Hydrogensulfidtest-Prinsipp, Prosedyre, Bruk Og Tolkning

noen mikroorganismer har en evne til å redusere svovel (Svovel) som inneholder forbindelser til hydrogensulfid under metabolisme som vanligvis brukes som et testmål for identifikasjon i laboratorier. Tallrike metoder brukes til å oppdage h2s-produksjon av mikroorganismer som varierer med svovelkilden og metallsaltene som brukes til å indikere h2s-dannelse. SIM er mer følsom i deteksjon AV H2S enn ENTEN TSI eller KIA, på grunn av sin halvfaste natur, mangel på forstyrrende karbohydrater og bruk av peptonisert jern som indikator. Blyacetatpapir er imidlertid 10 ganger mer følsomt enn andre medier.

Mål

for å avgjøre om mikroben reduserer svovelholdige forbindelser til sulfider for å produsere hydrogensulfidgass.

Prinsipp

en jernforbindelse og en svovelforbindelse er inkludert i testmediet for å teste for produksjon av hydrogensulfidgass. Hydrogensulfid produseres dersom svovelforbindelsen reduseres av bakteriestammen. Denne testen bestemmer således om mikroben reduserer svovelholdige forbindelser til sulfider under prosessen med metabolisme. H2S produseres av visse bakterier gjennom reduksjon av svovelholdige aminosyrer som cystin, metionin eller gjennom reduksjon av uorganiske svovelforbindelser som tiosulfater, sulfater eller sulfitter under proteindegradering eller når anaerob respirasjon transporterer elektronene til svovel i stedet for til oksygen. I begge tilfeller produseres h2s (hydrogensulfidgass) som reagerer med jernforbindelsen for å danne det svarte bunnfallet av jernsulfid. Den svarte fargen fungerer som en indikator for tilstedeværelsen av hydrogensulfid. Påvisning av hydrogensulfid (H2S) gass produsert av en organisme. brukes hovedsakelig for å bistå i identifisering av den aktuelle organismen.

Media:

denne testen kan utføres med bruk av Flere medier, inkludert Triple Sugar Iron (TSI), Kligler ‘ S Iron Agar (KIA), sim medium og Blyacetatpapir.

• Sulfittindolmotilitet (SIM) medium for å oppdage H2S
  dette mediet inneholder jernholdig ammoniumsulfat og natriumtiosulfat, som deretter sammen tjener som indikatorer for produksjon av hydrogensulfid. Produksjon av hydrogensulfid kan detekteres når jernholdig sulfid, et svart bunnfall, produseres som et resultat av jernholdig ammoniumsulfat som reagerer MED h2s-gass.

Sammensetning:

oksekjøtt ekstrakt 3.0 g Pepton30.0 G Jernholdig ammonium sulfat 0.2 G Natriumtiosulfat 0.025 G Agar 3.0 G Endelig pH (ved 25°C) 7.3±0.2 Destillert vann 1000ml

• Jernagarer for å oppdage H2S
  dette mediet er egnet for å oppdage H2S-produksjon av enterobakterier. H2S oppdages av ferriccitrat inneholdt i mediet
• Blyacetatpapirtest for å oppdage H2S
  når en sensitiv teknikk for å oppdage H2S-produksjon er nødvendig, anbefales blyacetatpapirtesten.

Prosedyre

i. i Sulfittindolmotilitet (SIM) medium

1. Inokulere organismen i merket rør ved hjelp av stikk inokulering.
2. Inkuber de inokulerte rørene ved 37°C i 24-48 timer.
3. Observer for dannelsen av svart bunnfall på mediet.

II. I Kligler jern agar (KIA) Og Trippel Sukker Jern Agar (TSIA)

1. Inokuler testorganismen i KIA og inkuber den ved passende temperatur over natten.
2. Observer for sverting av mediet.

III. Blyacetatpapirtest

1. Inokulere et rør eller en flaske sterilt peptonvann eller næringsbuljong med testorganismen.
2. Sett inn en blyacetatpapirstrimmel i halsen på flasken eller røret over mediet, og proppen godt.
3. Inkuber det inokulerte mediet ved 35-37oC, og undersøk daglig for en svetting av den nedre delen av stripen.

Resultater

• Positivt resultat:Blackening på mediet
• Negativt resultat:Ingen sverting på mediet

Bruker

• det brukes hovedsakelig for å hjelpe til med identifisering Av Medlemmer Av Familien Enterobacteriaceae og noen ganger for å skille andre bakterier som Bacteroidessps og Brucella sps.
• testen hjelpemidler i identifisering og differensiering av medlemmer Av Enterobacteriaceae (enterics) fra Andre Gram – baciller.
• Det er spesielt nyttig for å identifisere Salmonella, Francisella og Proteus arter.

Begrensninger

• h2s-produksjon kan hemmes PÅ TSI for organismer som bruker sukrose og undertrykker enzymmekanismen som resulterer i produksjon AV H2S.
• Blyacetat er giftig for bakterier og kan hemme veksten av enkelte bakterier. Ikke la mediet berøre stripen.
• det anbefales at biokjemisk, immunologisk, molekylær eller massespektrometri testing utføres på kolonier fra ren kultur for fullstendig identifikasjon.

1. Tille, Pm, & Forbes, Ba (2014). Bailey & Scotts diagnostiske mikrobiologi (Trettende utgave.). St. Louis, Missouri: Elsevier.
2. Cappuccino J. G. Og Sherman N. 2008. Mikrobiologi: En Laboratoriehåndbok, 8.utg. Pearson Benjamin Cummings, San Francisco, CA, usa.
3. www.vumicro.com/vumie/help/VUMICRO/Hydrogen_Sulfide_Production_Test.htm
4. mic.microbiologyresearch.org/content/journal/micro/10.1099/00221287-8-3-397
5. https://microbenotes.com/hydrogen-sulfide-h2s-production-test/
6. www.microbiologyresearch.org/docserver/fulltext/micro/8/3/mic-8-3-397.pdf?expires=1543332392&id=id&accname=guest&checksum=C42277C712F05E5951241893FC8EC3F7
7. spot.pcc.edu/~jvolpe/b/bi234/lab/differentialMedia/H2Sproduction.html
8. https://senthilprabhu.blogspot.com/2017/10/hydrogen-sulphide-h2s-production-test.html
9. https://jb.asm.org/content/jb/10/5/439.full.pdf