Metodi di isolamento e identificazione delle specie di Rothia nelle cavità orali

Rothia dentocariosa e Rothia mucilaginosa che sono batteri Gram-positivi fanno parte della normale flora nella cavità orale umana e nella faringe. Inoltre, Rothia aeria, che è stato isolato per la prima volta da campioni d’aria nella stazione spaziale russa Mir, si prevede che sia un abitante orale. I pazienti immunocompromessi sono spesso infettati da questi organismi, portando a varie malattie sistemiche. Il coinvolgimento di questi organismi nelle infezioni orali ha attirato poca attenzione e la loro distribuzione nella cavità orale non è stata completamente chiarita a causa delle difficoltà nell’identificare con precisione questi organismi. Un mezzo selettivo adatto per le specie Rothia orali, tra cui R. aeria, è necessario per valutare la vera prevalenza di questi organismi nella cavità orale. Per esaminare la popolazione batterica nella cavità orale, è stato sviluppato un nuovo mezzo selettivo (ORSM) per isolare le specie Rothia orali in questo studio. ORSM è costituito da triptone, gluconato di sodio, polvere di Lab-Lemco, fluoruro di sodio, acriflavina neutra, lincomicina, colistina e agar. Il recupero medio della crescita delle specie Rothia orali su ORSM è stato del 96,7% rispetto a quello dell’agar BHI-Y. La crescita di altri batteri orali rappresentativi, cioè generi Streptococcus, Actinomyces, Neisseria e Corynebacterium, è stata notevolmente inibita sul mezzo selettivo. I primer per PCR sono stati progettati sulla base di sequenze parziali dei geni rDNA 16S delle specie Rothia orali. Questi primer hanno reagito a ciascun organismo e non hanno reagito ad altre specie Rothia non orali o batteri orali rappresentativi. Questi risultati hanno indicato che questi primer sono utili per identificare le specie Rothia orali. Una semplice procedura di PCR multiplex utilizzando questi primer era un metodo affidabile per identificare le specie Rothia orali. La percentuale di specie Rothia orale nei campioni di saliva raccolti da 20 soggetti è stata esaminata con il metodo di coltura utilizzando ORSM. Rothia dentocariosa, Rothia mucilaginosa e R. aeria rappresentavano l ‘ 1,3%, il 5,9% e lo 0.8% del numero totale di batteri coltivabili su agar BHI-Y nelle cavità orali di tutti i soggetti, rispettivamente. È stato indicato che tra le specie Rothia orali, R. mucilaginosa è più predominante nella cavità orale degli esseri umani. Un nuovo mezzo selettivo, ORSM, è stato utile per isolare ogni specie Rothia orale.



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