Izolace a identifikace metody Rothia druhů v ústní dutiny

Rothia dentocariosa a Rothia mucilaginosa, které jsou Gram-pozitivní bakterie jsou součástí normální flóry v lidském dutině ústní a hltanu. Kromě toho se předpokládá, že rothia aeria, která byla poprvé izolována ze vzorků vzduchu v ruské vesmírné stanici Mir, je orálním obyvatelem. Imunokompromitovaní pacienti jsou často infikováni těmito organismy, což vede k různým systémovým onemocněním. Zapojení těchto organismů do ústních infekcí přitahovalo malou pozornost a jejich distribuce v ústní dutině nebyla zcela objasněna kvůli obtížím s přesnou identifikací těchto organismů. Vhodné selektivní médium pro orální druhy Rothia, včetně R. aeria, je nezbytné k posouzení skutečné prevalence těchto organismů v ústní dutině. Pro zkoumání bakteriální populace v ústní dutině bylo vyvinuto nové selektivní médium (ORSM) pro izolaci orálních druhů Rothia v této studii. Orsm se skládá z tryptonu, glukonátu sodného, prášku Lab-Lemco, fluoridu sodného, neutrálního akriflavinu, linkomycinu, kolistinu a agaru. Průměrná obnova růstu orálních druhů Rothia na ORSM byla 96,7% ve srovnání s růstem na agaru BHI-Y. Rody Streptococcus, Actinomyces, Neisseria a Corynebacterium, byl pozoruhodně inhibován na selektivním médiu. PCR primery byly navrženy na základě parciálních sekvencí 16S rDNA genů orálních druhů Rothia. Tyto primery reagovaly na každý organismus a nereagovaly na jiné neorální druhy Rothia nebo reprezentativní orální bakterie. Tyto výsledky ukázaly, že tyto primery jsou užitečné pro identifikaci ústních druhů Rothia. Jednoduchý multiplexní PCR postup s použitím těchto primerů byl spolehlivou metodou identifikace orálních druhů Rothia. Podíl orálních druhů Rothia ve vzorcích slin odebraných od 20 subjektů byl zkoumán kultivační metodou pomocí ORSM. Rothia dentocariosa, rothia mucilaginosa a R.aeria představovaly 1,3%, 5,9% a 0.8% z celkového počtu kultivovatelných bakterií na agaru BHI-Y v ústní dutině všech subjektů. Bylo uvedeno, že mezi orálními druhy Rothia je R. mucilaginosa nejvíce převládající v ústní dutině lidí. Nové selektivní médium, ORSM, byl užitečný pro izolaci každého orálního druhu Rothia.



+