Rothia-lajien eristäminen ja tunnistus suuonteloissa

Rothia dentocariosa ja Rothia mucilaginosa, jotka ovat grampositiivisia bakteereja, kuuluvat ihmisen suuontelon ja nielun normaaliin kasvistoon. Lisäksi venäläisen avaruusaseman Mir: n ensi kertaa ilmanäytteistä eristetyn Rothia aerian ennustetaan olevan suullinen asukas. Immuunipuutteiset potilaat ovat usein näiden organismien tartuttamia, mikä johtaa erilaisiin systeemisiin sairauksiin. Näiden organismien osallistuminen suun infektioihin on herättänyt vain vähän huomiota, eikä niiden jakautumista suuontelossa ole täysin selvitetty, koska näiden organismien tarkka tunnistaminen on vaikeaa. Oraalisille Rothia-lajeille, R. aeria mukaan luettuna, soveltuva selektiivinen kasvualusta on tarpeen, jotta voidaan arvioida näiden organismien todellinen esiintyvyys suuontelossa. Suuontelon bakteeripopulaation tutkimiseksi kehitettiin uusi selektiivinen väliaine (orsm) oraalisten Rothia-lajien eristämiseen tässä tutkimuksessa. ORSM koostuu tryptonista, natriumglukonaatista, Lab-Lemco-jauheesta, natriumfluoridista, neutraalista akriflaviinista, linkomysiinistä, kolistiinista ja agarista. Oraalisten Rothialajien keskimääräinen kasvupalautuma ORSMILLA oli 96,7% verrattuna BHI-Y agarin kasvuprosenttiin. Muiden edustavien suun kautta otettavien bakteerien, kuten streptokokki -, Actinomyces -, Neisseria-ja Corynebacterium-sukujen, kasvu estyi huomattavasti selektiivisellä alustalla. PCR-alukkeet suunniteltiin oraalisten Rothia-lajien 16S rDNA-geenien osittaisten sekvenssien perusteella. Nämä alukkeet reagoivat kuhunkin eliöön eivätkä reagoineet muihin ei-oraalisiin Rothia-lajeihin tai edustaviin suun kautta otettaviin bakteereihin. Tulokset osoittivat, että näistä alukkeista on hyötyä oraalisten Rothialajien tunnistamisessa. Yksinkertainen multiplex PCR-menetelmä, jossa käytettiin näitä alukkeita, oli luotettava menetelmä oraalisten Rothialajien tunnistamiseksi. Oraalisten Rothialajien osuutta 20 koehenkilön sylkinäytteistä tutkittiin orsm-menetelmällä. Rothia dentocariosa, Rothia mucilaginosa ja R. aeria muodostivat 1,3%, 5,9% ja 0.8% kaikista viljeltävistä bakteereista on BHI-Y agarilla kaikkien koehenkilöiden suuonteloissa. Oraalisista Rothialajeista R. mucilaginosa on hallitsevin ihmisen suuontelossa. Uusi selektiivinen medium, ORSM, oli hyödyllinen eristää kunkin oraalinen Rothia lajeja.



+