Dato che non ci sono sistematici filipek studi di CK7 e GATA3 negativo i tumori al seno e limitato gli studi che caratterizzano il prognostico utilità di GATA3 espressione nel cancro al seno, l’attuale studio ha fornito dettagliate informazioni che manca in letteratura.
La colorazione CK7 non viene utilizzata di routine nella diagnosi primaria del cancro al seno, tranne in rari casi in cui prove cliniche e patologiche inducono la necessità di escludere una fonte secondaria di cancro. CK7 tumori al seno negativi possono essere diagnosticamente impegnativo in tumori metastatici e tumori di origine sconosciuta. Una caratterizzazione completa del cancro al seno negativo CK7 può essere scientificamente e diagnosticamente utile.
Nell’attuale studio, abbiamo scoperto che fino al 13% dei tumori al seno di grado 3 e al 30% dei tumori metaplastici erano CK7 negativi. L’espressione di CK7 non è stata significativamente associata all’età, allo stadio, allo stato del recettore e al sottotipo molecolare. Tra gli 11 tipi istologici inclusi nello studio, la perdita di espressione di CK7 è stata osservata solo nei tumori duttali o metaplastici.
Sulla base di tumori al seno di grado 3, l’analisi di sopravvivenza ha mostrato che l’espressione di CK7 non ha avuto alcun impatto sui risultati complessivi (Fig. 2). Dato che i tumori di grado 1 e 2 hanno maggiori probabilità di mantenere l’espressione di CK7 e associati a prognosi migliori, l’analisi di sopravvivenza dei tumori al seno di distribuzione di grado prevista (circa il 34% del grado 3 invece del 55% in questa serie, vedi sotto) mostrerà probabilmente un’associazione significativa di perdita di espressione di CK7 con Infatti, se i tumori di grado 1 e grado 2 sono stati inclusi nella serie attuale, è stata osservata un’associazione significativa tra la sopravvivenza globale peggiore e i pazienti con perdita di espressione CK7 (P = 0.0084) (File aggiuntivo 1: Figura S1A). La perdita di CK7 nel tumore potrebbe indicare l’inizio di una diversa via di differenziazione, la presenza di transizione da epiteliale a mesenchimale, dedifferenziazione o “staminali”tumorali migliorate. Ulteriori studi dovrebbero essere effettuati per ulteriori indagini.
Al contrario dei tumori CK7 negativi, il cancro al seno negativo GATA3 ha guadagnato più attenzione sia dai patologi diagnostici che dai biologi del cancro. La percentuale di cancri al seno negativi GATA3 varia da studio a studio, variando da 0 a 46% nei tumori positivi di ER e da 17 a 97% nei cancri negativi dell’estrogeno . Nell’attuale studio, i tassi negativi erano dell ‘ 1,7% nei tumori ER positivi e del 48,6% nei tumori ER negativi. Tra gli studi pubblicati in cui sono stati utilizzati lo stesso anticorpo e lo stesso cut-off di positività come in questo studio, i tassi negativi di GATA3 variavano dal 17 al 56%, in linea con il nostro risultato del 17,1%. I tassi negativi di GATA3 riportati nei tumori metaplastici variavano dal 44 all ‘ 82%, il che era coerente con il 70% (7 su 10) nello studio corrente. Inoltre abbiamo scoperto che nessuno dei tumori lobulari e quelli con caratteristiche lobulari e duttali miste era negativo a GATA3, che era compatibile con la maggior parte degli studi pubblicati .
GATA3 è richiesto per i processi cellulari dipendenti da ER e GATA3 ed ER partecipano a cicli di feedback positivi, ciascuno stimolando l’espressione dell’altro . L’espressione forzata di GATA3 nel modello mammario del cancro del topo ha mostrato un effetto protettivo con prognosi migliorata . Le mutazioni di GATA3 nel cancro al seno sono relativamente comuni. Sulla base di analisi eseguite attraverso cBioPortal sul più grande set di dati sul cancro al seno pubblicamente disponibile, Molecular Taxonomy of Breast Cancer International Consortium (METABRIC) , l ‘ 11,5% (250/2173) dei tumori al seno ospitava mutazioni somatiche di GATA3. Delle 250 mutazioni, 193 (77,2%) erano troncanti, 52 (20,8%) erano missense e 5 (2%) erano mutazioni inframe. Le mutazioni di GATA3 sono state osservate più frequentemente in tumori misti invasivi e mucinosi (P = 0,0124) e con maggiori probabilità di essere positivi ai recettori degli estrogeni (P < 0,0001), Her2 negativi (P = 0,0002), con gradi inferiori (P < 0.0001), e con stadi pT inferiori (Grado 1 e 2) (P = 0,0254) (File aggiuntivo 1: Tabella S1). I tumori mutati GATA3 sono stati associati a migliori risultati per i pazienti (P = 0,0018) (File addizionale1: Figura S2). Le proteine mutanti GATA3 interferiscono principalmente con il legame del DNA, ma i domini di transattivazione sono in gran parte intatti . L’anticorpo GATA3 che abbiamo usato (clone L50–823) è stato sollevato contro il segmento peptidico tra i domini di transattivazione e di legame al DNA e presumibilmente cattura entrambe le versioni di proteine wild-type e mutanti. Nell’attuale studio, GATA3 era positivo nella metà dei tumori ER negativi, costituito dal 28% di tutti i tumori di grado 3 (Tabella 3). Ulteriori indagini dovrebbero essere focalizzate sui meccanismi in cui GATA3 mantiene la sua espressione senza attivare ER.
I dati pubblicati riguardanti GATA3 come marcatore prognostico sono in conflitto. La perdita dell’espressione di GATA3 è stata associata a un esito clinico sfavorevole e a una sopravvivenza peggiore . Tuttavia, in altri studi non è stata osservata alcuna associazione con l ‘ outcome . In uno studio, l’espressione di GATA3 è stata trovata per essere associata ad esito favorevole in tutti i tumori al seno nello studio, mentre l’associazione è stata persa quando sono stati analizzati solo tumori positivi ER . L’espressione GATA3 è strettamente associata all’espressione ER e PR e la perdita dell’espressione GATA3 è postulata come simile alla perdita dell’espressione ER prognosticamente. Tuttavia, il nostro studio non ha visto risultati simili nei tumori al seno di grado 3 196. Molteplici fattori potrebbero contribuire. In primo luogo, il numero del caso non era abbastanza grande da sopportare una potenza statistica sufficiente. In secondo luogo, ER e GATA3 sono strettamente correlati nella via ormonale, ma potrebbero ancora avere funzioni distinte per quanto riguarda la progressione del tumore. In terzo luogo, nella pratica attuale, la stragrande maggioranza dei tumori positivi ER sono stati trattati ormonalmente. Il trattamento può influire sulla prognosi. Quattro, il nostro studio di sopravvivenza includeva solo tumori di grado 3 e l’aggiunta di più tumori di grado 1 e grado 2 probabilmente includerà più tumori positivi GATA3 con prognosi migliore e quindi con una significativa differenza prognostica. Infatti, l’analisi ripetuta aggiungendo tumori di grado 1 e grado 2 nella serie attuale ha mostrato una significativa sopravvivenza peggiore dei pazienti affetti da cancro negativo GATA3 (P = 0.0063) (File aggiuntivo 1: Figura S1B).
Il nostro studio è limitato da un’alta percentuale di cancro al seno di grado 3 (55%) mentre è stato stimato che solo un terzo del cancro al seno è di grado 3 . Una quantità significativa di lavoro aggiuntivo sarebbe coinvolto se tutti i tumori concomitanti di grado 1 e grado 2 sono stati inclusi nello studio. I risultati che potrebbero essere influenzati da casi sproporzionati di grado 1 e grado 2 includono analisi di sopravvivenza e studi di associazione quando i marcatori non sono stati distribuiti uniformemente tra i gradi, come lo stato ER, PR, Her2 e pTNM. Pertanto, queste analisi sono state eseguite solo nei tumori di grado 3, ad eccezione degli studi di associazione che hanno coinvolto direttamente il grado.
Un’altra possibile limitazione riguarda le proporzioni di ciascun tipo speciale di cancro in questo studio. Il nostro studio ha incluso 10 metaplastici (0,28% di tutti i tumori), 6 cribriformi (1,6%), 4 micropapillari (1,1%), 5 mucinosi (1,4%), 3 tubolari (0.8%) e 1 cancro apocrino (0,3%). I tumori cribriformi e tubulari erano leggermente sovrarappresentati e i tumori mucinosi e apocrini erano leggermente sottorappresentati, confrontando con percentuali note per ogni tipo speciale: 0,2–5% per metaplastico, 0,3–0,8% per cribriforme, 0,9-2% per micropapillare, 2% per mucinoso, 2% per tubolare e 4% per tumori apocrini . Tuttavia, le differenze non influenzano in modo significativo le principali conclusioni di questo studio.
Lo scopo principale dello studio è comprendere la patobiologia del cancro al seno negativo CK7 e GATA3 negativo. Se vogliamo applicare i risultati di questo studio per facilitare la diagnosi di cancro al seno metastatico, dobbiamo conoscere l’espressione CK7 e GATA3 in coppie abbinate di primaria e metastasi. Richiede certamente uno studio separato. Una piccola porzione di casi negativi di CK7 e / o GATA3 nella nostra serie ha successivamente sviluppato metastasi tumorali; tuttavia, le immunostain CK7 e GATA3 non sono state utilizzate per formare le diagnosi di queste metastasi. Alcune delle metastasi si sono verificate prima che GATA3 immunostain diventasse disponibile. Tuttavia, le informazioni cliniche, la morfologia microscopica e altri marcatori della ghiandola mammaria erano spesso sufficienti per stabilire le diagnosi. In uno studio pilota, abbiamo raccolto 12 coppie di tumore primario e metastasi epatiche e 12 coppie di tumore primario e metastasi ossee. Non vi è stata alcuna variazione di espressione di GATA3 nei primari e nelle metastasi epatiche: tutti i 10 primari positivi di GATA3 hanno mantenuto l’espressione di GATA3 nelle metastasi epatiche accoppiate e l’espressione di GATA3 in 2 primari negativi è rimasta negativa nelle metastasi epatiche accoppiate. Parte dell’espressione GATA3 è stata persa nelle metastasi ossee: L’espressione di GATA3 in 8 primari positivi è stata mantenuta solo in 4 metastasi ossee accoppiate e l’espressione di GATA3 in 4 primari negativi è rimasta negativa nelle metastasi ossee accoppiate. Il motivo esatto per cui l’espressione di GATA3 è stata persa in alcune metastasi ossee non è chiaro. Potrebbe essere una vera perdita di espressione (come la post-chemioterapia), ma è più probabile che sia correlata all’elaborazione dei tessuti come la decalcificazione o l’errore di campionamento a causa delle piccole dimensioni della biopsia ossea. Lo stesso tipo di errore di campionamento potrebbe accadere alla biopsia del nucleo o all’aspirazione con ago sottile (FNA). Sono necessari ulteriori studi per esplorare il ruolo di GATA3 e CK7 nella diagnosi di metastasi di tipi di cancro speciali, come tumori metaplastici, mucinosi e apocrini.
Nella serie attuale, abbiamo identificato 8 casi di cancro al seno doppio negativo CK7 e GATA3. Tutti gli otto casi sono stati considerati come cancro al seno primario e le diagnosi patologiche sono state fatte senza macchie CK7 e / o GATA3. Avrebbe potuto essere difficile se le immunostain CK7 e GATA3 fossero state eseguite al momento della diagnosi. Durante l’attuale studio, abbiamo avuto una revisione retrospettiva di questi casi, inclusa qualsiasi storia di follow-up e nessun tumore primario non mammario è stato identificato. Nella nostra pratica, l’immunostain GATA3 viene eseguito di routine su qualsiasi tumore triplo negativo che non abbia una componente in situ. In definitiva, solo la storia e il follow-up possono confermare definitivamente l’origine del seno in alcuni casi.
