Méthodes d’isolement et d’identification des espèces de Rothia dans les cavités buccales

Rothia dentocariosa et Rothia mucilaginosa qui sont des bactéries à Gram positif font partie de la flore normale de la cavité buccale et du pharynx humains. De plus, Rothia aeria, qui a été isolée pour la première fois à partir d’échantillons d’air dans la station spatiale russe Mir, devrait être un habitant oral. Les patients immunodéprimés sont souvent infectés par ces organismes, entraînant diverses maladies systémiques. L’implication de ces organismes dans les infections buccales a attiré peu d’attention et leur répartition dans la cavité buccale n’a pas été complètement clarifiée en raison de difficultés à identifier avec précision ces organismes. Un milieu sélectif approprié pour les espèces de Rothia par voie orale, y compris R. aeria, est nécessaire pour évaluer la véritable prévalence de ces organismes dans la cavité buccale. Pour examiner la population bactérienne dans la cavité buccale, un nouveau milieu sélectif (ORSM) a été développé pour isoler les espèces de Rothia par voie orale dans cette étude. ORSM se compose de tryptone, de gluconate de sodium, de poudre Lab-Lemco, de fluorure de sodium, d’acriflavine neutre, de lincomycine, de colistine et de gélose. La reprise de croissance moyenne des espèces de Rothia par voie orale sur ORSM était de 96,7 % comparativement à celle sur gélose BHI-Y. La croissance d’autres bactéries orales représentatives, à savoir les genres Streptococcus, Actinomyces, Neisseria et Corynebacterium, a été remarquablement inhibée sur le milieu sélectif. Les amorces de PCR ont été conçues sur la base de séquences partielles des gènes d’ADNr 16S des espèces de Rothia par voie orale. Ces amorces ont réagi à chaque organisme et n’ont pas réagi à d’autres espèces de Rothia non orales ou à des bactéries orales représentatives. Ces résultats indiquent que ces amorces sont utiles pour identifier les espèces de Rothia par voie orale. Une simple procédure de PCR multiplex utilisant ces amorces était une méthode fiable d’identification des espèces de Rothia par voie orale. La proportion d’espèces de Rothia par voie orale dans les échantillons de salive prélevés sur 20 sujets a été examinée par méthode de culture utilisant ORSM. Rothia dentocariosa, Rothia mucilaginosa et R. aeria représentaient 1,3 %, 5,9 % et 0.8% du nombre total de bactéries cultivables sur gélose BHI-Y dans les cavités buccales de tous les sujets, respectivement. Il a été indiqué que parmi les espèces de Rothia buccales, R. mucilaginosa est le plus prédominant dans la cavité buccale de l’homme. Un nouveau milieu sélectif, ORSM, a été utile pour isoler chaque espèce de Rothia orale.



+