一部の微生物は、代謝中に硫黄(硫黄)を含む化合物を硫化水素に還元する能力を有しており、これは実験室での同定のための試験尺度として一般的に用いられている。 多数の方法がh2Sの形成を示すのに使用される硫黄および金属の塩の源と変わる微生物によってH2Sの生産を検出するのに使用されています。 SIMは、その半固体性、干渉炭水化物の欠如、および指標としてのペプトン化鉄の使用のために、TSIまたはKIAよりもH2Sの検出においてより敏感である。 但し、鉛のアセテートのペーパーは他の媒体より10倍敏感です。
目的
微生物が硫黄含有化合物を硫化物に還元して硫化水素ガスを生成するかどうかを決定する。
原理
硫化水素ガスの製造を試験するために、試験媒体に鉄化合物と硫黄化合物が含まれています。 硫黄化合物が細菌株によって還元されると硫化水素が生成される。 この試験は、したがって、微生物が代謝過程の間に硫黄含有化合物を硫化物に還元するかどうかを決定する。 H2Sはシスチン、メチオニンのようなアミノ酸を含んでいる硫黄の減少または蛋白質の低下の間にチオ硫酸塩、硫酸塩または亜硫酸塩のような無機硫黄の混合物の減少によってある特定の細菌によって嫌気性の呼吸が酸素へのの代りに硫黄に電子をシャトルするとき作り出されます。 いずれの場合も、硫化第二鉄の黒色沈殿物を形成するために鉄化合物と反応するH2Sが生成される(硫化水素ガス)。 黒色は硫化水素の存在の指標として作用する。 生物によって生成される硫化水素(H2S)ガスの検出。 その特定の有機体の同一証明で助けるのに主に使用されています。
媒体:
このテストは三重の砂糖の鉄(TSI)、Kliglerの鉄の寒天(KIA)、SIM媒体および鉛のアセテートのペーパーを含む複数の媒体の使用と行うことができます。
- H2Sを検出する亜硫酸塩のインドールの運動性(SIM)媒体
この媒体は硫化水素の生産のための表示器として一緒に役立つ鉄の硫酸アンモニウムおよ 硫化水素の生産は硫化鉄、黒い沈殿物がH2Sのガスと反応する鉄のアンモニウムの結果として作り出されるとき検出することができます。
組成:
牛肉抽出物3.0gペプトン30.0g硫黄第一アンモニウム0.2gチオ硫酸ナトリウム0.025g寒天3.0g最終pH(25℃)7.3±0。2蒸留水1000ml
- H2Sを検出するための鉄寒天
この培地は、腸内細菌によるH2S産生を検出するのに適しています。 H2Sは媒体に含まれているクエン酸第二鉄によって検出されます - h2Sを検出するための酢酸鉛紙テスト
H2Sの生産を検出するための敏感な技術が必要な場合は、酢酸鉛紙テストが推奨されます。
手順
I.亜硫酸インドール運動性(SIM)培地
- 刺し接種によって標識されたチューブに生物を接種する。
- 接種したチューブを37℃で24-48時間インキュベートする。
- 培地上に黒い沈殿物が形成されるのを観察する。
II.クリグラー鉄寒天(KIA)および三重糖鉄寒天(TSIA)
- テスト生物をKIAに接種し、夜にわたる適切な温度で孵化させて下さい。
- 媒体の黒化を観察する。
III.酢酸鉛紙試験
- 滅菌ペプトン水または栄養ブロスのチューブまたはボトルに試験生物を接種する。
- 酢酸鉛紙ストリップをボトルまたはチューブの首に媒体の上に挿入し、よくストッパーします。
- 接種した培地を35-37℃でインキュベートし、ストリップの下部の黒化を毎日調べます。
結果
- 肯定的な結果:媒体上の黒化
- 否定的な結果:媒体の黒化無し
使用
- それは家族の腸内細菌科のメンバーの同一証明で主に助け、時折BacteroidesspsおよびBrucella spsのような他の細菌を区別する
- この試験は、他のグラム桿菌からの腸内細菌科(enterics)のメンバーの同定および分化を助ける。
- サルモネラ、フランシセラ、プロテウス種の同定に特に有用である。
制限
- スクロースを利用し、H2Sの産生をもたらす酵素機構を抑制する生物のTSIでH2Sの産生を阻害する可能性があります。
- 酢酸鉛は細菌に毒性があり、一部の細菌の増殖を阻害する可能性があります。 メディアがストリップに触れないようにしてください。
- 完全な同定のために、純粋培養からのコロニーに対して生化学的、免疫学的、分子的、または質量分析試験を行うことが推奨される。
- Tille,P.M.,&Forbes,B.A.(2014). ベイリー&スコットの診断微生物学(第十三版。). ミズーリ州セントルイス:エルゼビア。
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- https://microbenotes.com/hydrogen-sulfide-h2s-production-test/
- www.microbiologyresearch.org/docserver/fulltext/micro/8/3/mic-8-3-397.pdf?expires=1543332392&id=id&accname=guest&checksum=C42277C712F05E5951241893FC8EC3F7
- spot.pcc.edu/~jvolpe/b/bi234/lab/differentialMedia/H2Sproduction.html
- https://senthilprabhu.blogspot.com/2017/10/hydrogen-sulphide-h2s-production-test.html
- https://jb.asm.org/content/jb/10/5/439.full.pdf