mivel a CK7 és GATA3 negatív emlődaganatokkal kapcsolatban nincsenek szisztematikus klinikopatológiai vizsgálatok, és korlátozott vizsgálatok jellemzik a GATA3 expresszió prognosztikai hasznosságát az emlőrákban, a jelenlegi vizsgálat részletes információt szolgáltatott arról, hogy a GATA3 expresszió prognosztikai hasznosságát az emlődaganatokban hiányzik az irodalom.
a CK7 festést nem alkalmazzák rutinszerűen az elsődleges emlőrák diagnózisában, kivéve azokat a ritka eseteket, amikor a klinikai és patológiai bizonyítékok szükségessé teszik a másodlagos rákforrás kizárását. A ck7 negatív emlődaganatok diagnosztikailag kihívást jelenthetnek metasztatikus daganatokban és ismeretlen eredetű rákokban. A ck7 negatív emlőrák átfogó jellemzése tudományosan és diagnosztikailag hasznos lehet.
a jelenlegi tanulmányban azt találtuk, hogy a 3.fokozatú emlőrákok 13% – A és a metaplasztikus rákok 30% – a ck7 negatív volt. A CK7 expresszió nem volt szignifikáns összefüggésben az életkorral, a stádiummal, a receptor státusszal és a molekuláris altípussal. A vizsgálatba bevont 11 szövettani típus közül a CK7 expresszió elvesztése csak ductalis vagy metaplasztikus daganatokban volt megfigyelhető.
a 3.fokozatú emlőrák alapján a túlélési elemzés azt mutatta, hogy a CK7 expresszió nem volt hatással az Általános eredményekre (ábra. 2). Tekintettel arra a tényre, hogy az 1.és 2. fokozatú daganatok nagyobb valószínűséggel megtartják a CK7 expressziót, és jobb prognózisokkal társulnak, a várható fokozatú eloszlású emlődaganatok túlélési elemzése (a 3. fokozat körülbelül 34% – a A sorozat 55% – a helyett, lásd alább) valószínűleg jelentős összefüggést mutat a CK7 expresszió elvesztésével a beteg rossz kimenetelével. Valójában, ha az 1.és 2. fokozatú daganatokat bevonták a jelenlegi sorozatba, szignifikáns összefüggést észleltek a rosszabb teljes túlélés és a CK7 expressziós veszteséges betegek között (P = 0,0084) (további fájl 1: S1A ábra). A ck7 elvesztése a tumorban jelezheti egy másik differenciálódási út megkezdését, epitheliális mezenchimális átmenet jelenlétét, dedifferenciálódást vagy fokozott tumor “szárat”. További vizsgálatokat kell végezni a további vizsgálatokhoz.
a CK7 negatív daganatokkal szemben a GATA3 negatív emlőrák nagyobb figyelmet kapott mind a diagnosztikai patológusok, mind a rákbiológusok részéről. A GATA3 negatív emlőrákok százalékos aránya tanulmányonként változik, 0-46% az ER pozitív daganatokban és 17-97% az ösztrogén negatív rákokban . A jelenlegi vizsgálatban a negatív arány 1,7% volt az ER pozitív, 48,6% pedig az ER negatív daganatokban. A közzétett vizsgálatok közül, amelyekben ugyanazt az antitestet és ugyanazt a pozitivitási határértéket alkalmazták, mint ebben a vizsgálatban, a GATA3 negatív aránya 17-56% között mozgott, összhangban a 17,1% – os eredményünkkel. A jelentett GATA3 negatív arányok a metaplasztikus rákokban 44-82% között mozogtak, ami összhangban volt a jelenlegi vizsgálat 70% – ával (7-ből 10-ből). Ezenkívül azt találtuk, hogy sem a lobularis daganatok, sem a vegyes lobularis és ductalis jellemzőkkel rendelkezők nem voltak GATA3 negatívak, ami kompatibilis volt a legtöbb publikált vizsgálattal .
GATA3 szükséges az ER-függő sejtfolyamatokhoz, és a GATA3 és az ER pozitív visszacsatolási hurkokban vesz részt, mindegyik stimulálja a másik expresszióját . A GATA3 kényszerített expressziója egér emlőrákos modellben védőhatást mutatott jobb prognózissal . A GATA3 mutációi emlőrákban viszonylag gyakoriak. A cbioportalon keresztül végzett elemzések alapján a legnagyobb nyilvánosan elérhető mellrák adatkészlet , a Breast Cancer International Consortium (METABRIC) molekuláris taxonómiája, 11,5% (250/2173) emlődaganatok a GATA3 szomatikus mutációit hordozzák. A 250 mutáció közül 193 (77,2%) csonka, 52 (20,8%) missense és 5 (2%) inframe mutáció volt. A GATA3 mutációkat gyakrabban figyelték meg vegyes invazív és mucinosus daganatokban (P = 0,0124), és nagyobb valószínűséggel ösztrogénreceptor pozitívak (P < 0,0001), Her2 negatívak (P = 0,0002), alacsonyabb fokozatokkal (P < 0.0001), és alacsonyabb pT fokozatokkal (1.és 2. fokozat) (P = 0,0254) (1. kiegészítő fájl: S1 táblázat). A GATA3 mutált tumorok jobb beteg kimenetellel társultak (P = 0,0018) (további fájl1: S2 ábra). A mutáns GATA3 fehérjék elsősorban a DNS-kötődést zavarják, de a tranaktivációs domének nagyrészt sértetlenek . Az általunk használt GATA3 antitestet (L50–823 klón) a peptidszegmens ellen emeltük fel a transzaktivációs és a DNS-kötő domének között, és feltehetően mind a vad típusú, mind a mutáns fehérje változatokat befogja. A jelenlegi vizsgálatban a GATA3 pozitív volt az ER negatív daganatok felében, amely az összes 3.fokozatú daganat 28% – át tartalmazza (3. táblázat). A további vizsgálatoknak azokra a mechanizmusokra kell összpontosítaniuk, hogy a GATA3 hogyan tartja fenn expresszióját az ER aktiválása nélkül.
a GATA3-ra mint prognosztikai markerre vonatkozó közzétett adatok ellentmondásosak. A GATA3 expresszió elvesztése kedvezőtlen klinikai eredménnyel és rosszabb túléléssel járt . Más vizsgálatokban azonban nem figyeltek meg összefüggést az eredménnyel . Egy tanulmányban a GATA3 expressziót kedvező eredménnyel társították a vizsgálat összes emlődaganatában, míg az asszociáció elveszett, amikor csak ER pozitív rákokat elemeztek . A GATA3 expresszió szorosan kapcsolódik az ER és a PR expresszióhoz, és a GATA3 expresszió elvesztése hasonló az ER expresszió prognosztikai elvesztéséhez. Tanulmányunk azonban nem látott hasonló eredményeket 196 3. fokozatú emlőrákban. Több tényező is hozzájárulhat. Először is, az ügyszám nem volt elég nagy ahhoz, hogy elegendő statisztikai erővel bírjon. Másodszor, az ER és a GATA3 szorosan összefügg a hormonális útvonalon, de még mindig különböző funkcióik lehetnek a tumor progresszióját illetően. Harmadszor, a jelenlegi gyakorlatban az ER pozitív daganatok túlnyomó többségét hormonálisan kezelték. A kezelés befolyásolhatja a prognózist. Négy, túlélési Vizsgálatunk csak 3. fokozatú daganatokat tartalmazott, és az 1.és 2. fokozatú daganatok hozzáadása valószínűleg több GATA3 pozitív daganatot tartalmaz, jobb prognózissal és így jelentős prognosztikai különbséggel. Valójában az elemzés megismétlése az 1.és 2. fokozatú daganatok hozzáadásával a jelenlegi sorozatban szignifikánsan rosszabb túlélést mutatott GATA3 negatív rákos betegek (P = 0,0063) (további fájl 1: S1B ábra).
vizsgálatunkat a 3 .fokozatú emlőrák magas aránya korlátozza (55%), míg becslések szerint az emlőráknak csak egyharmada 3. fokozatú. Jelentős mennyiségű további munka lenne, ha az összes egyidejű 1. és 2.fokozatú daganatot bevonnák a vizsgálatba. Az aránytalan 1.és 2. fokozatú esetek által befolyásolt eredmények közé tartoznak a túlélési elemzések és asszociációs vizsgálatok, amikor a markerek nem oszlottak el egyenletesen a fokozatok között, mint például az ER, a PR, a Her2 és a pTNM státusz. Ezért ezeket az elemzéseket csak 3. fokozatú daganatokban végezték, kivéve az asszociációs vizsgálatokat, amelyek közvetlenül érintették a fokozatot.
egy másik lehetséges korlátozás az egyes speciális típusú rákok arányáról szól ebben a tanulmányban. Vizsgálatunk 10 metaplasztikát tartalmazott (az összes daganat 0,28% – a), 6 cribriform (1,6%), 4 mikropapilláris (1,1%), 5 mucinos (1,4%), 3 tubuláris (0.8%) és 1 apokrin rák (0,3%). A cribriform és tubuláris daganatok kissé felülreprezentáltak, a mucinos és apokrin daganatok pedig kissé alulreprezentáltak, összehasonlítva az egyes speciális típusok ismert százalékaival: 0,2–5% a metaplasztikus, 0,3–0,8% a cribriform, 0,9-2% a micropapillary, 2% a mucinos, 2% a tubuláris és 4% az apokrin rákok esetében . A különbségek azonban nem befolyásolják jelentősen a tanulmány fő következtetéseit.
a tanulmány fő célja a CK7 negatív és GATA3 negatív emlőrák patobiológiájának megértése. Ha a tanulmány eredményeit a metasztatikus emlőrák diagnosztizálásának megkönnyítésére akarjuk alkalmazni, ismernünk kell a ck7 és a GATA3 expressziót az elsődleges és a metasztázis páros párjaiban. Minden bizonnyal külön tanulmányt igényel. Sorozatunkban a CK7 és/vagy GATA3 negatív esetek kis részében később tumor metasztázis alakult ki, azonban a CK7 és GATA3 immunstaineket nem használták ezen metasztázisok diagnosztizálására. A metasztázisok egy része a GATA3 immunstain elérhetővé válása előtt történt. Azonban a klinikai információk, a mikroszkopikus morfológia és más emlőmirigy markerek gyakran elegendőek voltak a diagnózis megállapításához. Egy kísérleti vizsgálatban 12 pár primer tumor és máj metasztázist és 12 pár primer tumor és csont metasztázist gyűjtöttünk össze. Nem volt GATA3 expressziós változás a primer és a májmetasztázisokban: mind a 10 GATA3 pozitív primer megtartotta a GATA3 expressziót a párosított májmetasztázisokban, míg a GATA3 expresszió 2 negatív primerben negatív maradt a párosított májmetasztázisokban. A GATA3 expresszió egy része elveszett a csontmetasztázisban: A GATA3 expresszió 8 pozitív primerben csak 4 párosított csontáttétben maradt meg, a GATA3 expresszió 4 negatív primerben pedig negatív maradt a párosított csontáttétekben. A pontos ok, amiért a GATA3 expresszió Elveszett néhány csontáttétben, nem világos. Ez lehet az expresszió valódi elvesztése (például a kemoterápia utáni), de valószínűbb, hogy összefügg a szöveti feldolgozással, például a vízkőtelenítéssel vagy a mintavételi hibával a csontbiopszia kis mérete miatt. Ugyanez a típusú mintavételi hiba történhet a magbiopsziával vagy a finom tűszívással (FNA). További vizsgálatokra van szükség a GATA3 és a CK7 szerepének feltárására a speciális ráktípusok, például a metaplasztikus, mucinos és apokrin daganatok metasztázisainak diagnosztizálásában.
a jelenlegi sorozatban 8 ck7 és GATA3 kettős negatív emlőrákos esetet azonosítottunk. Mind a nyolc esetet elsődleges emlőráknak tekintették, és a kóros diagnózisokat CK7 és/vagy GATA3 foltok nélkül végezték. Kihívást jelenthetett volna, ha a diagnózis idején CK7 és GATA3 immunstaineket végeztek. A jelenlegi vizsgálat során volt retrospektív diagram áttekintés ezekre az esetekre, beleértve az esetleges nyomon követési előzményeket és nem emlő primer daganatot azonosítottak. Gyakorlatunkban a GATA3 immunstain-t rutinszerűen végzik minden olyan hármas negatív rákon, amely nem rendelkezik in situ komponenssel. Végül csak a történelem és a nyomon követés bizonyos esetekben véglegesen megerősítheti a mell eredetét.
