Progrès des tests génomiques – Ce que vous devez savoir

Progrès des Tests génomiques – Ce que vous devez savoir

par Dr. C.H. Weaver Md mise à jour le 1er/09/2018

Q: Qu’est-ce que les tests génomiques?

R: Les tests génomiques examinent un groupe de gènes et leurs différents niveaux d’expression. Cette expression ou activité génique peut caractériser la façon dont les gènes interagissent les uns avec les autres et prédire le comportement de certains tissus dans le corps. Cela contraste avec les tests génétiques, qui examinent un changement spécifique au sein d’un chromosome ou d’un gène individuel, souvent dans le cadre d’un trait héréditaire.

Q: Quel rôle joue le test génomique dans un diagnostic de cancer?
R: Les tests génomiques peuvent fournir des informations sur le pronostic d’un patient en fonction de l’expression génique dans le tissu cancéreux d’un individu et peuvent souvent prédire si certains traitements (comme la chimiothérapie) seront bénéfiques.

Q: À quel moment du processus de diagnostic les tests génomiques se produisent-ils?
D: Des tests génomiques peuvent avoir lieu à tout moment après l’acquisition d’un échantillon de tissu (biopsie ou résection) du cancer.

Q. Quelles questions dois-je poser à mon équipe soignante au sujet des tests génomiques?
R : Voici les principales questions à poser à votre professionnel de la santé.

• Des tests génomiques sont-ils disponibles pour le type de cancer que j’ai, afin d’aider à déterminer mon pronostic global?
• Les résultats de ce test auront-ils le potentiel de modifier votre prise en charge du cancer? Spécifiquement:
  • Le test pourra-t-il me dire si certains traitements seront bénéfiques dans mon traitement?
• Avez-vous eu des résultats positifs en utilisant ce test avec d’autres patients?
• Ce test est-il couvert par mon régime d’assurance? (Ce type de test peut se chiffrer en milliers de dollars, bien que de nombreux plans couvrent les tests sans frais de votre poche.)

Q : Existe-t-il des types de cancer spécifiques pour lesquels le rôle des tests génomiques est particulièrement important?

A: Il existe trois types de patients cancéreux pour lesquels les tests génomiques peuvent être particulièrement avantageux:

• Les patientes atteintes d’un cancer du sein à récepteur d’œstrogènes positif qui ne s’est pas encore propagé aux ganglions lymphatiques (cancer du sein à un stade précoce) peuvent avoir un pronostic difficile à prédire par biopsie tissulaire seule. Les tests génomiques peuvent non seulement aider à fournir des informations pronostiques (c.-à-d. une survie prédite à 10 ans), mais peuvent également prédire si la chimiothérapie sera d’un avantage significatif, permettant au patient d’éviter la toxicité de la chimiothérapie lorsque cela est possible.
• Les patients atteints de certains types de cancer du côlon peuvent également bénéficier de tests génomiques en termes de détermination du pronostic, de prédiction des avantages de la chimiothérapie et de sélection de la chimiothérapie (déterminer quels agents chimiques seront les plus bénéfiques).
• Les patients atteints d’un cancer qui s’est propagé à d’autres sites du corps (maladie métastatique) ou qui a récidivé localement (malgré une chirurgie et / ou une chimiothérapie) peuvent subir des tests génomiques qui examinent l’expression d’une grande variété de gènes, y compris ceux qui ne sont généralement pas associés au site initial du cancer. Ce type de test génomique permet d’identifier certains gènes pouvant potentiellement être une cible pour un traitement qui n’a pas été initialement envisagé. Un changement à une thérapie ciblée aurait le potentiel d’améliorer considérablement la survie.

Le rôle émergent de la génomique dans le diagnostic et le suivi du cancer

Aperçu

Le cancer est le résultat d’anomalies génétiques qui affectent la fonction de gènes particuliers. Les gènes déterminent la forme, la fonction et les schémas de croissance des cellules. Ceux qui accélèrent ou suppriment la croissance sont souvent impliqués dans le cancer. Par exemple, de nombreux cancers présentent une anomalie dans un gène responsable de la stimulation de la croissance cellulaire et / ou le gène qui prévient normalement le cancer ne fonctionne pas correctement. Ces deux anomalies génétiques peuvent entraîner une croissance cellulaire incontrôlée et excessive, le trait caractéristique du cancer. Les tests génomiques, ou tests comme ils sont appelés par les scientifiques, sont un outil pour identifier les gènes spécifiques d’un cancer qui sont anormaux ou qui ne fonctionnent pas correctement. En substance, cela revient à identifier la signature génétique ou l’empreinte digitale d’un cancer particulier.

Les tests génomiques sont différents des tests génétiques. Les tests génétiques sont généralement utilisés pour déterminer si un individu en bonne santé a un trait héréditaire (gène) qui le prédispose au développement d’un cancer. Les tests génomiques évaluent les gènes dans un échantillon de tissu malade d’un patient qui a déjà reçu un diagnostic de cancer. De cette façon, les gènes qui ont muté, ou qui ont développé des fonctions anormales, sont identifiés en plus de ceux qui ont pu être hérités.

Les tests génomiques peuvent aider les médecins à:

• Déterminer le pronostic d’un patient (résultat potentiel)
• Déterminer si un cancer est agressif / à croissance rapide ou à croissance lente
• Choisir le traitement le plus efficace pour chaque cancer individuel
• Surveiller les patients qui suivent un traitement pour déterminer si le traitement fonctionne
• Surveiller les patients en rémission pour détecter une progression potentielle de la maladie tôt lorsqu’elle est plus efficace traitable

La plus grande promesse des tests génomiques est peut-être son potentiel d’individualisation du traitement. Cela signifie que les patients atteints de maladies plus graves peuvent être identifiés et offrir des thérapies agressives et innovantes qui peuvent prolonger leur vie, tandis que les patients diagnostiqués avec une maladie moins grave peuvent être épargnés par des traitements inutiles. Par exemple, certaines femmes atteintes d’un cancer du sein à nœud négatif rechuteront après avoir été traitées par une intervention chirurgicale seule. Il a été démontré que les tests génomiques permettent de différencier les patientes atteintes d’un cancer du sein à ganglions négatifs qui sont plus susceptibles de rechuter et bénéficient donc d’une chimiothérapie supplémentaire et les patientes qui n’ont peut-être pas besoin de chimiothérapie.

Pour apprécier comment la science de la génétique est appliquée au diagnostic et au suivi du cancer, il est utile de comprendre les principes de base de la génétique. Cela inclut de savoir ce que sont l’ADN, les chromosomes et les gènes, comment ils fonctionnent et comment l’information contenue dans l’ADN est transformée, par l’expression des gènes, en structures spécifiques qui dictent les fonctions d’une cellule.

Avec ces connaissances de base, il est possible de comprendre la promesse de tests de détection d’anomalies génétiques, tels que:

• Hybridation in situ par fluorescence (FISH)
• Réaction en chaîne par polymérase (PCR)
• PCR par transcription inverse
• Technologie des puces
• Protéomique sérique

Contexte — Principes de base de la génétique

L’importance de la génétique dans l’hérédité est bien connue; cependant, le rôle que joue la génétique dans le contrôle de la structure et de la fonction des cellules peut être encore plus critique pour un organisme individuel. L’hérédité assure que les humains et toutes les espèces sont capables de se reproduire et de perpétuer leurs traits uniques et il est nécessaire de diriger la façon dont les cellules sont construites, leur travail et leur croissance pour s’assurer qu’un organisme survivra pour se reproduire. Il est également important de comprendre ce rôle essentiel que jouent l’ADN et les gènes dans la détermination de la durée de vie minute par minute d’une cellule pour comprendre comment la génétique est impliquée dans le cancer.

ADN: L’information génétique d’un organisme entier est contenue dans le noyau de chaque cellule sous forme d’acide désoxyribonucléique, communément appelé ADN. L’ADN est une molécule hélicoïdale à double brin (enroulée). Chaque brin est composé d’un squelette structurel et d’une séquence de composés azotés appelés bases azotées, qui peuvent être considérés comme l’alphabet de la génétique. Il existe quatre bases: l’adénine, la guanine, la thymine et la cytosine. Les deux brins sont reliés aux bases.

Le code génétique, ou l’information génétique qui contrôle la structure et la fonction de la cellule, est contenu dans la séquence des bases. La séquence de base contrôle finalement la séquence d’acides aminés qui sont connectés ensemble pour former une molécule de protéine. Différentes séquences font différentes protéines. Les protéines synthétisées dans une cellule déterminent la structure et la fonction de cette cellule.

Chromosomes : L’ADN est conditionné en un nombre spécifique d’unités appelées chromosomes. Les humains ont 46 chromosomes dans chaque cellule. La plupart du temps, les chromosomes sont serrés autour des protéines dans le noyau de la cellule de sorte qu’ils ne peuvent pas être vus. Cependant, aux stades de la vie de la cellule juste avant la division cellulaire, les chromosomes deviennent visibles au microscope optique. Ils apparaissent comme un « H » majuscule avec quatre longueurs d’ADN enroulé jointes par une protéine comme la « croix » du « H ».Gènes

: L’ADN est organisé en gènes, qui sont de longs segments d’ADN comprenant des régions contenant des codes pour des protéines appelées exons, ainsi que des régions non codantes appelées introns. Les gènes sont définis comme l’unité de base de l’hérédité car ils sont transmis à la progéniture, puis répliqués et transmis aux cellules individuelles au cours de la division cellulaire. La réplication consiste à utiliser les deux brins d’ADN comme modèles pour synthétiser de l’ADN complémentaire (ADNc), qui est un brin correspondant. Le résultat est deux copies identiques d’ADN pour chaque cellule une fois la division cellulaire terminée. Dans des conditions normales, la structure de l’ADN, et donc des gènes, reste relativement constante grâce à la réplication et à la division cellulaire.

Expression des gènes: L’information génétique contenue dans les gènes est traduite en structure et en fonction cellulaires par un processus appelé expression des gènes. Les gènes peuvent être considérés comme des codes, ou des recettes, pour fabriquer des protéines. Les protéines sont le composant de base de la structure et de la fonction cellulaires. Lorsqu’un gène est « exprimé », la ou les protéines pour lesquelles il code sont activement construites dans la cellule et la fonction que ces protéines servent est en cours d’exécution. Par exemple, lorsque le gène HER-2 / neu est exprimé dans le cancer du sein, il y a plus de récepteurs du facteur de croissance épidermique (EGFR) présents, qui sont des protéines à la surface cellulaire pour lesquelles HER-2 / neu code. De plus, la fonction de l’EGFR est de stimuler la croissance cellulaire; ainsi, une cellule qui exprime HER-2 / neu a de nombreux EGFR et se développe activement.

L’expression des gènes se produit par un système complexe qui implique les étapes suivantes:

• Séparation temporaire des deux brins de la molécule d’ADN au niveau d’un gène particulier.
• Transcription du segment d’ADN, qui est la synthèse d’une copie simple brin de la séquence d’ADN exposée ; cette copie est appelée ARN messager (ARNm).
• Synthèse protéique, ou construction de nouvelles protéines dans la cellule, sur la base des informations contenues dans l’ARNm.

Anomalies génétiques: Les anomalies génétiques sont des altérations de l’ADN d’une cellule qui peuvent survenir par hasard ou en raison d’une influence environnementale. Ces altérations confèrent à la cellule affectée un avantage par rapport aux cellules normales qui les aide à se développer. En conséquence, la cellule est capable de se diviser rapidement, devenant une croissance cancéreuse. Cependant, cet avantage de croissance ne profite qu’à la cellule individuelle, et pas nécessairement à l’organisme entier (humain).

Les types d’anomalies génétiques comprennent:

Translocations – les changements de place d’un gène d’un chromosome avec un gène sur un autre chromosome; ce type d’anomalie définit les nombreuses délétions de leucémies

— un gène ou une séquence de nucléotides est manquant dans l’ADN

Polymorphismes — variations de la séquence nucléotidique

Tests de détection d’anomalies génétiques

Une variété de nouveaux tests de laboratoire peuvent détecter des anomalies génétiques. La découverte d’une mutation pathogène dans un gène peut confirmer un diagnostic présumé de cancer ou identifier les personnes prédisposées à certains cancers. Certaines de ces techniques actuellement utilisées en milieu clinique comprennent:

• Hybridation in situ par fluorescence (FISH)
• Réaction en chaîne par polymérase (PCR)
• PCR par transcription inverse

De plus, les techniques de laboratoire suivantes sont utilisées dans la recherche sur le cancer et pourraient être disponibles pour une utilisation clinique à l’avenir:

• Microarray

Hybridation in situ par fluorescence (FISH)

FISH est une technique de laboratoire utilisée pour détecter des anomalies génétiques au niveau unicellulaire et unicellulaire, telles que des anomalies numériques (gains et pertes de nucléotides) et des translocations (changement de place d’un gène ou d’un segment de gènes sur un chromosome avec un gène ou un segment sur un autre chromosome). Ces anomalies jouent un rôle dans le développement et la progression de certains cancers, tels que les leucémies et les lymphomas1.

Comment fonctionne le POISSON? FISH est réalisé sur des cellules échantillons dont l’ADN s’est démêlé afin que les chromosomes individuels soient visibles. Cela se produit pendant les phases cellulaires juste avant la division cellulaire, appelées métaphase ou interphase. L’ADN de l’échantillon est d’abord dénaturé à l’aide de la chaleur et du formamide chimique de sorte que les brins individuels se séparent, exposant la séquence de base. Ensuite, des séquences d’ADN spécifiques, appelées sondes, qui sont attachées à des fluoros colorés sont incubées, ou combinées, avec l’ADN de l’échantillon. Les sondes s’hybrident (se connectent) avec l’ADN des chromosomes qui est le complément de la séquence de base de la sonde. La présence ou l’absence de fluorescence de l’ADN et de la sonde hybridés sont visibles avec un microscope spécialisé et indiquent si la séquence d’ADN d’intérêt est présente dans l’échantillon. De plus, des techniques de POISSON spécialisées peuvent être utilisées pour détecter les translocations, les inversions et les amplifications impliquées dans le cancer.2

FISH dans le cancer du sein et de l’ovaire: Une utilisation courante si FISH est de déterminer si les patientes atteintes d’un cancer du sein et de l’ovaire surexpriment l’oncogène HER2 / neu, un gène couramment impliqué dans le cancer. HER2/neu porte le code génétique du récepteur HER2, une protéine à la surface de certaines cellules cancéreuses. HER2 se lie aux facteurs de croissance dans le sang, stimulant ainsi la croissance des cellules cancéreuses.

HER2/neu est amplifié dans environ 20% à 30% des cancers du sein et de l’ovaire et cette amplification et/ ou surexpression indique un mauvais pronostic.3 FISH peut être utilisé pour observer si l’oncogène HER2 / neu envoie plusieurs signaux au niveau des cellules individuelles, ce qui indique une amplification génique.

POISSONS dans les cancers hématologiques (du sang): Le POISSON peut également être utilisé pour diagnostiquer et gérer diverses tumeurs malignes hématologiques. L’anomalie génétique qui sous-tend de nombreuses tumeurs malignes hématologiques est la translocation chromosomique, ou le changement de place d’un gène d’un chromosome avec un gène sur un autre chromosome.

Réaction en chaîne par polymérase (PCR)

La PCR est une méthode de laboratoire in vitro qui est utile pour le dépistage génétique de la maladie et la détection d’une maladie résiduelle minimale, qui est une petite quantité de maladie laissée après le traitement pouvant entraîner une récidive et qui n’est généralement pas détectable avec d’autres techniques. Cette procédure amplifie un segment d’ADN à partir d’un petit échantillon, ce qui le rend détectable. Avec la PCR, des séquences relativement petites d’ADN connu peuvent être répliquées en millions de copies sur une courte période de temps.

Comment fonctionne la PCR? Cette méthode nécessite quatre composants principaux: 1) l’ADN de l’échantillon, 2) un approvisionnement suffisant en nucléotides, 3) une enzyme polymérase thermostable responsable de la copie de l’ADN, et 4) des amorces, une courte séquence de nucléotides qui se trouvent de part et d’autre du fragment d’ADN d’intérêt et signalent à la polymérase de commencer la réplication du segment d’ADN spécifique.

La PCR est un processus en trois étapes, chacune se produisant à une température différente. L’ADN de l’échantillon est d’abord chauffé à environ 90ºC afin de séparer les 2 brins d’ADN appariés. Une fois séparé, il est refroidi à une température qui permet aux amorces de s’hybrider à leur séquence complémentaire sur l’ADN cible, soit environ 40ºC. Enfin, la réplication de l’ADN se produit à environ 70ºC, la température à laquelle l’ADN polymérase est la plus active. Ce processus est répété 20 à 30 fois, ce qui entraîne une amplification d’environ 1 million de fois du fragment d’ADN d’intérêt.4

Transcription inverse PCR

Transcription inverse (RT) – La PCR est une technique qui détecte le degré d’expression des gènes. Des processus compliqués contrôlent quel segment d’ADN se sépare, est transcrit (copié) en ARNm, puis exprimé sous forme de protéines dans la cellule. Tous les gènes ne sont pas transcrits puis exprimés de manière égale. En raison de nombreux contrôles dans la cellule, certains gènes sont sur-exprimés, ce qui signifie qu’ils sont transcrits et exprimés à un taux plus élevé que la normale, tandis que d’autres gènes sont maintenant exprimés ou « désactivés » de sorte que certaines fonctions ne se manifestent pas dans la cellule.

Comment fonctionne la RT-PCR? La RT-PCR utilise les mêmes étapes que la PCR pour amplifier un segment d’ADN, mais l’échantillon est une copie complémentaire de l’ARNm. En commençant par l’ARNm, ce test mesure uniquement l’ADN qui est exprimé, ce qui permet de déterminer le degré d’expression de certains gènes. Les utilisations récentes de la RT-PCR en oncologie clinique comprennent la détection des micrométastases ganglionnaires dans le cancer de la prostate et des métastases osseuses dans le cancer du sein.5

RT-PCR dans le cancer du sein: Le test du cancer du sein Oncotype DX™ utilise la RT-PCR pour déterminer le risque individuel de récidive chez les femmes atteintes d’un cancer du sein à récepteur d’œstrogène (ER) négatif. Ce test évalue l’expression de 21 gènes dans le cancer du sein. La surexpression de certains de ces gènes indique un pronostic plus mauvais, tandis que l’expression d’autres peut indiquer un meilleur pronostic. L’expression des 21 gènes est utilisée pour calculer un « Score de récidive ™ », ou la probabilité que ce cancer se reproduise. Un vaste essai clinique a montré que le Recurrence Score ™ était plus efficace pour prédire le pronostic des femmes atteintes d’un cancer du sein à ganglion négatif et ER positif que les mesures standard telles que l’âge du patient, la taille du cancer et le stade du cancer.6

Stratégies pour améliorer la détection des anomalies génétiques

Plusieurs méthodes de détection des anomalies génétiques sont utilisées pour la recherche sur le cancer. Bien qu’ils ne soient pas encore couramment utilisés en milieu clinique, les éléments suivants semblent prometteurs et pourraient être utilisés à l’avenir pour diagnostiquer, tester et surveiller le cancer.

Microarrays: L’analyse de microarrays est une technique qui combine la biologie avec l’informatique pour générer un profil génétique pour un échantillon de tissu donné qui reflète l’activité de milliers de gènes. Cette technologie présente des avantages par rapport au POISSON ou à la PCR car, en une seule analyse, elle peut évaluer l’expression de tous les gènes pouvant être impliqués dans un cancer, plutôt que de quelques-uns seulement. En montrant graphiquement comment tous les gènes sont impliqués dans un cancer, les puces peuvent générer une « signature génétique » pour un cancer particulier. Cela rend l’identification du sous-type de cancer plus précise. La capacité de prendre un instantané de la signature génétique d’un cancer peut permettre de mieux comprendre comment ce cancer se développe et comment concevoir un traitement individualisé.

Comment fonctionnent les microarrays ? Bien que différentes méthodes de microréseau soient utilisées, chacune comprend cinq étapes de base:

• Préparation de l’échantillon
• Combinaison de l’échantillon avec la puce informatique
• Balayage de la puce informatique
• Normalisation
• Analyse informatique des résultats.

Préparation de l’échantillon: Dans l’étape initiale, l’ADNc est synthétisé à partir d’ARN par transcription inverse (rappelez-vous que la transcription implique la copie de l’ADN pour fabriquer de l’ARN, de sorte que la transcription inverse génère de l’ADN à partir d’ARN) à partir d’ARN qui a été extrait à la fois d’un échantillon de test et d’un échantillon de référence. Les segments d’ADN de l’échantillon sont marqués avec des fluorochromes, ou des produits chimiques radioactifs, de sorte qu’ils peuvent être détectés après leur combinaison avec la puce informatique.

Combinaison de l’échantillon avec la puce d’ordinateur: Ensuite, l’échantillon est combiné avec la puce d’ordinateur, qui est une grille rectangulaire de taches. Chaque tache possède de nombreuses copies d’une séquence d’ADN particulière. Ces séquences sont dérivées de bases de données publiques de séquences d’ADN générées par le Projet du génome humain, l’entreprise scientifique qui a identifié pratiquement toutes les séquences d’ADN de l’espèce humaine.

Lorsque l’échantillon est ajouté à la puce informatique, un processus appelé hybridation se produit. Cela signifie que le segment d’ADN de l’échantillon se lie (s’hybride) au segment de la puce informatique qui possède la séquence complémentaire exacte de nucléotides (les quatre composés qui sont l’alphabet de la génétique).

Numérisation de la puce d’ordinateur: Une fois l’hybridation terminée, des scanners sont utilisés pour détecter la fluorescence et créer une image numérique qui reflète l’emplacement de l’ADN de l’échantillon combiné avec des taches sur la puce à puce.

Normalisation: Étant donné que les intensités des signaux bruts peuvent varier entre les puces individuelles de nombreux patients ou expériences, l’intensité des puces individuelles doit être ajustée à une norme commune ou normalisée. Par exemple, la soustraction du bruit de fond est une méthode de normalisation courante appliquée à tous les échantillons. La normalisation permet de comparer les profils d’expression génique de nombreux patients ou expériences.

Analyse par ordinateur: La dernière étape d’une expérience de microréseau est l’analyse par ordinateur. Les milliers de points de données brutes qui résultent des analyses de microréseaux sont essentiellement inintelligibles à moins qu’ils ne soient évalués dans le contexte d’autres résultats. Par exemple, le profil d’expression génique (résultats de microréseaux) des tissus normaux et malades peut être comparé pour identifier les gènes dont l’expression varie et également identifier un modèle (profil) pouvant indiquer une classe ou un stade de maladie distinct.7

Microarrays en oncologie: L’analyse de microréseaux a contribué à l’oncologie en améliorant la compréhension de la base génétique de plusieurs types de cancer, y compris le lymphome non Hodgkinien à cellules B (BCNHL), la leucémie aiguë et le cancer du sein.

• Des connaissances considérables sur la pathologie de la BCNHL ont été acquises en comparant les modèles d’expression génique des tissus malades et normaux. Deux catégories de maladies différentes présentent des profils d’expression génique distincts. Les microréseaux ont aidé à établir ces profils d’expression et, à l’avenir, ils pourraient aider à classer avec précision les nouveaux cas de BCNHL.
• Dans le cas de la leucémie aiguë, les puces ont aidé à établir des modèles d’expression génique distincts qui ont aidé à différencier la leucémie lymphoïde aiguë (LAL) et la leucémie myéloïde aiguë (LMA). En utilisant ces profils, 29 des 34 nouveaux cas de leucémie ont été correctement prédits.
• De plus, les puces ont aidé à identifier deux profils d’expression génique distincts dans le cancer du sein, BCRA1 et BCRA2. Cette découverte suggère différentes façons de développer le cancer du sein et fournit des indices qui favorisent une meilleure compréhension de la cause du cancer du sein.7

1 Spagnolo SD, Ellis DW, Juneja S, Leong AS et al. Le rôle des études moléculaires dans le diagnostic du lymphome: une revue. Pathologie 2004; 36 (1) 19-44.

2 Spurbeck JL, Adams SA, Stupca PJ, Dewald GW. Primer sur la Génomique médicale, Partie XI: Visualiser les chromosomes humains. Mayo Clinic Proceedings 2004: 79:58-75.

3 Paik S, Hazan R, Fisher ER, et al. Résultats pathologiques du projet national sur les adjuvants chirurgicaux du sein et de l’intestin: signification pronostique de la surexpression de la protéine erb B-2 dans le cancer du sein primaire. J Clin Oncol 1990; 8:103-112.

4 Tefferi A, Wieben ED, Dewald GW, et al. Primer on Medical Genomics Part II: Principes et méthodes de base en génétique moléculaire. Mayo Clinic Proceedings 2002; 77: 785-808.

5 Tefferi A, Wieben ED, Dewald GW, et al. Primer on Medical Genomics Part II: Principes et méthodes de base en génétique moléculaire. Mayo Clinic Proceedings 2002; 77: 785-808.

6 Paik S, Shak S, Tang G, et al. Test PT-PCR multi-gènes pour prédire la récurrence chez les patientes atteintes d’un cancer du sein à nœud négatif — Études NSABP B-20 et B-14. Proc du 26e Symposium annuel sur le cancer du sein de San Antonio. Du 3 au 8 décembre 2003; San Antonio, TX, Résumé #16.

7 Tefferi A, Bolander ME, Ansell SM, et al. Primer on Medical Genomics Part III: Expériences de microréseaux et Analyse de données. Mayo Clinic Procedings2002; 77: 927-940.