ponieważ nie ma systematycznych badań kliniczno-patologicznych nad nowotworami piersi ujemnymi CK7 i GATA3 oraz ograniczonych badań charakteryzujących prognostyczną użyteczność ekspresji GATA3 w raku piersi, obecne badanie dostarczyło szczegółowych informacji, które są brak w literaturze.
barwienie CK7 nie jest rutynowo stosowane w pierwotnej diagnostyce raka piersi, z wyjątkiem rzadkich przypadków, gdy kliniczne i patologiczne dowody skłaniają do wykluczenia wtórnego źródła raka. Ujemne guzy piersi CK7 mogą stanowić wyzwanie diagnostyczne w nowotworach przerzutowych i nowotworach nieznanego pochodzenia. Kompleksowa charakterystyka ujemnego raka piersi CK7 może być przydatna naukowo i diagnostycznie.
w obecnym badaniu stwierdziliśmy, że aż 13% raków piersi 3 stopnia i 30% raków metaplastycznych miało ujemny wynik CK7. Ekspresja CK7 nie była istotnie związana z wiekiem, stadium zaawansowania, statusem receptora i podtypem molekularnym. Spośród 11 typów histologicznych włączonych do badania, utratę ekspresji CK7 obserwowano tylko w guzach przewodowych lub metaplastycznych.
w oparciu o raka piersi 3. stopnia, analiza przeżycia wykazała, że ekspresja CK7 nie miała wpływu na ogólne wyniki (Fig. 2). Biorąc pod uwagę fakt, że guzy stopnia 1 i 2 częściej zachowują ekspresję CK7 i wiążą się z lepszymi rokowaniami, analiza przeżycia guzów piersi o spodziewanym rozkładzie stopnia (około 34% stopnia 3 zamiast 55% W tej serii, patrz poniżej) prawdopodobnie wykaże znaczący związek utraty ekspresji CK7 ze słabym wynikiem pacjenta. Rzeczywiście, jeśli guzy stopnia 1. I stopnia 2. zostały włączone do obecnej serii, zaobserwowano znaczący związek pomiędzy gorszym całkowitym przeżyciem a pacjentami z utratą ekspresji CK7 (P = 0,0084) (dodatkowy plik 1: Rysunek S1A). Utrata CK7 w guzie może wskazywać na inicjację innego szlaku różnicowania, obecność przejścia nabłonkowego do mezenchymalnego, dedifferencjację lub wzmocnioną „stemness”guza. Należy przeprowadzić więcej badań w celu przeprowadzenia dalszych badań.
w przeciwieństwie do guzów ujemnych CK7, rak piersi ujemny GATA3 zyskał większą uwagę zarówno patologów diagnostycznych, jak i biologów raka. Odsetek ujemnych nowotworów piersi GATA3 różni się w zależności od badania, od 0 do 46% w nowotworach ER dodatnich i od 17 do 97% w nowotworach ujemnych estrogenów . W obecnym badaniu ujemne wskaźniki wyniosły 1,7% w guzach ER dodatnich i 48,6% w guzach er ujemnych. Wśród opublikowanych badań, w których zastosowano to samo przeciwciało i takie samo odcięcie pozytywności jak w tym badaniu, ujemne wskaźniki GATA3 wahały się od 17 do 56%, zgodnie z naszym odkryciem 17,1%. Odnotowane ujemne wskaźniki GATA3 w nowotworach metaplastycznych wahały się od 44 do 82%, co było zgodne z 70% (7 z 10) W obecnym badaniu. Ponadto stwierdziliśmy, że żaden z guzów płata i tych z mieszanymi cechami płata i przewodu nie był ujemny, co było zgodne z większością opublikowanych badań .
GATA3 jest wymagany dla zależnych od ER procesów komórkowych, a GATA3 i ER uczestniczą w pozytywnych pętlach sprzężenia zwrotnego, z których każdy stymuluje ekspresję drugiego . Wymuszona ekspresja GATA3 w mysim modelu raka sutka wykazała działanie ochronne przy poprawie rokowania . Mutacje GATA3 w raku piersi są stosunkowo częste. Na podstawie analiz przeprowadzonych przez cBioPortal na podstawie największego publicznie dostępnego zbioru danych dotyczących raka piersi, Molecular Taxonomy of Breast Cancer International Consortium (METABRIC), 11,5% (250/2173) guzów piersi posiadało mutacje somatyczne GATA3. Spośród 250 mutacji 193 (77,2%) było okrojonych, 52 (20,8%) było mutacjami typu missense, a 5 (2%) było mutacjami typu inframe. Mutacje GATA3 były częściej obserwowane w mieszanych inwazyjnych i mucynowych nowotworach (P = 0, 0124) i bardziej prawdopodobne, że będą dodatnie dla receptorów estrogenowych (P < 0, 0001), ujemne dla Her2 (P = 0, 0002), o niższym stopniu nasilenia (P < 0.0001) oraz z niższymi stopniami pT (Stopień 1 i 2) (P = 0,0254) (dodatkowy plik 1: Tabela S1). Zmutowane guzy GATA3 były związane z lepszymi wynikami pacjentów (P = 0,0018) (dodatkowy plik1: rysunek S2). Zmutowane białka GATA3 zakłócają głównie Wiązanie DNA, ale domeny transakcyjne są w dużej mierze nienaruszone . Przeciwciało GATA3, którego użyliśmy (klon L50–823), zostało podniesione przeciwko segmentowi peptydowemu między transaktywacją a domenami wiążącymi DNA i prawdopodobnie wychwytuje zarówno dzikie, jak i zmutowane wersje białek. W obecnym badaniu GATA3 był dodatni w połowie guzów ER ujemnych, stanowiących 28% wszystkich guzów stopnia 3 (Tabela 3). Dalsze badania powinny koncentrować się na mechanizmach, w jaki sposób GATA3 utrzymuje swoją ekspresję bez aktywacji ER.
opublikowane dane dotyczące GATA3 jako markera prognostycznego są sprzeczne. Utrata ekspresji GATA3 była związana z niekorzystnym wynikiem klinicznym i gorszym przeżyciem . Jednak w innych badaniach nie obserwowano związku z wynikami leczenia . W jednym badaniu stwierdzono, że ekspresja GATA3 wiąże się z korzystnym wynikiem we wszystkich guzach piersi w badaniu, podczas gdy związek został utracony, gdy analizowano tylko raka er dodatniego. Ekspresja GATA3 jest ściśle związana z ekspresją ER i PR, a utrata ekspresji GATA3 jest postulowana jako podobna do utraty ekspresji ER. Jednak w naszym badaniu nie zaobserwowano podobnych wyników w 196 rakach piersi stopnia 3. Wiele czynników może się przyczynić. Po pierwsze, liczba przypadków nie była wystarczająco duża, aby mieć wystarczającą moc statystyczną. Po drugie, ER i GATA3 są ściśle powiązane w szlaku hormonalnym, ale nadal mogą mieć różne funkcje co do progresji nowotworu. Po trzecie, w obecnej praktyce zdecydowana większość guzów er dodatnich była leczona hormonalnie. Leczenie może mieć wpływ na rokowanie. Po czwarte, nasze badanie dotyczące przetrwania obejmowało tylko guzy stopnia 3, a dodanie większej liczby guzów stopnia 1 I stopnia 2 prawdopodobnie obejmie więcej guzów dodatnich GATA3 z lepszym rokowaniem, a tym samym ze znaczną różnicą prognostyczną. Rzeczywiście, powtarzanie analizy przez dodanie guzów stopnia 1 I stopnia 2 w bieżącej serii wykazało znacznie gorsze przeżycie pacjentów z rakiem bez GATA3 (P = 0,0063) (dodatkowy plik 1: Rysunek S1B).
nasze badania są ograniczone wysokim odsetkiem raka piersi stopnia 3 (55%), podczas gdy oszacowano, że tylko jedna trzecia raka piersi jest stopnia 3 . Znaczna ilość dodatkowych prac byłaby zaangażowana, gdyby wszystkie równoczesne guzy stopnia 1 I stopnia 2 zostały włączone do badania. Wyniki, na które wpływałyby nieproporcjonalne przypadki stopnia 1. I stopnia 2., obejmują analizy przeżycia i badania asocjacyjne, gdy markery nie były równomiernie rozłożone między stopnie, takie jak status ER, PR, Her2 i pTNM. Dlatego te analizy były wykonywane tylko w guzach stopnia 3, z wyjątkiem badań asocjacyjnych, które bezpośrednio dotyczyły stopnia.
inne możliwe ograniczenie dotyczy proporcji każdego nowotworu specjalnego typu w tym badaniu. Nasze badania obejmowały 10 metaplastycznych (0,28% wszystkich guzów), 6 cribriform (1,6%), 4 mikropapilarne( 1,1%), 5 śluzowych (1,4%), 3 kanalikowe (0.8%) i 10% (0,3%). Guzy cribriform i tubular były nieco nadreprezentowane, a guzy mucinous i apokrynowe były nieco niedostatecznie reprezentowane, w porównaniu ze znanymi odsetkami dla każdego szczególnego typu: 0,2 do 5% dla metaplastycznych, 0,3–0,8% dla cribriform, 0,9–2% dla mikropapilarnych, 2% dla mucinous, 2% dla kanalików i 4% dla apokrynowych nowotworów . Różnice nie wpływają jednak znacząco na główne wnioski z tego badania.
głównym celem badania jest zrozumienie patobiologii raka piersi z ujemnym wynikiem CK7 i ujemnym wynikiem GATA3. Jeśli chcemy zastosować wyniki tego badania w celu ułatwienia rozpoznania przerzutowego raka piersi, musimy znać ekspresję CK7 i GATA3 w dopasowanych parach pierwotnego i przerzutowego. To z pewnością wymaga oddzielnego badania. Niewielka część ujemnych przypadków CK7 i/lub GATA3 w naszej serii rozwinęła później przerzuty nowotworowe; jednak immunostainy CK7 i GATA3 nie zostały wykorzystane do rozpoznania tych przerzutów. Niektóre z przerzutów wystąpiły zanim GATA3 immunostain stał się dostępny. Jednak informacje kliniczne, mikroskopowa morfologia i inne markery gruczołów sutkowych były często wystarczające do ustalenia diagnozy. W badaniu pilotażowym zebraliśmy 12 par guza pierwotnego i przerzutów do wątroby oraz 12 par guza pierwotnego i przerzutów do kości. Nie stwierdzono zmiany ekspresji GATA3 w pierwotnych i przerzutach do wątroby: wszystkie 10 pierwotnych z gata3 dodatnim zachowało ekspresję GATA3 w sparowanych przerzutach do wątroby, a ekspresja GATA3 w 2 pierwotnych z ujemnym pozostawała ujemna w sparowanych przerzutach do wątroby. Część ekspresji GATA3 została utracona w przerzutach do kości: Ekspresja GATA3 w 8 dodatnich badaniach pierwotnych została zachowana tylko w 4 sparowanych przerzutach do kości, a ekspresja GATA3 w 4 ujemnych badaniach pierwotnych pozostała ujemna w sparowanych przerzutach do kości. Dokładna przyczyna utraty ekspresji GATA3 w niektórych przerzutach do kości jest niejasna. Może to być prawdziwa utrata ekspresji (np. po chemioterapii), ale jest bardziej prawdopodobne, że będzie związana z przetwarzaniem tkanek, takim jak odwapnienie lub błąd pobierania próbek z powodu małego rozmiaru biopsji kości. Ten sam typ błędu pobierania próbek może się zdarzyć w przypadku biopsji rdzeniowej lub aspiracji cienkoigłowej (Fna). Potrzebne są dalsze badania w celu zbadania roli GATA3 i CK7 w diagnozowaniu przerzutów specjalnych typów nowotworów, takich jak guzy metaplastyczne, śluzowe i apokrynowe.
w obecnej serii zidentyfikowaliśmy 8 przypadków podwójnego ujemnego raka piersi CK7 i GATA3. Wszystkie osiem przypadków uznano za pierwotny rak piersi, a diagnozę patologiczną wykonano bez plam CK7 i / lub GATA3. Może to być trudne, jeśli w momencie diagnozy wykonano immunostainy CK7 i GATA3. Podczas obecnego badania, mieliśmy retrospektywny przegląd wykresów dla tych przypadków, w tym wszelkich obserwacji historii i nie stwierdzono guza pierwotnego Nie-piersi. W naszej praktyce GATA3 immunostain jest rutynowo wykonywany na każdym potrójnie ujemnym raku, który nie ma składnika in situ. Ostatecznie tylko historia i obserwacji może ostatecznie potwierdzić pochodzenie piersi w niektórych przypadkach.
