vissa mikroorganismer har förmåga att reducera svavel (svavel) innehållande föreningar till vätesulfid under metabolism som vanligtvis används som ett testmått för identifiering i laboratorier. Många metoder används för att detektera H2S-produktion av mikroorganismer som varierar med svavelkällan och metallsalterna som används för att indikera H2S-bildning. SIM är känsligare vid detektering av H2S än antingen TSI eller KIA, på grund av dess halvfasta natur, dess brist på störande kolhydrater och användningen av peptoniserat järn som en indikator. Blyacetatpapper är dock 10 gånger känsligare än andra medier.
mål
för att avgöra om mikroben reducerar svavelhaltiga föreningar till sulfider för att producera vätesulfidgas.
princip
en järnförening och en svavelförening ingår i testmediet för att testa för produktion av vätesulfidgas. Vätesulfid produceras om svavelföreningen reduceras av bakteriestammen. Detta test bestämmer således huruvida mikroben reducerar svavelhaltiga föreningar till sulfider under metabolismsprocessen. H2S produceras av vissa bakterier genom reduktion av svavelinnehållande aminosyror som cystin, metionin eller genom reduktion av oorganiska svavelföreningar såsom tiosulfater, sulfater eller sulfiter under proteinnedbrytning eller när anaerob andning skyttar elektronerna till svavel istället för till syre. I båda fallen produceras H2S (vätesulfidgas) som reagerar med järnföreningen för att bilda den svarta fällningen av järnsulfid. Den svarta färgen fungerar som en indikator för närvaron av vätesulfid. Detektion av vätesulfid (H2S) gas som produceras av en organism. används främst för att hjälpa till att identifiera den specifika organismen.
Media:
detta test kan utföras med användning av flera medier inklusive trippel Sockerjärn (TSI), Kliglers Järnagar (KIA), SIM-medium och Blyacetatpapper.
- sulfit indol motility (SIM) medium för att detektera H2S
detta medium innehåller järnammoniumsulfat och natriumtiosulfat, som sedan tillsammans fungerar som indikatorer för produktion av vätesulfid. Produktion av vätesulfid kan detekteras när järnsulfid, en svart fällning, produceras som ett resultat av järnammoniumsulfat som reagerar med H2S-gas.
sammansättning:
Nötköttsextrakt 3,0 g pepton 30,0 g Järnammoniumsulfat 0,2 g natriumtiosulfat 0,025 g Agar 3,0 g slutligt pH ( vid 25 kg C) 7,3 kg 0.2 destillerat vatten 1000ml
- järn agars för att detektera H2S
detta medium är lämpligt för att detektera H2S produktion av enterobakterier. H2S detekteras av järncitratet i mediet - Blyacetatpapperstest för att detektera H2S
när en känslig teknik för detektering av H2S-produktion krävs rekommenderas blyacetatpapperstestet.
förfarande
I. I sulfit indol motility (SIM) medium
- inokulera organismen i märkt rör med hjälp av stick ympning.
- inkubera de inokulerade rören vid 37 kcal C i 24-48 timmar.
- Observera för bildandet av svart fällning på mediet.
II. i Kligler järn agar (KIA) och trippel socker järn Agar (TSIA)
- inokulera testorganismen i KIA och inkubera den vid lämplig temperatur över natten.
- Observera för svärtning av mediet.
III. Blyacetatpapperstest
- inokulera ett rör eller en flaska sterilt peptonvatten eller näringsbuljong med testorganismen.
- sätt i en blyacetatpappersremsa i flaskans eller rörets hals Ovanför mediet och propp väl.
- inkubera det inokulerade mediet vid 35-37oC och undersök dagligen för en svärtning av den nedre delen av remsan.
resultat
- positivt resultat: svärtning på mediet
- negativt resultat:Ingen svärtning på mediet
använder
- det används främst för att hjälpa till att identifiera familjemedlemmar Enterobacteriaceae och ibland för att skilja andra bakterier som Bacteroidessps och Brucella sps.
- testet hjälper till att identifiera och differentiera medlemmar av Enterobacteriaceae (enterics) från andra Gram – baciller.
- det är särskilt användbart för att identifiera Salmonella, Francisella och Proteus arter.
begränsningar
- H2S-produktion kan hämmas på TSD för organismer som använder sackaros och undertrycker enzymmekanismen som resulterar i produktion av H2S.
- blyacetat är giftigt för bakterier och kan hämma tillväxten av vissa bakterier. Låt inte media röra remsan.
- det rekommenderas att biokemiska, immunologiska, molekylära eller masspektrometritester utförs på kolonier från ren odling för fullständig identifiering.
- Tille, P. M., & Forbes, B. A. (2014). Bailey & Scotts diagnostiska mikrobiologi (trettonde upplagan.). St.Louis, Missouri: Elsevier.
- Cappuccino J. G. och Sherman N. 2008. Mikrobiologi: en Laboratoriehandbok, 8: e upplagan. Pearson Benjamin Cummings, San Francisco, Kalifornien, USA.
- www.vumicro.com/vumie/help/VUMICRO/Hydrogen_Sulfide_Production_Test.htm
- mic.microbiologyresearch.org/content/journal/micro/10.1099/00221287-8-3-397
- https://microbenotes.com/hydrogen-sulfide-h2s-production-test/
- www.microbiologyresearch.org/docserver/fulltext/micro/8/3/mic-8-3-397.pdf?expires=1543332392&id=id&accname=guest&checksum=C42277C712F05E5951241893FC8EC3F7
- spot.pcc.edu/~jvolpe/b/bi234/lab/differentialMedia/H2Sproduction.html
- https://senthilprabhu.blogspot.com/2017/10/hydrogen-sulphide-h2s-production-test.html
- https://jb.asm.org/content/jb/10/5/439.full.pdf
