uma vez que não há sistemática anatomoclínica estudos sobre CK7 e GATA3 negativa de tumores de mama e limitado de estudos que caracterizam o prognóstico utilitário de GATA3 expressão no câncer de mama, o atual estudo forneceu informações detalhadas que está faltando na literatura.A coloração
CK7 não é rotineiramente utilizada no diagnóstico primário de cancro da mama, excepto em casos raros quando a evidência clínica e patológica leva à necessidade de excluir uma fonte secundária de cancro. Tumores da mama CK7 negativos podem ser diagnósticos desafiadores em tumores metastáticos e cancros de origem desconhecida. Uma caracterização abrangente do cancro da mama CK7 negativo pode ser científica e útil em termos de diagnóstico.
no estudo actual, descobrimos que 13% dos cancros da mama de Grau 3 e 30% dos cancros metaplásticos eram CK7 negativos. A expressão CK7 não foi significativamente associada à idade, estágio, estado do receptor e subtipo molecular. Entre os 11 tipos histológicos incluídos no estudo, a perda de expressão CK7 foi observada apenas em tumores ductais ou metaplásticos.Com base em cancros da mama de Grau 3, a análise de sobrevivência mostrou que a expressão da CK7 não teve impacto nos resultados globais (Fig. 2). Dado o fato de que os tumores de Grau 1 e 2 são mais propensos a reter a expressão CK7 e associados a melhores prognósticos, a análise de sobrevivência de tumores mamários de distribuição de grau esperado (cerca de 34% do grau 3 em vez de 55% nesta série, ver abaixo) provavelmente irá mostrar uma associação significativa de perda de expressão CK7 com resultados pobres do paciente. De facto, se os tumores de Grau 1 e grau 2 foram incluídos na série actual, observou-se uma associação significativa entre a sobrevivência global pior e os doentes com perda de expressão da CK7 (P = 0, 0084) (ficheiro adicional 1: Figura S1A). A perda de CK7 no tumor pode indicar o início de uma diferente via de diferenciação, presença de transição epitelial para mesenquimal, desdiferenciação, ou aumento do tumor “stemness”. Devem ser realizados mais estudos para novas investigações.
ao contrário de tumores negativos CK7, o câncer de mama negativo GATA3 ganhou mais atenção tanto dos patologistas diagnósticos quanto dos biólogos cancerígenos. A percentagem de cancros da mama GATA3 negativos varia de estudo para estudo, variando de 0 a 46% nos tumores ER positivos e de 17 a 97% nos cancros estrogénios negativos . No estudo atual, as taxas negativas foram 1,7% em ER positivo e 48,6% em ER negativo tumores. Entre os estudos publicados em que foram utilizados o mesmo anticorpo e o mesmo corte de positividade como neste estudo, as taxas negativas do GATA3 variaram de 17 a 56%, consistente com a nossa descoberta de 17,1%. As taxas negativas notificadas de GATA3 em cancros metaplásticos variaram entre 44% e 82%, o que foi consistente com os 70% (7 em 10) no estudo actual. Além disso, descobrimos que nenhum dos tumores lobulares e aqueles com características lobulares e ductais mistas eram negativos GATA3, o que era compatível com a maioria dos estudos publicados .
GATA3 é necessário para os processos celulares dependentes do ER e GATA3 e ER participam em loops de feedback positivo, cada um estimulando a expressão do outro . A expressão forçada do GATA3 no modelo de câncer mamário do rato mostrou um efeito protetor com prognóstico melhorado . Mutações do GATA3 no câncer de mama são relativamente comuns. Com base em análises realizadas através da cBioPortal no maior conjunto de dados disponíveis publicamente sobre o cancro da mama, a taxonomia Molecular do consórcio internacional do cancro da mama (METABRIC) , 11,5% (250/2173) dos tumores da mama albergaram mutações somáticas do GATA3. Das 250 mutações, 193 (77, 2%) foram truncantes, 52 (20, 8%) foram sem sentido e 5 (2%) foram mutações infra-RAM. As mutações GATA3 foram observadas mais frequentemente em cancros invasivos e mucinosos mistos (P = 0, 0124) e com maior probabilidade de serem positivas para o receptor de estrogénio (P < 0, 0001), Her2 negativas (P = 0, 0002), com graus inferiores (P < 0.0001) e com fases de pT inferiores (Grau 1 e 2) (P = 0, 0254) (ficheiro adicional 1: Quadro S1). Os tumores mutados GATA3 foram associados a melhores resultados do paciente (P = 0, 0018) (file1 adicional: figura S2). As proteínas GATA3 mutantes interferem principalmente com a ligação ao ADN, mas os domínios de transactivação estão praticamente intactos . O anticorpo GATA3 que usámos (clone L50-823) foi levantado contra o segmento peptídico entre domínios de transactivação e de ligação ao ADN e, presumivelmente, captura ambas as versões de proteína mutante e de tipo selvagem. No estudo actual, o GATA3 foi positivo em metade dos tumores ER negativos, consistindo em 28% de todos os tumores de Grau 3 (Tabela 3). Outras investigações devem centrar-se nos mecanismos como o GATA3 mantém a sua expressão sem a activar.Os dados publicados sobre o GATA3 como marcador de prognóstico são contraditórios. A perda de expressão do GATA3 tem sido associada a resultados clínicos desfavoráveis e a uma pior sobrevivência . No entanto, não foi observada qualquer associação com o resultado noutros estudos . Num estudo, verificou-se que a expressão GATA3 estava associada a resultados favoráveis em todos os tumores mamários do estudo, enquanto a associação foi perdida quando apenas foram analisados cancros ER positivos . A expressão GATA3 está intimamente associada com a expressão ER e PR e a perda da expressão GATA3 é postulada como sendo semelhante à perda da expressão ER prognosticamente. No entanto, o nosso estudo não observou resultados semelhantes em 196 cancros da mama de Grau 3. Múltiplos factores podem contribuir. Em primeiro lugar, o número de processo não era suficientemente grande para suportar um poder estatístico suficiente. Em segundo lugar, ER e GATA3 estão intimamente relacionados na Via hormonal, mas eles ainda podem ter funções distintas quanto à progressão do tumor. Em terceiro lugar, na prática actual, a grande maioria dos tumores ER positivos foram tratados hormonalmente. O tratamento pode afetar o prognóstico. Quatro, nosso estudo de sobrevivência incluiu apenas tumores de Grau 3 e a adição de mais tumores de Grau 1 e grau 2 é provável que inclua mais tumores GATA3 positivos com melhor prognóstico e, portanto, com uma diferença prognóstica significativa. Na verdade, a análise repetida pela adição de tumores de Grau 1 e grau 2 na série actual mostrou uma sobrevivência significativamente pior dos doentes oncológicos negativos GATA3 (P = 0, 0063) (ficheiro adicional 1: Figura S1B).
o nosso estudo é limitado por uma elevada proporção do cancro da mama de Grau 3 (55%), enquanto se estimou que apenas um terço do cancro da mama é de Grau 3 . Uma quantidade significativa de trabalho adicional estaria envolvido se todos os tumores de grau 1 e grau 2 concomitantes foram incluídos no estudo. Os resultados que seriam afetados por casos desproporcionais de Grau 1 e grau 2 incluem análises de Sobrevivência e estudos de associação quando os marcadores não estavam uniformemente distribuídos entre os graus, tais como ER, PR, Her2 e pTNM. Portanto, estas análises foram realizadas apenas em tumores de Grau 3, exceto estudos de associação que envolveram diretamente o grau.
outra limitação possível é sobre as proporções de cada tipo especial de cancro neste estudo. O nosso estudo incluiu 10 metaplásticos( 0, 28% de todos os tumores), 6 cribriformes (1, 6%), 4 micropapilares (1, 1%), 5 mucinosos (1, 4%), 3 tubulares (0.8%) e 1 cancro apócrino (0, 3%). O cribriform e tubular tumores eram pouco representados e cistadenocarcinoma e apócrinas tumores foram ligeiramente sub-representados, comparando-se aos conhecidos percentuais para cada tipo especial: 0,2 a 5% para metaplastic, de 0,3–0,8% para cribriform, de 0,9–2% para micropapillary, 2% para o cistadenocarcinoma, 2% para o tubular e 4% para apócrinas tipos de câncer . No entanto, as diferenças não afectam significativamente as principais conclusões deste estudo.
o principal objectivo do estudo é compreender a patobiologia do cancro da mama negativo CK7 e do cancro da mama negativo GATA3. Se queremos aplicar os achados neste estudo para facilitar o diagnóstico do câncer de mama metastático, precisamos conhecer a expressão CK7 e GATA3 em pares de primário e metástase. Certamente requer um estudo separado. Uma pequena porção de CK7 e / ou GATA3 casos negativos em nossa série mais tarde desenvolveram metástases tumorais; no entanto, as imunossácias CK7 e GATA3 não foram usadas para formar os diagnósticos destas metástases. Algumas das metástases ocorreram antes do GATA3 immunostain ficar disponível. No entanto, a informação clínica, morfologia microscópica e outros marcadores da glândula mamária foram muitas vezes suficientes para estabelecer os diagnósticos. Num estudo piloto, recolhemos 12 pares de tumores primários e metástases hepáticas e 12 pares de tumores primários e metástases ósseas. Não houve alteração na expressão do GATA3 nas primárias e metástases hepáticas: todas as 10 primárias positivas do GATA3 mantiveram a expressão do GATA3 nas suas metástases hepáticas emparelhadas e a expressão do GATA3 em 2 primárias negativas permaneceu negativa nas metástases hepáticas emparelhadas. Uma parte da expressão GATA3 foi perdida em metástases ósseas.: A expressão GATA3 em 8 primárias positivas só foi mantida em 4 metástases ósseas emparelhadas e a expressão GATA3 em 4 primárias negativas permaneceu negativa nas metástases ósseas emparelhadas. A razão exacta pela qual a expressão GATA3 foi perdida em algumas metástases ósseas não é clara. Pode ser uma verdadeira perda de expressão (como pós-quimioterapia), mas é mais provável que esteja relacionado com o processamento de tecidos, tais como descalcificação ou erro de amostragem devido ao pequeno tamanho da biópsia óssea. O mesmo tipo de erro de amostragem pode acontecer com a biópsia do núcleo ou aspiração de agulha fina (FNA). Estudos adicionais são necessários para explorar o papel do GATA3 e do CK7 no diagnóstico de metástases de tipos de câncer especiais, tais como tumores metaplásicos, mucinosos e apócrinos.
na série atual, identificamos 8 Casos de câncer de mama CK7 e GATA3 double negative. Todos os oito casos foram considerados como câncer de mama primário e diagnósticos patológicos foram feitos sem manchas de CK7 e/ou GATA3. Poderia ter sido um desafio se as imunoestacas CK7 e GATA3 fossem realizadas no momento do diagnóstico. Durante o estudo atual, tivemos revisão retrospectiva para estes casos, incluindo qualquer história de acompanhamento e nenhum tumor primário não-mamário foi identificado. Na nossa prática, o GATA3 immunostain é rotineiramente realizado em quaisquer cancros triplos negativos que não tenham um componente in situ. Em última análise, só a história e o acompanhamento podem confirmar definitivamente a origem da mama em alguns casos.
