Métodos de aislamiento e identificación de especies de Rothia en cavidades bucales

Rothia dentocariosa y Rothia mucilaginosa, que son bacterias Gram positivas, forman parte de la flora normal de la cavidad oral y la faringe humanas. Además, se prevé que Rothia aeria, que se aisló por primera vez de muestras de aire en la estación espacial rusa Mir, sea un habitante oral. Los pacientes inmunodeprimidos a menudo están infectados por estos organismos, lo que lleva a varias enfermedades sistémicas. La participación de estos organismos en infecciones orales ha atraído poca atención, y su distribución en la cavidad oral no se ha aclarado completamente debido a las dificultades para identificar con precisión estos organismos. Un medio selectivo adecuado para las especies orales de Rothia, incluida R. aeria, es necesario para evaluar la verdadera prevalencia de estos organismos en la cavidad oral. Para examinar la población bacteriana en la cavidad oral, se desarrolló un nuevo medio selectivo (ORSM) para aislar especies orales de Rothia en este estudio. ORSM consiste en triptona, gluconato de sodio, polvo Lab-Lemco, fluoruro de sodio, acriflavina neutra, lincomicina, colistina y agar. La recuperación promedio del crecimiento de las especies orales de Rothia en ORSM fue del 96,7% en comparación con la del agar BHI-Y. El crecimiento de otras bacterias orales representativas, es decir, los géneros Streptococcus, Actinomyces, Neisseria y Corynebacterium, se inhibió notablemente en el medio selectivo. Los cebadores de PCR se diseñaron en base a secuencias parciales de los genes 16S del ADNr de especies orales de Rothia. Estos cebadores reaccionaron a cada organismo y no reaccionaron a otras especies de Rothia no orales o bacterias orales representativas. Estos resultados indicaron que estos cebadores son útiles para identificar especies orales de Rothia. Un procedimiento simple de PCR múltiple usando estos cebadores fue un método confiable para identificar especies orales de Rothia. La proporción de especies orales de Rothia en muestras de saliva recolectadas de 20 sujetos se examinó por método de cultivo utilizando ORSM. Rothia dentocariosa, Rothia mucilaginosa y R. aeria representaron 1,3%, 5,9% y 0.el 8% del número total de bacterias cultivables en agar BHI-Y en las cavidades bucales de todos los sujetos, respectivamente. Se indicó que entre las especies orales de Rothia, R. mucilaginosa es más predominante en la cavidad oral de los seres humanos. Un novedoso medio selectivo, ORSM, fue útil para aislar cada especie oral de Rothia.



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