Průvodce Koi Herpesvirus Onemocnění: Jak Rozpoznat, Léčbě a Prevenci

první rozpoznaný případ KHV došlo ve Spojeném Království v roce 1996 (Haenen et al. 2004). Od té doby ostatních případech byla potvrzena téměř ve všech zemích, že kultura koi a/nebo kapra s výjimkou Austrálie (Hedrick et al. 2000; Haenen et al. 2004, Pokorová a kol. 2005). Tento informační list je určen k informování veterinářů, biologů, producentů ryb a fandů o nemoci KHV.

co je KHV?

Obrázek 1. Koi se skvrnitými žábry a potopenými očima v důsledku koi herpesvirového onemocnění.

Koi herpesvirus (také známý jako Kaprové herpesvirus 3; CyHV3) je klasifikován jako double-stranded DNA virus patřící do čeledi Alloherpesviridae (což zahrnuje ryby herpesviruses). Práce Valčíka a jeho kolegů (Waltzek et al. 2005, 2009) ukázal, že KHV je opravdu herpesvirus, založené na virus morfologie a genetiky, a je úzce souvisí s kapry pox virus (Kaprové herpesvirus 1; CyHV1) a zlatá rybka krvetvorných nekróze (Kaprové herpesvirus 2; CyHV2). Herpesvirová choroba Koi byla diagnostikována u koi a kapra obecného (Hedrick et al . 2000; OATA 2001). Dalších kaprovitých ryb (např., zlatá rybka; Carassius auratus a amur; Ctenopharyngodon idella) a non-kaprové druhy jsou obvykle ovlivněny KHV, i když KHV DNA byla detekována v tkáních zlaté rybky a ostatní druhy ryb vystavených viru pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR) metody zkoušení (El-Matbouli et al. 2007, Sadler et al. 2008, Bergmann a kol. 2009, Kempter et al. 2009). Hybridní zlatá rybka (samec zlaté rybky C. auratus x samice kapra obecného C. carpio) byli středně rezistentní na mortalitu po experimentální infekci KHV (Hedrick et al. 2006). Zda hybridní kapra, dalších kaprovitých ryb, nebo non-kaprové druhy mohou harbor KHV a později přenášet nemoc naivní kapra odrůd zůstává kontroverzní.

Koi herpesvirus onemocnění (KHVD) ovlivňuje ryby různých věkových kategorií, což často vede k 80-100% úmrtnost u vnímavých populací vody, když jsou teploty mezi 60° a 77°F (16° c a 25 °C) (Haenen et al. 2004). Nicméně, jak s jinými herpesviral infekce, KHV mohou zůstat v infikovaných ryb pro život; proto ryby, které zotavit se z KHV ohniska by měly být považovány za nosiče viru (Petty a Fraser 2005, St. Hilaire et al. 2005, Eide a kol. 2011).

jaké jsou příznaky KHV?

klinické příznaky KHV jsou často nespecifické. Mortalita může u infikovaných populací začít velmi rychle, přičemž úmrtí začíná během 24 až 48 hodin po počátečním nástupu klinických příznaků. V experimentálních studiích zemřelo 82 procent ryb vystavených viru při teplotě vody 72°F (22°C) během prvních 15 dnů (Ronen et al . 2003). KHV infekce může vyvolat závažné gill léze, které vykazují jako gill skvrny s červenými a bílými skvrnami (Obrázek 1) (může být podobné příznaky onemocnění columnaris; SRAC publikace #479b na Onemocnění Columnaris). Bílé skvrny jsou způsobeny nekrózou (smrtí) žábrové tkáně. Žábrové léze způsobené KHV chorobou jsou nejčastějšími klinickými příznaky postižených koi. Jiné vnější příznaky KHV mohou zahrnovat krvácející žábry, potopené oči a bledé skvrny na kůži. Některé Koi infikované KHV mohou mít vroubkovaný nos (Goodwin 2012). V některých případech mohou být nejzřetelnějším problémem sekundární bakteriální a parazitární infekce, které maskují poškození způsobené primární virovou infekcí. Mikroskopické vyšetření žábrových biopsií často odhaluje vysoký počet bakterií a různých parazitů (Hedrick et al . 2000; Haenen et al. 2004).

Vnitřní známky KHVD jsou variabilní a nespecifické, ale může zahrnovat větší než normální srůsty v dutině tělesa a rozšíření a/nebo strakatý vzhled vnitřních orgánů (Hedrick et al. 2000; Haenen et al 2004).

behaviorálně postižené ryby často zůstávají blízko povrchu, plavou letargicky a mohou vykazovat respirační potíže a nekoordinované plavání.

jak se ryby nakazí KHV?

metody šíření (přenosu) KHV zahrnují přímý kontakt s infikovanými rybami, kontakt s tekutinami z infikovaných ryb; a kontakt s vodou, blátem nebo jinými fomity / vektory, které přišly do styku s kontaminovanými systémy. Infekční virus primárně vstupuje do vnímavých ryb kůží, včetně žábrové tkáně (Costes et al . 2009). V závislosti na teplotě vody, vnímavých ryb, které jsou vystaveny KHV mohou nakazit, rozvíjet nemoc, a umře; nebo mohou přežít počáteční ohnisko nákazy, a stát se nositeli viru (Petty a Fraser 2005, St. Hilaire et al. 2005, Eide a kol. 2011). Ryby, které přežijí expozici KHV nebo přijímat KHV vakcína se může stát očkování a rozvíjet úroveň ochrany proti viru, i když délka ochrany zůstává neznámý (Ronen et al. 2003, Perelberg et al. 2008). Přeživší ohniska KHV se mohou stát nositeli viru a mohou být schopni šířit chorobu na vnímavé ryby. Tyto nosné ryby nemusí vykazovat známky infekce KHV, i když mohou přenášet a / nebo vylučovat virus.

jak teplota vody ovlivňuje onemocnění KHV?

KHV onemocnění (KHVD) ohniska se obvykle vyskytují na jaře a na podzim, když teploty vody jsou mezi 60° a 77°F (16° c a 25 °C) s inkubační doba 7-21 dní v závislosti na teplotě vody (Haenen et al. 2004). KHVD při teplotách tak nízké, jak 60°F (15.5-16°C) byla hlášena u kapra ohniska v Japonsku, a experimentální studie ukázaly, že virus může vyvolat úmrtnost až o 82°F (28°C). Teplejší teploty vody rychleji vyvolávají klinické onemocnění ve srovnání s rybami drženými při nižších teplotách. Při nižších teplotách vody (např., 55°F), virus může infikovat ryby bez vyvolání klinických příznaků onemocnění, ale když se znovu objeví permisivní teploty vody, ryby vykazují typické příznaky KHV a mohou zemřít (Gilad et al. 2003, St. Hilaire et al. 2005).

Jak zjistím, zda moje ryby mají KHV?

pozitivní diagnóza KHV vyžaduje pomoc veterináře nebo odborníka na zdraví ryb a diagnostickou laboratoř pro onemocnění ryb. Diagnostická identifikace KHV může být provedena několika přímými a nepřímými metodami. Přímé metody jsou postupy, které detekují skutečný virus nebo“ kousky “ viru. Nepřímé metody jsou postupy, které určují, zda ryba má namontované imunitní reakci proti KHV po expozici viru měřením anti-KHV hladiny protilátek v krvi (Adkison et al. 2005, St-Hilaire et al. 2005, 2009).

Přímé metody používané k identifikaci KHV patří: 1) na izolaci viru a určení (tj. rostoucí virus) pomocí citlivé buněčné linie, jako jsou Koi Fin (KF-1) buněčné linie {optimální růst pozorován při teplotách mezi 59° a 77°F (15° a 25°C)} a 2) PCR technikami (tj. testování na přítomnost KHV DNA). Pro tyto přímé diagnostické testy jsou tkáně odstraněny z ryb, které jsou shromážděny živé a poté utraceny. Izolace a detekce viru v tkáních z ryb mrtvých déle než několik hodin může být nespolehlivá. Neletální přímé diagnostické testy jsou k dispozici na vzorcích, jako je krev, fekální materiál, hlen a žaberní klipy (tj. biopsie), ale tyto testy mohou přinést méně definitivní nebo méně přesné výsledky. Pozitivní test buněčné kultury naznačuje aktivní, probíhající infekci KHV. Pozitivní detekce KHV DNA pomocí PCR naznačuje, že virus je přítomen, takže jej lze použít k potvrzení onemocnění KHV u klinicky nemocných ryb a možná i k identifikaci nosičů (Eide et al . 2011).

jednou nepřímou testovací metodou pro KHV, která byla široce používána, je enzymově vázaný imunosorbentní test (ELISA). KHV ELISA používá vzorek krve, a proto je nesmrtícím diagnostickým nástrojem. Údaje ELISA mohou poskytnout důkaz, že ryba v současné době montuje nebo již dříve namontovala imunitní odpověď (tj. Pozitivní test ELISA na KHV naznačuje, že ryby vytvořily protilátky proti KHV po předchozí expozici viru. Imunitní buňky produkující protilátky však potřebují čas, aby se aktivovaly, a v průběhu času, pokud ryba již není nemocná, může se produkce protilátek proti KHV zpomalit nebo zastavit. Proto ELISA nemusí být schopna detekovat protilátky proti KHV, pokud k infekci došlo před lety nebo pokud ryby ještě neměly čas produkovat protilátky.

negativní výsledky přímých nebo nepřímých testů nemusí nutně znamenat, že ryby nejsou přenašeči. Neexistuje žádný test, který by definitivně detekoval všechny nosiče nebo přeživší.

existuje léčba pro KHV?

neexistuje žádná léčba pro KHV. Antivirotika nejsou k dispozici k léčbě KHV nebo jiných virových onemocnění kultivovaných ryb. Studie ukázaly, že koi může přežít ohnisko KHV, pokud se teplota vody během ohniska zvýší na 86°F (30°C) (Ronen et al. 2003). Tato technika však jen nepatrně zvyšuje míru přežití a umělé zvyšování teploty vody nad 80°F v hospodářství může vést ke zvýšenému výskytu dalších běžnějších bakteriálních a parazitárních onemocnění. Vysoké teploty vody se obecně nedoporučují pro běžný chov a řízení koi a kapra obecného. Kromě toho, a co je důležitější, koi, které přežijí ohnisko KHV nebo ty, které jsou vystaveny vysokým teplotám vody, se mohou stát nositeli viru. Tyto nosné koi jsou zdrojem nákazy vnímavých ryb, pokud jsou vhodné podmínky pro vylučování viru a infekci. Vzhledem k předchozí expozici a imunizaci viru, nosné ryby obvykle nepodléhají KHV chorobě nebo nevykazují známky klinické infekce.

v Poslední době, USDA APHIS schválila použití živé oslabené vakcíny pro prevenci KHVD, k podávání společných kaprů nebo koi těžší než 100 gramů (vakcína není schválen pro použití v generačních ryb). Vakcína, původně vyvinutá izraelskou výzkumnou skupinou (Ronen et al. 2003), vytváří vysoké titry protilátek proti KHV a chrání očkované kapry nebo koi při následné virové výzvě (Ronen et al . 2003, Perelberg et al. 2008). Byly však vzneseny obavy týkající se účinnosti očkovací látky a délky ochrany očkovaných ryb. V současné době není známo, zda očkovány ryby stávají nositeli vakcinační kmen nebo jsou-li chráněny proti infekci tím, že wild-type kmen, který bude představovat hrozbu pro neočkované kapra. Další výzvou, s ohledem na vakcíny je, že žádné diagnostické testy jsou komerčně k dispozici, které mohou odlišit očkované proti přirozeně infikovaných/vystavené ryby.

Protože KHV ohnisek způsobily velké ztráty na rybách a kapra zařízení a protože existují obavy, že přeživší jsou dopravci, někdo s koi, které byly diagnostikovány s KHV měli zvážit vylidňování (odstranění celé populace) jako logická možnost. Všechny materiály a systémy, které infikované ryby kontaktovaly, by měly být vyčištěny a dezinfikovány.

virové částice ve vodě prostředí mohou zůstat infekční po dobu až tří dnů (Shimizu et al . 2006). K odstranění viru z vodních systémů a zařízení však lze použít běžné dezinfekční protokoly (viz níže). Biofiltry a biofiltrová média vystavená viru by měla být také důkladně vyčištěna a dezinfikována. Před dezinfekcí by mělo být zařízení očištěno od nečistot nebo organického nahromadění, protože to může snížit účinnost dezinfekčního prostředku. Chlorové roztoky (např. domácí bělidlo) mohou být použity k dezinfekci velkých zařízení nebo systémů bez ryb. Doporučený protokol pro chlor je 200 ppm (200 mg / L) po dobu jedné hodiny (Noga 1996). Správné dávkování této účinné látky závisí na typu použitého chloru. U domácího bělidla, které je 5,25% chlornanu sodného na litr, poskytne 35 mililitrů na galon vody konečnou koncentraci 200 mg/L.

kvartérní amoniové sloučeniny (QACs) mohou být také použity pro systémy a zařízení. Kvartérní amoniové sloučeniny jsou na sítích šetrnější než roztoky chloru. Doporučená koncentrace QAC pro dezinfekci je 500 ppm (500 mg / L) po dobu jedné hodiny (Noga 1996). Správné dávkování QACs závisí na typu / koncentraci v použité směsi, protože koncentrace se budou lišit v závislosti na použitém produktu. Různé produkty QAC se mohou pohybovat od 10 procent do 50 procent účinné látky. Například, Roccal-D Plus® (Pharmacia & Upjohn Company, Pfizer) je přibližně 24 procent aktivní složka; proto konečné koncentraci 500 mg/L by vyžadovalo asi o 7,9 mL Roccal-D Plus® na galon vody. Po použití jakéhokoli typu dezinfekčního prostředku důkladně opláchněte, abyste odstranili zbytkový dezinfekční prostředek, který může zabíjet ryby.

jak lze KHV zabránit?

před získáním jakékoli ryby se nejprve zeptejte dodavatele, zda došlo k závažným nevysvětlitelným ztrátám v populaci. Monitorování a testování pro KHV může být provedeno tím, že laboratorní testy, takže požádejte dodavatele, pokud nějaké testování na KHV bylo provedeno a požádat o kopie laboratorní výsledek dokumentaci. Nejlepší způsob, jak zabránit KHV, je znát své dodavatele ryb a mít s nimi dobrý pracovní vztah.

karanténa (tj. oddělení od ostatních koi) je nejspolehlivější metodou, jak se vyhnout zavlečení patogenů do rybníka nebo zařízení. K provedení účinného karanténního postupu musí být všechny nové ryby chovány v samostatném systému, ideálně v jiné budově nebo oblasti než rezidentní ryby. Rezidentní ryby by měly být krmeny, zpracovány a udržovány před novými rybami. Ryby v karanténě vyžadují vyhrazené vybavení, jako jsou sítě, kbelíky a sifonové hadice, které se používají pouze pro ně. Kromě toho by měl každý, kdo vstoupí a opustí karanténní oblast, používat koupele nohou a mytí rukou. Ryby by měly být v karanténě po dobu minimálně 30 dnů. Konkrétně pro KHV by měla být nová koi umístěna do karantény ve vodě o teplotě 75°F (24°C) po dobu nejméně 30 dnů. Na závěr karantény, žádné nemocné ryby by měl být vyšetřen veterinárním lékařem a/nebo diagnostické laboratoře k vyloučení KHV nebo jiné onemocnění. Pokud jsou všechny ryby zdravé, měly by být z těchto ryb v karanténě odebrány vzorky krve a předloženy k detekci protilátek pomocí ELISA. (Atkinson et al. 2005; St. Hilaire et al. 2009)

Koi nadšenci se vyzývají, aby podporovaly využívání anglickém stylu koi ukazuje, které udržují různé zdroje (vlastníci) koi odděleny během show a soudě. Kromě toho by všichni účastníci výstavy měli používat samostatné sítě, sifonové hadice a další vybavení pro své vlastní ryby. Japonský styl show, ve kterém jsou koi od různých majitelů umístěny společně do stejné nádrže, může vést k šíření nemocí mezi vnímavými rybami. Bez ohledu na styl show by ryby vracející se z výstav měly být umístěny do karantény po dobu minimálně 30 dnů a drženy při 75°F před umístěním zpět do běžné populace. Pro větší bezpečnost může být užitečné testování protilátek proti odběru krve. Přeživší (ryby, které byly dříve vystaveny onemocnění KHV) by nikdy neměly být vzaty na výstavu koi.

Na konci karanténního období a před uvedením všech ryb dohromady, umístěte několik nových koi s několika koi z vymezené populace v odděleném prostoru od zbytku usazeným obyvatelstvem a dívat se na ně na příznaky onemocnění. Tento „test“ může pomoci určit s menším počtem ryb, zda by umístění obou populací po karanténě mohlo způsobit problémy. Bohužel neexistují žádné záruky.

koho mám kontaktovat, pokud mám podezření, že moje ryby mají KHV nebo pokud chci více informací?

Komerční ryby výrobci, velkoobchodníci a maloobchodníci na Floridě mohou kontaktovat jednu z následujících University of Florida Ryby Onemocnění, Diagnostické Laboratoře*:

V severní Floridě:

Thomas. B. Waltzek
volně žijících Živočichů a Vodních Veterinární Laboratoř pro Nákazy (WAVDL)
Vodní Pathobiology
University of Florida
Bldg 471, 2173 Mowry Road
Gainesville, Florida 32611
(352) 273-5202
E-mail: [email protected]

V Jižní Floridě:

Roy P. E. Yanong nebo Deborah Strouhance
Tropické Akvakultury Laboratorní
Ryby Onemocnění, Diagnostické Laboratoře,
University of Florida
1408 24. St. SE 33570
Ruskin, Florida
(813) 671-5230
http://tal.ifas.ufl.edu

*vezměte Prosím na vědomí: Tyto laboratoře přijmout případů z komerčních ryb výrobci, velkoobchodníci a maloobchodníci.

Fandy a osobní koi rybník majitelé (nebo komerční ryby výrobci, velkoobchodníci a maloobchodníci mimo Florida), může vyhledávání pro vodní veterinární lékař nebo vodní diagnostické laboratoře v jejich oblasti na AquaVetMed stránky (http://www.aquavetmed.info) nebo http://www.myveterinarian.com/avma/vclPublic/#.

jaké jsou regulační úvahy spojené s KHV?

od ledna 2007 byla KHV přidána do Světové organizace pro zdraví zvířat (OIE; www.oie.int) seznam nemocí pro ryby. Protože tento výpis Oddělení Spojených Států Zemědělství Animal and Plant Health Inspection Service (USDA APHIS) žádá, aby akreditovaných veterinářů a diagnostických laboratoří hlášení pozitivních případů KHV do oblasti veterinární lékař-v-charge (AVIC) státu, kde se ryby pochází. Nebudou však vyžadovány žádné informace o klientovi (např. jméno, adresa). Tyto informace pomohou USDA určit, jaká je prevalence KHV ve Spojených státech. USDA APHIS nemá žádné dovozní hygienické požadavky specifické pro KHV pro koi nebo jiné ryby pohybující se na mezistátní nebo mezinárodní úrovni. Neexistuje žádná povinná depopulace pro populace koi infikovaných KHV. Je na majiteli těchto zvířat a jejich veterinárním lékaři, aby se rozhodli, jaký postup mají.

chovatelé Koi, prodejci, vystavovatelé a veterináři by si měli být vědomi mezinárodních vývozních zdravotních předpisů týkajících se pohybu ryb očkovaných KHV. Dovozní požadavky pro některé země stanoví, že ryby očkované KHV nebudou povoleny. Prosím, podívejte se na APHIS webové stránky pro státní a mezinárodní zdravotní požadavky (uvedeny v tomto pořadí): http://www.aphis.usda.gov/animal_health/animal_dis_spec/aquaculture/aquastates.shtml

http://www.aphis.usda.gov/regulations/vs/iregs/animals/

Nebo se obraťte na místní USDA APHIS VS Prostoru Kanceláře pro pomoc (http://www.aphis.usda.gov/animal_health/area_offices/).

mohou lidé získat KHV?

neexistuje žádný zoonotický zájem o KHV. Herpesvirus zodpovědný za způsobení onemocnění KHV u ryb nezpůsobí onemocnění u lidí.

jak se KHV liší od jiných virových onemocnění?

je důležité odlišit KHV od jiných virů, které mohou způsobit onemocnění u kaprů a koi. Další dva důležité virových onemocnění uznána v kapr jsou jarní virózy kaprů (SVC) a kapr neštovice (Kaprové herpesvirus 1; CyHV1). Tato onemocnění mají významně odlišné důsledky pro řízení a regulaci (Tabulka 1). Jak KHV, tak SVC jsou nyní OIE uvedeny jako oznamované choroby ryb. Nicméně, v USA, SVC je považována za cizí nebo exotické (není k dispozici) ryby onemocnění aquacultured vnímavých druhů, a, jako takový, pověřený veterinární lékař nebo laboratoř je povinen oznámit potvrzených ohnisek USDA APHIS Veterinární Služby úředníků, kteří budou, v pořadí, oznámí mezinárodní úřad pro nákazy ZVÍŘAT. Pro srovnání, KHV je považován za rozšířený ve Spojených státech. USDA APHIS žádá akreditované veterinární lékaře a laboratoře, aby hlásili případy KHV příslušnému veterinárnímu lékaři (AVIC) státu, kde se ohnisko vyskytuje. Tyto informace pomohou USDA určit, jaká je skutečná prevalence KHV v USA, každé ohnisko KHV nebude oznámeno OIE.

Jarní virózy kapr nemoc je způsobena single-stranded RNA virus, Rhabdovirus carpio, a byla hlášena u kapra a koi (C. carpio), amura (C. idella), tolstolobik (Aristichthys nobilis), tolstolobika (Hypophthalmichthys molitrix), Karas obecný (Carassius carassius) a společné zlaté rybky (C. auratus). Další informace o SVC viz tabulka 1 a informační list UF / IFAS „jarní viremie kaprů“ (VM-142).

Kapr neštovice onemocnění (Kaprové herpesvirus 1; CyHV1) je způsobena různými herpesvirus z KHV (Herpesvirus cyprini), který má širokou geografickou distribuci a ovlivňuje kapra a koi. Kapr neštovice obvykle způsobuje hladký zvýšil výrůstky („bradavice-jako mas“) na kůži a ploutvích starší ryb, ale může být spojena s vysokou mortalitou, smažit, méně než dva měsíce věku (Sano et al. 1990). Kapr neštovice není oznamovanou nebo oznamovací povinnosti v USA, Vody, teploty nad 68° F (20°C) pomoci snížit kůži a fin výrůstky na starší ryby, ale neodstraní virus z ryb (Tabulka 1). U zralých ryb je neštovice kapra obvykle neletální, samo-omezující onemocnění (tj. většina, ne-li všechny výrůstky se vyřeší při vyšších teplotách samy o sobě).

Shrnutí

Koi herpesvirus onemocnění je zničující choroby okrasných koi a kapra. Existuje několik metod pro detekci různých stavů infekce. Neexistuje žádná účinná léčba, která by zbavila ryby viru. Dobrý postupů řízení, včetně karantény, testování a chov vhodných, jsou životně důležitou součástí prevence tohoto onemocnění pro všechny koi a kapra výrobců, prodejců a fandů.

srpen 2013