Teknisk Informasjon Og Relaterte Produkter
Produktegenskaper For Innfødt Pepperrot Peroxidase
Utryddelseskoeffisient: EmM = 100 målt ved 403 nm.1
Molekylvekt: (ca. 44 kDa)
Inkluderer polypeptidkjeden (33 890 Dalton), hemin pluss Ca2+ (ca. 700 Dalton),
og karbohydrat (9400 Dalton).3
Isoelektrisk Punkt: Isozymer varierer fra 3,0-9,0
minst syv isozymer AV HRP eksisterer.2
Pepperrot peroxidase (HRP) er isolert fra pepperrotrøtter (Amoracia rusticana) og tilhører ferroprotoporfyrin-gruppen av peroxidaser. HRP ER et enkeltkjedet polypeptid som inneholder fire disulfidbroer. Det er et glykoprotein som inneholder 18% karbohydrat. Karbohydratblandingen består av galaktose, arabinose, xylose, fukose, mannose, mannosamin og galaktosamin, avhengig av det spesifikke isozymet.2
Substratspesifisitet
HRP kombinerer lett med hydrogenperoksid (H2O2), og det resulterende komplekset kan oksidere et bredt utvalg av kromogene hydrogendonorer. Det kan også benytte kjemiluminescerende substrater som luminol og isoluminol, og fluorogene substrater som tyramin, homovanillinsyre og 4–hydroksyfenyleddiksyre.
Enzymutforskerens Substratindeks gir koblinger til flere kromogene og kjemiluminescerende hydrogendonorer som brukes til å analysere peroksidaseaktivitet.
Inhibitorer
følgende forbindelser er inhibitorer av pepperrotperoksidase: natriumazid, cyanid, l–cystin, dikromat, etylenetiourea, hydroksylamin, sulfid, vanadat, p–aminobenzoesyre, Cd+2, Co+2, Cu+2, Fe+3, Mn+2, Ni+2, Pb+2,4
Ph-Avhengighet
pH-Avhengigheten optimal hrp er i området 6,0 Til 6,5. Aktivitet ved pH 7,5 er 84% av maksimumet. Enzymet er mest stabilt i pH-området fra 5,0 til 9,0.5
Applikasjoner
Pepperrot peroxidase er mye brukt som en etikett for immunoglobuliner i mange forskjellige immunokjemi applikasjoner, inkludert ELISA, immunoblotting og immunhistokjemi. HRP kan konjugeres til antistoffer ved flere forskjellige metoder, inkludert glutaraldehyd, periodatoksydasjon, gjennom disulfidbindinger, og også via amino-og tiol-rettede kryss-inkers. HRP ER den mest ønskede etiketten for antistoffer siden DEN er den minste og mest stabile av de tre mest populære enzymetikettene (HRP, alkalisk fosfatase og b-galaktosidase), og dens glykosylering fører til lavere ikke-spesifikk binding.6 Protokoller som beskriver glutaraldehyd og periodatkonjugasjonsmetoder kan vurderes I Harlow, E. et al.7
Vi tilbyr flere kromogene og kjemiluminescerende deteksjonsreagenser for blotting, histologi og ELISA-applikasjoner.
Vi tilbyr også EN komplett serie HRP – konjugerte antistoffer.
Instruksjoner For Tilberedning
valget av løsemiddel vil avhenge av tiltenkt påføring. De pulveriserte enzymene er løselig vann eller 0,1 m fosfatbuffer, pH 6 (10 mg / mL). Suspensjonen (P6140) kan fortynnes i vann.
Lagring / Stabilitet
de pulveriserte peroksidasene skal kjøles ved 2-8 °C. Fryselagring er også akseptabelt, men ikke nødvendig. Suspensjonen (P6140) skal lagres ved 2-8 °C. hvis de er lagret riktig, har disse produktene en holdbarhet på minst to år.
Temperaturstabilitet Av Lyofiliserte Pulver
Temperaturstabilitet Av Løsninger
Stabilitet Av Løsninger vs. pH
Stabilitet Av Løsninger Vs. Konsentrasjon
Rz Profil
RZ( Reinheitszahl): absorbansforholdet A403/A275. Det er et mål på hemininnholdet i peroxidasen, ikke enzymaktiviteten. Selv preparater med høy rz-verdi kan ha lav enzymatisk aktivitet. For konjugerende proteiner som antistoffer mot peroxidase, velg en peroxidase med EN rz-verdi på minst 3,0.
Spectrophotometric Method to Determine the RZ Value for Peroxidase
Peroxidase Enzymes for Labeling
« Meny
