Hydrolaasit ovat hydrolyyttisiä entsyymejä, biokemiallisia katalyyttejä, jotka hajottavat kemiallisia sidoksia veden avulla jakaen yleensä suuren molekyylin kahteen pienempään molekyyliin. Esimerkkejä tavallisista hydrolaaseista ovat esteraasit, proteaasit, glykosidaasit, nukleosidaasit ja lipaasit.
Hydrolaasit suorittavat tärkeitä hajoamisreaktioita elimistössä. Ruoansulatuksen aikana lipaasit hydrolysoivat lipidejä ja proteaasit muuttavat proteiinia aminohapoiksi. Hydrolaasit pilkkovat suuria molekyylejä fragmenteiksi, joita käytetään synteesissä, kuona-aineiden erittymisessä tai hiilen lähteinä energian tuotannossa. Näissä reaktioissa monet biopolymeerit muuttuvat monomeereiksi. Jotkut hydrolaasit vapauttavat energiaa toimiessaan.
yksi tärkeimmistä hydrolaaseista on asetyylikoliiniesteraasi eli koliiniesteraasi. Asetyylikoliini on voimakas välittäjäaine vapaaehtoisille lihaksille. Hermoimpulssit kulkevat hermosoluja pitkin synaptiseen halkeamaan , jossa rakkuloihin varastoitunut asetyylikoliini vapautuu kuljettaen impulssin synapsin yli postsynaptiseen hermosoluun ja levittäen hermoimpulssia. Hermoimpulssin siirryttyä eteenpäin välittäjäainemolekyylien toiminta on pysäytettävä koliiniesteraasilla, joka hydrolysoi asetyylikoliinin koliiniksi ja etikkahapoksi. Eräät vaaralliset toksiinit, kuten Clostridium botulinumin eksotoksiini ja saksitoksiini häiritsevät koliiniesteraasia, ja monet hermoaineet kuten tabun ja sariini vaikuttavat estämällä koliiniesteraasin hydrolyyttistä vaikutusta.
