isolerings-och identifieringsmetoder för Rothia-arter i munhålor

Rothia dentocariosa och Rothia mucilaginosa som är grampositiva bakterier är en del av den normala floran i den mänskliga munhålan och svalget. Dessutom förutspås Rothia aeria, som först isolerades från luftprover i den ryska rymdstationen Mir, vara en oral invånare. Immunkompromitterade patienter smittas ofta av dessa organismer, vilket leder till olika systemiska sjukdomar. Dessa organismers involvering i orala infektioner har väckt liten uppmärksamhet, och deras fördelning i munhålan har inte klargjorts fullständigt på grund av svårigheter att exakt identifiera dessa organismer. Ett lämpligt selektivt medium för orala Rothia-arter, inklusive R. aeria, är nödvändigt för att bedöma den verkliga förekomsten av dessa organismer i munhålan. För att undersöka bakteriepopulationen i munhålan utvecklades ett nytt selektivt medium (ORSM) för att isolera orala Rothia-arter i denna studie. ORSM består av trypton, natriumglukonat, Lab-Lemco-pulver, natriumfluorid, neutral akriflavin, lincomycin, kolistin och agar. Den genomsnittliga tillväxtåtervinningen av orala Rothia-arter på ORSM var 96,7% jämfört med den på BHI-Y-agar. Tillväxt av andra representativa orala bakterier, dvs genera Streptococcus, Actinomyces, Neisseria och Corynebacterium, hämmades anmärkningsvärt på det selektiva mediet. PCR-primers designades baserat på partiella sekvenser av 16S rDNA-gener av orala Rothia-arter. Dessa primers reagerade på varje organism och reagerade inte på andra icke-orala Rothia-arter eller representativa orala bakterier. Dessa resultat indikerade att dessa primers är användbara för att identifiera orala Rothia-arter. En enkel multiplex PCR-procedur med användning av dessa primers var en tillförlitlig metod för att identifiera orala Rothia-arter. Andelen orala Rothia-arter i salivprover som samlats in från 20 personer undersöktes med odlingsmetod med användning av ORSM. Rothia dentocariosa, Rothia mucilaginosa och R. aeria stod för 1,3%, 5,9% och 0.8% av det totala odlingsbara bakterienummeret på BHI-Y-agar i munhålorna hos alla ämnen. Det indikerades att bland orala Rothia-arter är R. mucilaginosa mest dominerande i munhålan hos människor. Ett nytt selektivt medium, ORSM, var användbart för att isolera varje oral Rothia-Art.



+