression keinen Einfluss auf die Gesamtergebnisse hatte (Abb. 2). Angesichts der Tatsache, dass Tumoren des Grades 1 und 2 eher die CK7-Expression behalten und mit besseren Prognosen assoziiert sind, wird die Überlebensanalyse von Brusttumoren mit erwarteter Gradverteilung (etwa 34% von Grad 3 anstelle von 55% in dieser Serie, siehe unten) wahrscheinlich zeigen signifikante Assoziation von CK7-Expressionsverlust mit schlechtem Patientenergebnis. In der Tat, wenn Grad-1- und Grad-2-Tumoren in die aktuelle Serie aufgenommen wurden, wurde ein signifikanter Zusammenhang zwischen einem schlechteren Gesamtüberleben und Patienten mit CK7-Expressionsverlust beobachtet (P = 0,0084) (Zusätzliche Datei 1: Abbildung S1A). Der Verlust von CK7 im Tumor könnte auf die Einleitung eines anderen Differenzierungsweges, das Vorhandensein eines epithelialen zu mesenchymalen Übergangs, Dedifferenzierung oder eine verstärkte Tumor- „Stemness“ hinweisen. Für weitere Untersuchungen sollten weitere Studien durchgeführt werden.
Im Gegensatz zu CK7-negativen Tumoren hat GATA3-negativer Brustkrebs sowohl von diagnostischen Pathologen als auch von Krebsbiologen mehr Aufmerksamkeit erhalten. Der Prozentsatz der GATA3-negativen Brustkrebserkrankungen variiert von Studie zu Studie und reicht von 0 bis 46% bei ER-positiven Tumoren und von 17 bis 97% bei Östrogen-negativen Krebserkrankungen . In der aktuellen Studie betrugen die Negativraten 1,7% bei ER-positiven und 48,6% bei ER-negativen Tumoren. Unter den veröffentlichten Studien, in denen der gleiche Antikörper und der gleiche Positivitäts-Cut-off wie in dieser Studie verwendet wurden, lagen die GATA3-Negativraten zwischen 17 und 56%, was unserem Befund von 17,1% entspricht. Die gemeldeten GATA3-Negativraten bei metaplastischen Karzinomen lagen zwischen 44 und 82%, was mit den 70% (7 von 10) in der aktuellen Studie übereinstimmte. Darüber hinaus fanden wir heraus, dass keiner der lobulären Tumoren und solche mit gemischten lobulären und duktalen Merkmalen GATA3-negativ war, was mit den meisten veröffentlichten Studien kompatibel war .
GATA3 wird für ER-abhängige zelluläre Prozesse benötigt und GATA3 und ER nehmen an positiven Rückkopplungsschleifen teil, die jeweils die Expression des anderen stimulieren . Die erzwungene Expression von GATA3 im Maus-Mammakarzinommodell zeigte eine schützende Wirkung mit verbesserter Prognose . Mutationen von GATA3 bei Brustkrebs sind relativ häufig. Basierend auf Analysen, die über cBioPortal auf dem größten öffentlich verfügbaren Brustkrebs-Datensatz, Molecular Taxonomy of Breast Cancer International Consortium (METABRIC) , durchgeführt wurden , wiesen 11,5% (250/2173) der Brusttumoren somatische Mutationen von GATA3 auf. Von den 250 Mutationen waren 193 (77,2%) trunkierend, 52 (20,8%) Missense und 5 (2%) Inframe-Mutationen. GATA3-Mutationen wurden häufiger bei gemischten invasiven und muzinösen Karzinomen beobachtet (P = 0,0124) und waren eher Östrogenrezeptor-positiv (P < 0,0001), Her2-negativ (P = 0,0002) mit niedrigeren Graden (P < 0.0001) und mit niedrigeren pT-Stufen (Grad 1 und 2) (P = 0,0254) (Zusätzliche Datei 1: Tabelle S1). GATA3-mutierte Tumoren waren mit besseren Patientenergebnissen assoziiert (P = 0,0018) (Zusätzliche Datei1: Abbildung S2). Mutante GATA3-Proteine stören hauptsächlich die DNA-Bindung, aber die Transaktivierungsdomänen sind weitgehend intakt . Der von uns verwendete GATA3-Antikörper (Klon L50-823) wurde gegen ein Peptidsegment zwischen Transaktivierungs- und DNA-bindenden Domänen angehoben und fängt vermutlich sowohl Wildtyp- als auch mutierte Proteinversionen ein. In der aktuellen Studie war GATA3 in der Hälfte der ER-negativen Tumoren positiv, bestehend aus 28% aller Grad-3-Tumoren (Tabelle 3). Weitere Untersuchungen sollten sich auf die Mechanismen konzentrieren, wie GATA3 seine Expression beibehält, ohne ER zu aktivieren.
Veröffentlichte Daten bezüglich GATA3 als prognostischer Marker sind widersprüchlich. Der Verlust der GATA3-Expression wurde mit einem ungünstigen klinischen Ergebnis und einem schlechteren Überleben in Verbindung gebracht . In anderen Studien wurde jedoch kein Zusammenhang mit dem Outcome beobachtet . In einer Studie wurde festgestellt, dass die GATA3-Expression bei allen Brusttumoren in der Studie mit einem günstigen Ergebnis assoziiert war, während die Assoziation verloren ging, wenn nur ER-positive Krebsarten analysiert wurden . Die GATA3-Expression ist eng mit der ER- und PR-Expression verbunden, und es wird postuliert, dass der Verlust der GATA3-Expression dem Verlust der ER-Expression prognostisch ähnlich ist. Unsere Studie sah jedoch keine ähnlichen Ergebnisse bei 196 Grad-3-Brustkrebsen. Mehrere Faktoren könnten dazu beitragen. Erstens war die Fallzahl nicht groß genug, um eine ausreichende statistische Aussagekraft zu tragen. Zweitens sind ER und GATA3 im hormonellen Weg eng miteinander verwandt, aber sie könnten immer noch unterschiedliche Funktionen hinsichtlich des Tumorfortschritts haben. Drittens wurde in der gegenwärtigen Praxis die überwiegende Mehrheit der ER-positiven Tumoren hormonell behandelt. Die Behandlung kann die Prognose beeinflussen. Viertens umfasste unsere Überlebensstudie nur Tumoren des Grades 3, und das Hinzufügen von Tumoren des Grades 1 und des Grades 2 wird wahrscheinlich mehr GATA3-positive Tumoren mit besserer Prognose und somit mit einem signifikanten prognostischen Unterschied umfassen. Tatsächlich zeigte die wiederholte Analyse durch Hinzufügen von Tumoren des Grades 1 und des Grades 2 in der aktuellen Serie ein signifikant schlechteres Überleben von GATA3-negativen Krebspatienten (P = 0,0063) (Zusätzliche Datei 1: Abbildung S1B).
Unsere Studie ist durch einen hohen Anteil an Brustkrebs Grad 3 (55%) begrenzt, während geschätzt wurde, dass nur ein Drittel des Brustkrebses Grad 3 ist . Ein erheblicher zusätzlicher Arbeitsaufwand wäre erforderlich, wenn alle gleichzeitigen Tumoren des Grades 1 und des Grades 2 in die Studie einbezogen würden. Zu den Ergebnissen, die von unverhältnismäßigen Grad-1- und Grad-2-Fällen betroffen wären, gehören Überlebensanalysen und Assoziationsstudien, bei denen die Marker nicht gleichmäßig auf die Grade verteilt waren, wie z. B. ER-, PR-, Her2- und pTNM-Status. Daher wurden diese Analysen nur bei Tumoren des Grades 3 durchgeführt, mit Ausnahme von Assoziationsstudien, an denen der Grad direkt beteiligt war.
Eine weitere mögliche Einschränkung betrifft die Anteile jedes speziellen Krebstyps in dieser Studie. Unsere Studie umfasste 10 metaplastische (0,28% aller Tumoren), 6 kribriforme (1,6%), 4 mikropapilläre (1,1%), 5 muzinöse (1,4%), 3 tubuläre (0.8%) und 1 apokriner Krebs (0,3%). Die cribriformen und tubulären Tumoren waren leicht überrepräsentiert und muzinöse und apokrine Tumoren waren leicht unterrepräsentiert, verglichen mit bekannten Prozentsätzen für jeden speziellen Typ: 0,2 bis 5% für metaplastische, 0,3–0,8% für cribriforme, 0,9–2% für mikropapilläre, 2% für muzinöse, 2% für tubuläre und 4% für apokrine Krebsarten . Die Unterschiede haben jedoch keinen signifikanten Einfluss auf die wichtigsten Schlussfolgerungen dieser Studie.
Der Hauptzweck der Studie ist es, die Pathobiologie des CK7-negativen und GATA3-negativen Brustkrebses zu verstehen. Wenn wir die Ergebnisse dieser Studie anwenden möchten, um die Diagnose von metastasiertem Brustkrebs zu erleichtern, müssen wir die CK7- und GATA3-Expression in übereinstimmenden Paaren von Primär- und Metastasen kennen. Es erfordert sicherlich eine separate Studie. Ein kleiner Teil der CK7- und / oder GATA3-negativen Fälle in unserer Serie entwickelte später Tumormetastasen; CK7- und GATA3-Immunstains wurden jedoch nicht zur Diagnose dieser Metastasen verwendet. Einige der Metastasen traten auf, bevor GATA3 immunostain verfügbar wurde. Klinische Informationen, mikroskopische Morphologie und andere Brustdrüsenmarker reichten jedoch häufig aus, um die Diagnosen zu stellen. In einer Pilotstudie sammelten wir 12 Paare von Primärtumor- und Lebermetastasen und 12 Paare von Primärtumor- und Knochenmetastasen. Es gab keine Veränderung der GATA3-Expression in Primaries und Lebermetastasen: Alle 10 GATA3-positiven Primaries behielten die GATA3-Expression in ihren gepaarten Lebermetastasen bei und die GATA3-Expression in 2 negativen Primaries blieb in den gepaarten Lebermetastasen negativ. Ein Teil der GATA3-Expression ging bei Knochenmetastasen verloren: Die GATA3-Expression in 8 positiven Primärzellen blieb nur in 4 gepaarten Knochenmetastasen erhalten und die GATA3-Expression in 4 negativen Primärzellen blieb in den gepaarten Knochenmetastasen negativ. Der genaue Grund, warum die GATA3-Expression in einigen Knochenmetastasen verloren ging, ist unklar. Es könnte sich um einen echten Expressionsverlust handeln (z. B. nach einer Chemotherapie), es ist jedoch wahrscheinlicher, dass er mit einer Gewebeverarbeitung wie Entkalkung oder einem Probenahmefehler aufgrund der geringen Größe der Knochenbiopsie zusammenhängt. Die gleiche Art von Probenahmefehler kann bei der Kernbiopsie oder der Feinnadelaspiration (FNA) auftreten. Weitere Studien sind erforderlich, um die Rolle von GATA3 und CK7 bei der Diagnose von Metastasen spezieller Krebsarten wie metaplastischen, muzinösen und apokrinen Tumoren zu untersuchen.
In der aktuellen Serie identifizierten wir 8 Fälle von CK7 und GATA3 doppelt negativem Brustkrebs. Alle acht Fälle wurden als primärer Brustkrebs betrachtet und pathologische Diagnosen wurden ohne CK7- und / oder GATA3-Färbung gestellt. Es hätte eine Herausforderung sein können, wenn CK7- und GATA3-Immunstimulationen zum Zeitpunkt der Diagnose durchgeführt worden wären. Während der aktuellen Studie hatten wir eine retrospektive Chart-Überprüfung für diese Fälle, einschließlich aller Follow-up-Geschichte und kein Nicht-Brust-Primärtumor identifiziert wurde. In unserer Praxis wird GATA3 Immunostain routinemäßig bei allen dreifach negativen Krebsarten durchgeführt, die keine In-situ-Komponente haben. Letztendlich können nur Anamnese und Nachsorge den Ursprung der Brust in einigen Fällen endgültig bestätigen.
