metody izolacji i identyfikacji gatunków Rothia w jamie ustnej

Rothia dentocariosa i Rothia mucilaginosa, które są bakteriami Gram-dodatnimi, są częścią normalnej flory w ludzkiej jamie ustnej i gardle. Ponadto przewiduje się, że Rothia aeria, która została po raz pierwszy wyizolowana z próbek powietrza w rosyjskiej stacji kosmicznej Mir, będzie mieszkanką jamy ustnej. Pacjenci z obniżoną odpornością są często zakażani przez te organizmy, co prowadzi do różnych chorób ogólnoustrojowych. Udział tych organizmów w infekcjach jamy ustnej nie przyciąga niewielkiej uwagi, a ich rozmieszczenie w jamie ustnej nie zostało w pełni wyjaśnione z powodu trudności w dokładnej identyfikacji tych organizmów. Do oceny faktycznego występowania tych organizmów w jamie ustnej niezbędne jest odpowiednie podłoże selektywne dla gatunków Oral Rothia, w tym R. aeria. Aby zbadać populację bakterii w jamie ustnej, w tym badaniu opracowano nowy środek selektywny (ORSM) do izolowania gatunków Oral Rothia. ORSM składa się z tryptonu, glukonianu sodu, proszku Lab-Lemco, fluorku sodu, neutralnej akryflawiny, linkomycyny, kolistyny i agaru. Średnia poprawa wzrostu doustnych gatunków Rothia na ORSM wynosiła 96,7% w porównaniu z agarem BHI-Y. Wzrost innych reprezentatywnych bakterii jamy ustnej, tj. rodzajów Streptococcus, Actinomyces, Neisseria i Corynebacterium, był wyraźnie hamowany na pożywce selektywnej. Startery PCR zostały zaprojektowane w oparciu o częściowe sekwencje genów 16S rDNA z gatunku Oral Rothia. Startery te reagowały z każdym organizmem i nie reagowały z innymi gatunkami Rothia nieleczącymi do jamy ustnej ani z reprezentatywnymi bakteriami jamy ustnej. Wyniki te wykazały, że te startery są przydatne do identyfikacji gatunków Oral Rothia. Prosta procedura multipleksowego PCR z użyciem tych starterów była niezawodną metodą identyfikacji doustnych gatunków Rothia. Proporcję gatunków Oral Rothia w próbkach śliny pobranych od 20 osób zbadano metodą hodowli z użyciem ORSM. Rothia dentocariosa, Rothia mucilaginosa i R. aeria stanowiły 1,3%, 5,9% i 0.8% całkowitej liczby bakterii uprawnych na agarze BHI-Y w jamach ustnych wszystkich badanych, odpowiednio. Wskazano, że wśród gatunków Oral Rothia, R. mucilaginosa jest najbardziej dominująca w jamie ustnej ludzi. Nowatorski środek selektywny, ORSM, był przydatny do izolowania każdego gatunku Oral Rothia.



+