Guía para la Enfermedad por Herpesvirus Koi: Cómo Detectar, Tratar y Prevenir

El primer caso reconocido de VHC ocurrió en el Reino Unido en 1996 (Haenen et al. 2004). Desde entonces, se han confirmado otros casos en casi todos los países que cultivan kois y / o carpas comunes, con la excepción de Australia (Hedrick et al. 2000; Haenen et al. 2004, Pokorova et al. 2005). Esta hoja informativa está destinada a informar a veterinarios, biólogos, productores de pescado y aficionados sobre la enfermedad del VHC.

¿Qué es KHV?

Figura 1. Koi con branquias moteadas y ojos hundidos debido a la enfermedad por herpesvirus koi.

El herpesvirus Koi (también conocido como herpesvirus cyprinid 3; CyHV3) se clasifica como un virus ADN de doble cadena que pertenece a la familia Alloherpesviridae (que incluye los herpesvirus de peces). El trabajo de Waltzek y sus colegas (Waltzek et al. 2005, 2009) reveló que el VHC es de hecho un herpesvirus, basado en la morfología y la genética del virus, y está estrechamente relacionado con el virus de la viruela de la carpa (herpesvirus ciprínido 1; CyHV1) y el virus de la necrosis hematopoyética de los peces dorados (herpesvirus ciprínido 2; CyHV2). La enfermedad por herpesvirus de los kois se ha diagnosticado en kois y carpas comunes (Hedrick et al. 2000; OATA 2001). Otras especies de ciprínidos (por ejemplo, peces dorados, Carassius auratus y carpa herbácea, Ctenopharyngodon idella) y no ciprínidos no suelen verse afectadas por el KHV, aunque se ha detectado ADN de KHV en los tejidos de peces dorados y otras especies de peces expuestos al virus mediante métodos de prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) (El-Matbouli et al. 2007, Sadler et al. 2008, Bergmann et al. 2009, Kempter et al. 2009). Pez dorado híbrido (pez dorado macho C. auratus x carpa común hembra C. carpio) fueron moderadamente resistentes a la mortalidad después de una infección experimental con VHC (Hedrick et al. 2006). Sigue siendo controvertido si la carpa común híbrida, otros ciprínidos o especies no ciprínidas pueden albergar KHV y luego transmitir la enfermedad a variedades de carpa común naïve.

La enfermedad por herpesvirus de los kois afecta a peces de diversas edades, lo que a menudo provoca una mortalidad del 80 al 100% en poblaciones susceptibles cuando la temperatura del agua está entre los 60° y los 77°F (16° y 25 °C) (Haenen et al. 2004). Sin embargo, al igual que con otras infecciones herpesvirales, el VH puede permanecer en los peces infectados de por vida; por lo tanto, los peces que se recuperan de un brote de VH deben considerarse portadores del virus (Petty y Fraser 2005, St.Hilaire et al. 2005, Eide et al. 2011).

¿Cuáles son los signos de KHV?

Los signos clínicos de VHC suelen ser inespecíficos. La mortalidad puede comenzar muy rápidamente en las poblaciones infectadas, y las muertes comienzan entre 24 y 48 horas después de la aparición inicial de los signos clínicos. En estudios experimentales, el 82% de los peces expuestos al virus a una temperatura del agua de 72°F (22°C) murieron en los primeros 15 días (Ronen et al. 2003). La infección por VHC puede producir lesiones branquiales graves que se presentan como manchas branquiales con manchas rojas y blancas (Figura 1) (puede ser similar a los signos de la enfermedad de columnaris; publicación SRAC #479b sobre la enfermedad de Columnaris). Las manchas blancas se deben a la necrosis (muerte) del tejido branquial. Las lesiones branquiales causadas por la enfermedad del VHC son los signos clínicos más comunes en los kois afectados. Otros signos externos de KHV pueden incluir branquias sangrantes, ojos hundidos y manchas pálidas en la piel. Algunos kois infectados por el virus KHV pueden tener una nariz con muescas (Goodwin 2012). En algunos casos, las infecciones bacterianas y parasitarias secundarias pueden ser el problema más obvio, enmascarando el daño causado por la infección viral primaria. El examen microscópico de las biopsias branquiales a menudo revela un gran número de bacterias y varios parásitos (Hedrick et al. 2000; Haenen et al. 2004).

Los signos internos de KHVD son variables e inespecíficos, pero pueden incluir adherencias mayores de lo normal en la cavidad corporal y agrandamiento y / o apariencia moteada de los órganos internos (Hedrick et al. 2000; Haenen et al 2004).

En términos de comportamiento, los peces afectados a menudo permanecen cerca de la superficie, nadan letárgicos y pueden presentar dificultad respiratoria y natación descoordinada.

¿Cómo se infectan los peces con KHV?

Los métodos de propagación (transmisión) de KHV incluyen el contacto directo con peces infectados, el contacto con fluidos de peces infectados; y contacto con agua, barro u otros fómites/vectores que han entrado en contacto con sistemas contaminados. El virus infeccioso ingresa principalmente a los peces susceptibles a través de la piel, incluido el tejido branquial (Costes et al. 2009). Dependiendo de la temperatura del agua, los peces susceptibles que están expuestos al VHC pueden infectarse, desarrollar enfermedades y morir; o pueden sobrevivir al brote inicial de la enfermedad y convertirse en portadores del virus (Petty y Fraser 2005, St.Hilaire et al. 2005, Eide et al. 2011). Los peces que sobreviven a la exposición al virus KHV o que reciben la vacuna KHV pueden inmunizarse y desarrollar un nivel de protección contra el virus, aunque la duración de la protección sigue siendo desconocida(Ronen et al. 2003, Perelberg et al. 2008). Los sobrevivientes de brotes de VHC pueden convertirse en portadores del virus y ser capaces de propagar la enfermedad a peces susceptibles. Es posible que estos peces portadores no muestren signos de infección por el VHC, a pesar de que pueden estar portando y/o transmitiendo el virus.

¿Cómo afecta la temperatura del agua a la enfermedad del VHC?

Los brotes de la enfermedad de KHV (KHVD) ocurren típicamente en primavera y otoño, cuando las temperaturas del agua están entre 60°y 77 ° F (16° y 25 °C) con un período de incubación de 7-21 días, dependiendo de la temperatura del agua (Haenen et al. 2004). Se ha informado de KHVD a temperaturas tan bajas como 60°F (15,5-16°C) en brotes comunes de carpas en Japón, y los ensayos experimentales han demostrado que el virus puede inducir mortalidad hasta aproximadamente 82°F (28°C). Las temperaturas más cálidas del agua inducen más rápidamente enfermedades clínicas en comparación con los peces mantenidos a temperaturas más bajas. A temperaturas más bajas del agua (p. ej., 55 ° F), el virus puede infectar a los peces sin inducir signos clínicos de enfermedad, pero cuando se vuelven a experimentar temperaturas permisivas del agua, los peces muestran signos típicos de KHV y pueden morir (Gilad et al. De 2003, San Hilaire et al. 2005).

¿Cómo sé si mis peces tienen KHV?

El diagnóstico positivo de KHV requiere la asistencia de un veterinario o especialista en salud de los peces y de un laboratorio de diagnóstico de enfermedades de los peces. La identificación diagnóstica de KHV se puede lograr por varios métodos directos e indirectos. Los métodos directos son procedimientos que detectan virus reales o» fragmentos » de virus. Los métodos indirectos son procedimientos que determinan si un pez ha montado una respuesta inmune contra el KHV después de la exposición al virus midiendo los niveles de anticuerpos anti-KHV en la sangre (Adkison et al. 2005, St-Hilaire et al. 2005, 2009).

Los métodos directos utilizados para identificar el KHV incluyen: 1) aislamiento e identificación del virus (es decir, cultivo del virus) utilizando una línea celular susceptible, como la línea celular de aleta Koi (KF-1) {crecimiento óptimo observado a temperaturas entre 59° y 77°F (15° y 25°C)} y 2) técnicas de PCR (es decir, pruebas para la presencia de ADN KHV). Para estas pruebas de diagnóstico directo, se extraen tejidos de los peces que se recogen vivos y luego se sacrifican. El aislamiento y la detección del virus en tejidos de peces muertos durante más de unas pocas horas pueden ser poco fiables. Hay pruebas de diagnóstico directo no letales disponibles en muestras como sangre, materia fecal, moco y clips branquiales (es decir, biopsias), pero estas pruebas pueden dar resultados menos definitivos o menos precisos. Una prueba de cultivo celular positiva indica una infección activa y continua con KHV. La detección positiva de ADN del VHC mediante PCR indica que el virus está presente, por lo que se puede utilizar para confirmar la enfermedad del VHC en peces clínicamente enfermos y tal vez incluso para identificar portadores (Eide et al. 2011).

Un método de ensayo indirecto para el VHC que se ha utilizado ampliamente es el ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA). El ELISA de VHC utiliza una muestra de sangre y, por lo tanto, es una herramienta de diagnóstico no letal. Los datos de ELISA pueden proporcionar evidencia de que un pez está montando, o ha montado previamente, una respuesta inmunitaria (es decir, producción de anticuerpos) contra el KHV. Una prueba ELISA positiva para KHV indica que los peces han producido anticuerpos contra KHV después de una exposición previa al virus. Sin embargo, las células inmunitarias productoras de anticuerpos tardan en activarse y, con el tiempo, si un pez ya no está enfermo, la producción de anticuerpos anti-KHV puede disminuir o detenerse. Por lo tanto, ELISA puede no ser capaz de detectar anticuerpos contra el KHV si la infección se produjo años antes o si los peces aún no han tenido tiempo de producir anticuerpos.

Los resultados negativos de las pruebas directas o indirectas no significan necesariamente que los peces no sean portadores. No hay ninguna prueba que detecte definitivamente a todos los portadores o sobrevivientes.

¿Hay tratamiento para el VHC?

No hay tratamiento para el VHC. No se dispone de medicamentos antivirales para tratar el VHC ni ninguna otra enfermedad viral de los peces cultivados. Los estudios han demostrado que los kois pueden sobrevivir a un brote de KHV si la temperatura del agua aumenta a 86 ° F (30°C) durante el brote (Ronen et al. 2003). Sin embargo, esta técnica solo aumenta marginalmente las tasas de supervivencia, y elevar artificialmente la temperatura del agua por encima de los 80°F en las instalaciones de retención puede resultar en un aumento de la ocurrencia de otras enfermedades bacterianas y parasitarias más comunes. Las altas temperaturas del agua generalmente no se recomiendan para la cría y el manejo rutinarios de kois y carpas comunes. Además, y lo que es más importante, los kois que sobreviven a un brote de KHV o los expuestos a altas temperaturas del agua pueden convertirse en portadores del virus. Estos kois portadores son una fuente de la enfermedad para los peces susceptibles cuando las condiciones son apropiadas para la diseminación viral y la infección. Debido a la exposición e inmunización previas al virus, los peces portadores no suelen sucumbir a la enfermedad del VHC ni mostrar signos de infección clínica.

Recientemente, el USDA APHIS aprobó el uso de una vacuna viva atenuada para la prevención de la DVH, que se administrará a carpas o kois comunes de más de 100 gramos (la vacuna no está aprobada para su uso en reproductores). La vacuna, desarrollada originalmente por un grupo de investigación israelí (Ronen et al. 2003), genera altos títulos de anticuerpos anti-KHV y protege a las carpas o kois vacunados en caso de exposición viral posterior (Ronen et al. 2003, Perelberg et al. 2008). Sin embargo, se ha expresado preocupación por la eficacia de la vacuna y la duración de la protección ofrecida a los peces vacunados. En la actualidad, se desconoce si los peces vacunados se convierten en portadores de la cepa vacunal o si están protegidos contra la infección por la cepa silvestre, que representaría una amenaza para la carpa común no vacunada. Otro desafío con respecto a la vacuna es que no hay pruebas de diagnóstico disponibles en el mercado que puedan diferenciar a los peces vacunados de los infectados/expuestos de forma natural.

Debido a que los brotes de KHV han causado grandes pérdidas en las instalaciones de kois y carpas comunes y a que existe la preocupación de que los sobrevivientes sean portadores, cualquier persona con koi que haya sido diagnosticada con KHV debe considerar la despoblación (eliminar a toda la población) como una opción lógica. Todos los materiales y sistemas con los que hayan entrado en contacto los peces infectados deben limpiarse y desinfectarse.

Las partículas virales en el agua ambiental pueden permanecer infecciosas hasta por tres días (Shimizu et al. 2006). Sin embargo, se pueden utilizar protocolos de desinfección comunes (véase más adelante) para eliminar el virus de los sistemas y equipos de agua. Los biofiltros y los medios de biofiltro expuestos al virus también deben limpiarse y desinfectarse a fondo. Antes de la desinfección, el equipo debe limpiarse de escombros o acumulación orgánica, ya que esto puede reducir la eficacia del desinfectante. Se pueden usar soluciones de cloro (por ejemplo, lejía doméstica) para desinfectar equipos o sistemas grandes sin peces. El protocolo recomendado para el cloro es de 200 ppm (200 mg/L) durante una hora (Noga 1996). La dosificación adecuada de este ingrediente activo depende del tipo de cloro utilizado. En el caso de la lejía doméstica, que es de 5,25% de hipoclorito de sodio por litro, 35 mililitros por galón de agua darán una concentración final de 200 mg/L.

Los compuestos de amonio cuaternario (QAC) también pueden utilizarse en sistemas y equipos. Los compuestos de amonio cuaternario son más suaves en las redes que las soluciones de cloro. La concentración de QAC recomendada para la desinfección es de 500 ppm (500 mg/L) durante una hora (Noga 1996). La dosificación adecuada de QACs depende del tipo / concentración de la mezcla utilizada, ya que las concentraciones variarán en función del producto utilizado. Los diferentes productos QAC pueden variar del 10 al 50 por ciento de ingrediente activo. Por ejemplo, Roccal-D Plus® (Pharmacia & Upjohn Company, Pfizer) es aproximadamente un 24% de ingrediente activo; por lo tanto, una concentración final de tratamiento de 500 mg/l requeriría aproximadamente 7,9 ml de Roccal-D Plus® por galón de agua. Enjuague bien después de usar cualquier tipo de desinfectante para eliminar los desinfectantes residuales que pueden matar peces.

¿Cómo se puede prevenir el VHC?

Antes de obtener pescado, pregunte primero al proveedor si ha habido pérdidas importantes sin explicación en la población. El monitoreo y las pruebas de KHV se pueden realizar mediante pruebas de laboratorio, por lo que pregunte a los proveedores si se ha realizado alguna prueba de KHV y solicite una copia de la documentación de los resultados de laboratorio. La mejor manera de prevenir el KHV es conocer a sus proveedores de pescado y tener una buena relación de trabajo con ellos.

La cuarentena (es decir, la separación de otros koi) es el método más fiable para evitar la introducción de patógenos en un estanque o instalación. Para implementar un procedimiento de cuarentena efectivo, todos los peces nuevos deben mantenerse en un sistema separado, idealmente en un edificio o área diferente del pez residente. Los peces residentes deben alimentarse, manipularse y mantenerse antes que los peces nuevos. Los peces en cuarentena requieren equipos específicos, como redes, cubos y mangueras de sifón que se utilizan solo para ellos. Además, cualquier persona que entre y salga del área bajo cuarentena debe usar baños para los pies y lavarse las manos. Los peces deben ponerse en cuarentena durante un mínimo de 30 días. Específicamente para KHV, los nuevos kois deben ponerse en cuarentena en agua a una temperatura de 75°F (24°C) durante al menos 30 días. Al final del período de cuarentena, cualquier pez enfermo debe ser examinado por un veterinario o laboratorio de diagnóstico para descartar la presencia de VHC u otras enfermedades. Si todos los peces parecen sanos, se tomarán muestras de sangre de estos peces en cuarentena y se someterán a la detección de anticuerpos mediante ELISA. (Atkinson et al. 2005; San Hilaire et al. 2009)

Koi aficionados se anima a promover el uso del inglés-estilo koi muestra, que mantienen diferentes fuentes (propietarios) de koi separados durante el show y juzgar. Además, todos los participantes del espectáculo deben usar redes separadas, mangueras de sifón y otros equipos para sus propios peces. El espectáculo al estilo japonés, en el que koi de diferentes propietarios se colocan juntos en el mismo tanque, puede provocar la propagación de enfermedades entre los peces susceptibles. Independientemente del estilo del espectáculo, los peces que regresan de los espectáculos deben ponerse en cuarentena por un mínimo de 30 días y mantenerse a 75°F antes de volver a ser colocados en la población general. Para mayor seguridad, la prueba de anticuerpos con muestras de sangre puede ser útil. Los sobrevivientes (peces que han estado expuestos previamente a la enfermedad de KHV) nunca deben ser llevados a un show de kois.

Al final del período de cuarentena y antes de colocar todos los peces juntos, coloque varios koi nuevos con varios koi de la población establecida en un área separada lejos del resto de la población establecida y vigílelos en busca de signos de enfermedad. Esta «prueba» puede ayudar a determinar con un número menor de peces si unir las dos poblaciones después de la cuarentena podría causar problemas. Desafortunadamente, no hay garantías.

¿A quién debo contactar si sospecho que mis peces tienen KHV o si quiero más información?

Los productores, mayoristas y minoristas comerciales de pescado en Florida pueden comunicarse con uno de los siguientes Laboratorios de Diagnóstico de Enfermedades de Peces de la Universidad de Florida*:

En el norte de Florida:

Thomas B. Waltzek
Laboratorio de Enfermedades Veterinarias Acuáticas y de Vida Silvestre (WAVDL)
Patobiología Acuática
University of Florida
Edificio 471, 2173 Mowry Road
Gainesville, Florida 32611
(352) 273-5202
Correo electrónico: [email protected]

En el sur de Florida:

Roy P. E. Yanong o Deborah Pouder
Laboratorio de Acuicultura Tropical
Laboratorio de Diagnóstico de Enfermedades de peces
Universidad de Florida
1408 24th St. SE 33570
Ruskin, Florida
(813) 671-5230
http://tal.ifas.ufl.edu

*Tenga en cuenta: Estos laboratorios solo aceptan casos de productores comerciales de pescado, mayoristas y minoristas.

Los aficionados y propietarios personales de estanques de peces koi (o productores de peces comerciales, mayoristas y minoristas fuera de Florida) pueden buscar un veterinario acuático o un laboratorio de diagnóstico acuático en su área en el sitio web de AquaVetMed (http://www.aquavetmed.info) o http://www.myveterinarian.com/avma/vclPublic/#.

¿Cuáles son las consideraciones reglamentarias asociadas con el KHV?

A partir de enero de 2007, el KHV se añadió a la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE; www.oie.int) lista de enfermedades de los peces. Porque de este listado de los Estados unidos Departamento de Agricultura Animal and Plant Health Inspection Service (USDA APHIS) pide que los veterinarios acreditados y laboratorios de diagnóstico informe de casos positivos de KHV a la zona veterinario a cargo (AVIC) del estado, donde los peces se originó. Sin embargo, no se solicitará información del cliente (por ejemplo, nombre, dirección). Esta información ayudará al Departamento de Agricultura de los Estados Unidos a determinar cuál es la prevalencia de KHV en los Estados Unidos. USDA APHIS tiene sin importar la salud de los requisitos específicos para KHV para koi o de otros peces en movimiento interestatal o internacional. No hay una despoblación obligatoria para las poblaciones de kois infectadas con KHV. Depende del propietario de esos animales y de su veterinario decidir qué curso tomar.

Los criadores, distribuidores, expositores y veterinarios de Kois deben estar al tanto de las regulaciones sanitarias de exportación internacionales con respecto al movimiento de peces vacunados contra el virus KHV. Los requisitos de importación de algunos países especifican que no se permitirá la entrada de peces vacunados contra el VHC. Consulte el sitio web del APHIS para conocer los requisitos sanitarios estatales e internacionales (enumerados respectivamente): http://www.aphis.usda.gov/animal_health/animal_dis_spec/aquaculture/aquastates.shtml

http://www.aphis.usda.gov/regulations/vs/iregs/animals/

O comuníquese con la Oficina local de APHIS VS del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos para obtener asistencia (http://www.aphis.usda.gov/animal_health/area_offices/).

¿Los humanos pueden obtener KHV?

No hay preocupación zoonótica con el KHV. El herpesvirus responsable de causar la enfermedad del VHC en los peces no causará enfermedad en los seres humanos.

¿En qué se diferencia el KHV de otras enfermedades virales?

Es importante diferenciar el VHC de otros virus que pueden causar enfermedades en carpas y kois. Otras dos enfermedades virales importantes reconocidas en la carpa son la viremia primaveral de la carpa (VCS) y la viruela de la carpa (herpesvirus cyprinid 1; CyHV1). Estas enfermedades tienen implicaciones regulatorias y de gestión significativamente diferentes (Tabla 1). Tanto el VHC como la VPC figuran ahora en la lista de enfermedades de los peces de declaración obligatoria de la OIE. Sin embargo, dentro de los Estados Unidos, la VPC se considera una enfermedad de peces extranjera o exótica (no presente) de especies susceptibles de acuicultura y, como tal, el veterinario o laboratorio acreditado debe notificar los brotes confirmados a los funcionarios de los Servicios Veterinarios del APHIS del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos, quienes, a su vez, notificarán a la OIE. En comparación, se considera que el KHV está muy extendido en los Estados Unidos. El APHIS del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos pide a los veterinarios y laboratorios acreditados que informen de los casos de VKH al veterinario a cargo del área (AVIC) del estado donde se está produciendo el brote. La información ayudará a que el USDA determinar cuál es la verdadera prevalencia de KHV está en NOSOTROS, sin Embargo, cada brote de KHV no será notificado a la OIE.

La viremia primaveral de la enfermedad de la carpa está causada por un virus ARN monocatenario, el Rabdovirus carpio, y se ha notificado en carpas y kois comunes (C. carpio), carpas hierba (C. idella), carpas cabeza grande (Aristichthys nobilis), carpas plateadas (Hypophthalmichthys molitrix), carpas Carassius carassius y peces dorados comunes (C. auratus). Para obtener más información sobre la VPC, consulte la Tabla 1 y la hoja informativa de UF/IFAS «Viremia primaveral de la carpa» (VM-142).

La enfermedad de la viruela de la carpa (herpesvirus cyprinid 1; CyHV1) es causada por un herpesvirus diferente del VHC (Herpesvirus cyprini) que tiene una amplia distribución geográfica y afecta a carpas y kois comunes. La viruela de la carpa normalmente causa crecimientos suaves y elevados («masas parecidas a verrugas») en la piel y las aletas de los peces más viejos, pero puede estar asociada con una alta mortalidad en alevines de menos de dos meses de edad (Sano et al. 1990). La varicela de la carpa no es una enfermedad de notificación obligatoria en los Estados Unidos Las temperaturas del agua superiores a los 20° C (68°F) ayudan a reducir el crecimiento de la piel y las aletas en peces mayores, pero no eliminan el virus de los peces (Tabla 1). En los peces maduros, la varicela de la carpa es típicamente una enfermedad no letal y autolimitada (es decir, la mayoría, si no todos los crecimientos se resolverán a temperaturas más cálidas por sí solos).

Resumen

La enfermedad por herpesvirus de kois es una enfermedad devastadora de kois ornamentales y carpas comunes. Hay varios métodos para detectar varios estados de la infección. No existe un tratamiento eficaz para librar al pez del virus. Las buenas prácticas de manejo, incluidas la cuarentena, las pruebas y la cría adecuada, son componentes vitales para prevenir esta enfermedad para todos los productores, comerciantes y aficionados de kois y carpas comunes.

Agosto de 2013