西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)酵素

技術情報および関連製品

天然ワサビペルオキシダーゼ

のための製品特性消光係数:403nmで測定された場合EmM=100。1

分子量:(約。 44kDa)
には、ポリペプチド鎖(33,890ダルトン)、ヘミン+Ca2+(約2,000kDa)が含まれている。 および炭水化物(9 4 0 0ダルトン)である。3

等電点:アイソザイムの範囲は3.0–9.0
HRPの少なくとも七つのアイソザイムが存在する。2

ワサビペルオキシダーゼ(HRP)は、ワサビの根(Amoracia rusticana)から単離され、ペルオキシダーゼのフェロプロトポルフィリン群に属する。 HRPは4つのジスルフィド橋を含む一本鎖ポリペプチドである。 それは18%の炭水化物を含んでいる糖蛋白質です。 炭水化物組成物は、特定のアイソザイムに応じて、ガラクトース、アラビノース、キシロース、フコース、マンノース、マンノサミン、およびガラクトサミンからなる。2

基質特異性
HRPは過酸化水素(H2O2)と容易に結合し、得られた複合体は多種多様な発色性水素供与体を酸化することができる。 それはまたtyramine、homovanillic酸および4hydroxyphenyl酢酸のようなluminolおよびisoluminolのような化学発光の基質、およびfluorogenic基質を利用できます。

Enzyme Explorerの基質指数は、ペルオキシダーゼ活性をアッセイするために使用されるいくつかの発色および化学発光水素ドナーへのリンクを提供する。

阻害剤
以下の化合物は、アジ化ナトリウム、シアン化物、L–シスチン、ジクロム酸、エチレンチオ尿素、ヒドロキシルアミン、硫化物、バナジン酸、P–アミノ安息香酸、Cd+2、Co+2、Cu+2、Fe+3、Mn+2、Ni+2、Pb+2.4

pH依存性
pH最適化されたpH依存性
pH最適化されたpH依存性
pH最適化されたpH依存性
pH最適化されたpH依存性
pH最適化されたpH依存性
pH最適化されたpH依存性
ph最適化されたpH依存性
ph最適化されたpH依存性
ph最適化されたpH依存性
HRPの範囲は6.0 6.5です。 PH7.5での活性は最大値の84%である。 酵素は5.0から9.0のpHの範囲で最も安定しています。5

用途
ワサビペルオキシダーゼは、ELISA、免疫ブロッティング、免疫組織化学を含む多くの異なる免疫化学用途において、免疫グロブリンのラベルとして広く HRPは、グルタルアルデヒド、ピリオド酸酸化、ジスルフィド結合、アミノおよびチオール指向のクロスインカーを介して、いくつかの異なる方法によって抗体に結合することができる。 HRPは3つの最も普及した酵素のラベル(hrp、アルカリホスファターゼおよびBガラクトシダーゼ)の最も小さく、最も安定している、glycosylationがより低い非特異的な結合をもたらすので抗体のための最も望ましいラベルです。Glutaraldehydeおよびperiodate conjugationの方法論を記述する6つのプロトコルは、Harlow,E.et a l.7

私達はしみ、組織学およびELISAの適用のための複数の発色および化学発光の検出の試薬を提供します。

私達はまたHRPの結合させた抗体の完全なラインを提供します。

準備手順
溶媒の選択は、意図された用途に依存します。 粉末化された酵素は、可溶性水または0.1Mリン酸緩衝液、pH6(10mg/mL)である。 懸濁液(P6 1 4 0)は、水で希釈することができる。

貯蔵/安定性
粉末ペルオキシダーゼは2-8℃で冷蔵する必要があります。 懸濁液(P6140)は2-8℃で保存する必要があります。

凍結乾燥粉末の温度安定性
溶液の温度安定性
溶液の安定性対pH
溶液の安定性対濃度

RZプロファイル
RZ(Reinheitszahl):吸光度比A403/A275。 これは、酵素活性ではなく、ペルオキシダーゼのヘミン含有量の尺度である。 高いRZ値を有する調製物であっても、低い酵素活性を有し得る。 抗体などのタンパク質をペルオキシダーゼに結合させるには、少なくとも3.0のrz値を持つペルオキシダーゼを選択します。
Spectrophotometric Method to Determine the RZ Value for Peroxidase
Peroxidase Enzymes for Labeling



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