엔-터미널 시퀀싱,종종 에드만 시퀀싱 또는 에드만 분해 단백질 연구에서 중요 한 기술 이며 새로운 단백질 시퀀스 데이터를 얻을 수 있는 독특한 접근 방식으로 남아 있다. 또한 빠른 단백질 표정 확인을 위한 선호한 기술입니다.
이 접근법의 화학은 1950 년 스웨덴 룬드 대학의 에드먼에 의해 처음 도입되었으며,호주 멜버른에서 그의 연구 기간 동안 최초의 자동 펩타이드 시퀀싱 장치로 여겨지는 것으로 발전했다.
에드먼의 화학
그림 1. 에드 만 분해 화학 엔-말단 단백질 시퀀싱.
가수분해된 엔-말단 표지 아미노산을 산출하는 화학반응이 도 1 에 도시되어 있다. 각 사이클은 본질적으로 3 단계를 포함합니다:
- 페닐 이소 티오 시아 네이트(피츠,에드만 시약)를 염기성 조건 하에서 폴리펩티드 사슬의 알파-아민에 결합시켜 페닐 티오 카르 바밀을 형성한다.
- 온화한 산성 조건 하에서 절단은 폴리펩티드 및 아닐리노티아졸리논(아티)첨가된 아미노산에 유리 아미노 말단을 생성한다.
- 후자는 추출되어 더 안정한 페닐 티오 히단 토인(페닐 티오 히단 토인)유도체로 전환된다.
생성된파티에스티 잔여물을 표준파티에스티 아미노산과 비교하여 에이치에스티 및 보유시간에 의해 분석한다.
부작용 및 부산물
시퀀싱 사이클 화학 및 업 잘 제어되고 완벽하게 정의 된 종을 산출,분석 중에 검출되는 몇 가지 부산물이있다.
도 2 에 도시된 바와 같이,이들은 주로 사이클 동안 피츠페닐티오우레아,엔-페닐티오우레아,오-메틸-티오카보네이트,및 디페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아,및 비페닐유레아.
