요인 무작위,이중 맹검,위약 대조 시험을위한 연구 프로토콜

이 연구는 두 단계로 구성됩니다.위약 대조 시험(그림. 1). 개입 기간은 12 개월입니다.

연구 설계의 개략도. 설문지:사회 데모그래피,병력,식사/식사 시간 행동 및 음식 일기. 2 질문:사회 의사 소통 기능,감각 문제 및 비정상적인 행동(주요 결과); 위장 현상(이차 결과),태양 노출 및 피부 색깔. 인체 측정:무게와 높이. 3 혈액 바이오 마커:25(오)디,적혈구 지방산,칼슘 및 알부민. 설문지:사회 의사 소통 기능,감각 문제,비정상적인 행동(주요 결과)및 식사/식사 시간 행동 및식이 품질. 인체 측정:무게와 높이. 4 혈액 바이오 마커:25(오)디,칼슘과 알부민. *위장 증상(2 차 결과)및 약물/보충제 사용/부작용 발생률/보충제 순응도는 연구 기간 내내 모니터링됩니다.

1 단계는 영양 상태(생화학 지표 및식이 섭취량),인구 통계 및 병력과 관련하여 연구 인구에 대한 포괄적 인 설명 기회를 제공합니다. 2 단계는 비타민 보충제의 효능을 입증 할 것입니다.

참가자

이 연구는 메시 대학교와 뉴질랜드 와이테마타 지구 보건위원회 간의 협력입니다. 연구에 대 한 기준을 충족 하는 어린이 보호자에 의해 첫 번째 인스턴스에서 접근 될 것 이다.

우리는 42 참가자(최소 34 참가자 및 20%잠재적인 탈락 률에 대 한 허용)80%전력 및 5%통계적 유의성에서 임상적으로 중요 한 차이 입증 하기 위해 재판의 각 팔에 필요한 것 이라고 계산. 2015 파일럿 연구,미공개)에서 각각 치료 되지 않은 어린이에서 105 와 24.7 단위의 평균 연령대와 표준 편차에 대 한 사회적 응답성 규모 총 점수에 기준선에서 끝점에 변화에 위약을 보충 하는 그룹 사이의 17 단위 차이 기반으로 전원 계산 했다. 샘플 크기는 아래 수식을 사용하여 계산되었습니다:

여기서 엔 그룹 당 필요한 표본 크기이며,0 은 0 입니다.9 는 80%의 전력 및 5%의 유의성을 나타냄),(2−3)는 그룹 간의 총 점수의 차이입니다.

연구가 적절하게 강화되도록하기 위해>에서 맹검 중간 분석 처음 계획된 등록의 50%는 잠재적 인 표본 크기 증가에 대한 분산을 추정하기 위해 독립적 인 제 3 자에 의해 수행됩니다.

포함 및 제외 기준

2 세 사이의 어린이는이 연구를받을 자격이 있습니다.5 세 및 8 세,정신 장애 진단 및 통계 매뉴얼에 나열된 기준에 따라 발달 소아과 의사가 확인한 의학적 진단을 받았습니다. 2.5 년의 하한은 심리 평가 도구의 연령 기준에 따라 선택되었으며,8 년의 상한은 사춘기 단계와 관련된 행동 변화의 혼란 효과를 피하기 위해 선택되었습니다. 간병인의 영어 실력은 요구 사항입니다(결과 평가 도구의 특성상). 지원자는 출생 이후 발달 지연으로 진단 된 경우 제외됩니다.임상 시험에 대한 추가 포함 기준은 다음과 같습니다:정상 범위 내의 간 기능(알부민 34-48 그램/엘)및 혈청 25(오)디<75+10 노몰/엘 겨울에 재판에 들어가면,여름에 재판에 들어가면<105 노몰/엘+10 노몰/엘. 잠재적 분석 변동성 때문에 10-엔몰/엘 변이가 선택되었습니다. 우리는 제외에 대 한 두 개의 서로 다른 컷-오프 포인트를 적용 했습니다 때문에 혈청에 큰 계절 변화 25(오)디 농도 뉴질랜드에서 30 노몰/엘 44 노몰/엘.

설정

이 연구는 뉴질랜드 오클랜드에서 개최됩니다. 비 금식 혈액 샘플은 뉴질랜드 오클랜드의 노스 쇼어 또는 와이타 케레 병원에서 수집됩니다. 설문지 및 인체 측정법은 뉴질랜드 오클랜드 메시 대학교에서 시행됩니다. 오클랜드는 1 백만 이상의 인구를 가진 뉴질랜드에서 가장 큰 도시입니다. 약 13,000 명(32.5%)의 개인이 오클랜드 광역 지역에 거주하는 것으로 추정됩니다.

1 단계-심사

심사 및 모집(연구 1 단계)은 2015 년 1 월에 시작된 24 개월 동안 진행됩니다. 초기 포함 기준을 충족하는 어린이는 혈액을 채취하고 영양 결핍에 대한 검사를 받게됩니다. 결과 측정,시험 방법 및 등록,개입 및 평가의 일정은 각각 표 1 및 2 를 참조하십시오.

무작위 배정 및 임상 시험에 포함하기 전에,비타민 디,철분 및 비타민 비 12 결핍이 해결 될 것입니다. 이 시험에서 적용된 영양 결핍 및 관리 전략 목록은 표 3 을 참조하십시오.

2 단계–4 개의 경구 캡슐 형태로 하루 2000 비타민 디 3,하루 722 밀리그램,하루 2000 비타민 디 3 플러스 722 밀리그램 또는 위약으로 구성됩니다. 처리 물자는 더글러스 영양 주식 회사에 의해 제조되고 공급된 티어오프 분사구를 가진 750 마그네슘 젤 캡슐에서 배달될 것입니다.,오클랜드,뉴질랜드. 연구 캡슐,비타민 디,엔-3 엘푸파스 및 위약은 외관이 동일하며 모두 맛이없고 무색입니다. 아이는 주사통에 의하여 특혜의 그들의 음식으로 또는 경구 투여에 의해 섞인 일 당 4 개의 캡슐의 내용을 소모할 것을 요구됩니다. 각 캡슐의 총 일일 섭취량 및 내용은 표 4 를 참조하십시오. 연구 기간 동안,어린이 자폐증에 대 한 어떤 치료 또는 약물 뿐만 아니라 어떤 보충 포함 하지 않는 것이 허용 됩니다.

2000 아이유 비타민 디 3 를 보충하는 것은 유아에게 안전한 복용량으로 보여졌으며,프랑스 소아과 학회는 모유 수유중인 유아에게 하루에 1000-1200 아이유를 권장합니다. 우리의 예심에 있는 2.5–8 세의 몸 질량은 불리한 사건의 위험을 더 감소시켜야 하는 유아 보다는 상당히 더 중대할 것입니다. 또한,하루 2000 아이 유 1-3 및 4-8 년 연령 그룹에 대 한 아이 유에 의해 제안 된 2500 및 3000 아이 유/일의 안전 상한 보다 작습니다.1 일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 722 밀리그램/일 부작용의 복용량을 가진 어린이에서 보고 되었습니다.

무작위 화,눈부신 및 은폐 할당

어린이는 연령 및 중증도에 대해 계층화 된 네 그룹 중 하나에 무작위로 할당됩니다. 활성/위약 캡슐의 무작위 화,무작위 화 된 서열 목록 및 그룹 할당은 연구자,어린이 및 간병인으로부터 완전히 숨겨집니다 데이터 분석을 포함한 전체 연구. 연구의 어떤 측면에도 관여하지 않는 제 3 자는 4 와 8 의 블록을 사용하여 임의의 블록 디자인을 생성합니다.Randomization.com (http://www.randomization.com/). 제 3 자는 개입에 대한 자격이 확인되고 간병인의 동의가 접수되면 아동에게 치료 코드를 할당합니다. 연구 맹인을 깨는 것이 필요한 긴급 상황에서,교장 조사관이 주어진 참가자에 대한 치료 할당을 밝히기 위해 무작위 화를 담당하는 제 3 자에게 연락 할 계획이 수립 될 것입니다.

데이터 수집

참가자(간병인 및 어린이)는 매시 대학의 인간 영양 연구 단위에 두 차례 참석할 것입니다:기준선과 12 개월. 2 단계에 모집 된 후 4 개월 동안 보조 식품을 공급 받기 전에 간병인은 연구의 주요 결과 측정으로 핵심 증상(사회 의사 소통 기능 및 감각 문제)및 비정상적인 행동에 대한 설문지를 작성합니다. 개입이 완료되면(12 개월),간병인이 완료 한 장애 및 비정상적인 행동의 핵심 증상에 대한 기본 평가가 반복됩니다. 간병인은 또한 연구 기간 동안 매주 위장 증상 일기를 완료합니다.

기준선에서 연구 인구 특성을 설명하기 위해 추가 정보가 수집됩니다. 이 정보에는 식사/식사 시간 행동,음식 일기,태양 노출,피부색 및 인체 측정법(체중 및 신장)이 포함됩니다. 최종 방문시 식사/식사 시간 행동에 대한 기준 평가가 반복되고 어린이의 체중/키가 측정됩니다. 결과 측정 및 테스트 방법은 표 1 을 참조하십시오.

혈액 샘플링 및 분석

어린이는 기준선(1 단계–스크리닝),6 개월(안전 조치)및 12 개월(종점)의 세 가지 경우에 혈액 샘플을 채취합니다. 영양 바이오 마커 및 테스트 방법은 표 1 을 참조하십시오. 단식되지 않은 혈액 샘플은 소아 직원의 감독하에 수집되어 노스 쇼어 또는 와이타 케레 병원에서 처리됩니다. 영양 바이오 마커는 정맥 혈액 샘플에서 분석됩니다. 여기에는 다음이 포함됩니다: 25(오)디,적혈구 지방산,칼슘,알부민,철분 연구,비타민 비 12 및 엽산,전체 혈구 수 및 비타민 ㅏ.적혈구 지방산 및 비타민을 제외하고 모든 바이오 마커는 노스 쇼어 병원에서 분석됩니다. 2015 년 11 월 15 일(토)~2015 년 12 월 15 일(일)

설문지

주요 결과 측정은 표 1 에 자세히 설명 된 자가면역결핍증의 핵심 증상 및 공동 발생 문제 행동에 대한 심리적 평가입니다. 이차 결과 측정은 위장 문제의 평가입니다. 모든 간병인에게 설문지를 작성하는 방법에 대한 표준화 된 지침이 제공됩니다. 참가자가 출발하기 전에 연구원은 완전성에 대한 모든 답변을 확인합니다.

사회적 반응 척도,제 2 판:2.5-4.5 및 4.5–18 세 사이의 연령 그룹에 특정한 2.5-4.5 버전이 사용됩니다. 사회적 인식,사회적 정보 처리,상호 사회적 의사 소통,사회적 불안/회피 및 고정 관념적 행동/제한된 이해의 영역에서 그 심각성을 정량화합니다. 임상 타당성 및 감도는 자가면역결핍바이러스를 가진 인구에서 결정되었습니다.2-5 세 및 5-12 세 연령 그룹에 대한 특정 버전이 사용됩니다. 감각 처리,계획 및 아이디어(실습)및 아동의 사회적 참여를 평가합니다. 저울은 사회 참여,시력,청력,촉각,신체 인식(고유 감각),균형 및 운동(전정 기능)및 계획 및 아이디어(실습)를 측정합니다. 이 도구는 표준화,검증 및 자가면역 장애 아동에 사용되었습니다.

비정상적인 행동 체크리스트(알파벳):알파벳 행동 문제,즉 과민성,사회적 철수,고정 관념의 행동,과잉 행동 및 부적절한 말의 다양성을 측정합니다. 그것은 자가면역결핍바이러스를 가진 아이들에서 유효하게 하고 자가면역결핍바이러스의 처리 결과 연구에서 널리 이용되었습니다.

위장 증상 설문지:위장 증상 설문지는이 연구를 위해 특별히 고안되었으며 위장 증상 및 증상이 포함됩니다. 연구 참가자의 간병인은 매주 온라인 일기를 제공하고 어린이가 변비,설사,헛배 부름,복통,구토/메스꺼움,복부 팽만감,설명 할 수없는 주간 과민성 또는/및 설명 할 수없는 야간 각성 지난 주 동안,그리고 만약 그렇다면 이것이 몇 번이나 발생했는지 기록하도록 요청받을 것입니다. 위장 증상 설문지는 검증되지 않았지만 위장 증상의 결과 일 수있는 위장 증상 또는 행동에 대한 질문이 포함되어 있습니다. 우리는 자 폐 성 어린이,위장 증상을 평가 하기 위한 검증 된 악기의 인식 하 고 확실히 뉴질랜드에서.

어린이 식사의식이 지수(주사위): 주사위는 건강한 어린이와 청소년을위한 건강 식품 및 영양 지침의 뉴질랜드 교육부에 따라 연구팀에 의해 개발 된 간단한 다이어트 품질 평가 도구입니다. 이 도구는 2 세에서 8 세 사이의 뉴질랜드 건강한 어린이(미발표)의 코호트에서 검증되었으며,이 연구에서 4 일 추정 식품 일기 및 생화학 적 마커에 대한 연구.

행동 소아과 수유 평가 척도: 이 응용 프로그램은 아이의 식사 행동과 부모의 태도와 행동을 측정하는 간단한 평가 도구입니다. 아동 행동에 관한 25 리 커트 척도(5 점)질문과 부모의 태도와 행동에 관한 10 개의 이분법 질문으로 구성된 35 개 항목 척도 설문지입니다. 혈압파에 대한 컷오프 점수가 최근에 확립되었습니다. 혈압은 좋은 내부 유효성 및 테스트-재시험 신뢰성을 가진 가장 신뢰할 수있는 부모가 관리하는 수유 설문지입니다.

4 일 예상 음식 일기: 식이 섭취량 데이터는 주말을 포함하여 4 일 추정 음식 일기에 의해 수집됩니다. 정확하게 음식 일기를 완료하는 방법에 대한 지침은 음식 일기와 함께 제공됩니다. 참가자는 책자의 반환을 위해 무료 포스트,미리 주소가 지정된 봉투를 받게 될 것입니다. 평균 매크로 및 미량 영양소 섭취량은 푸드 웍스 프로페셔널 에디션 7 을 사용하여보고 된 4 일 동안 평가됩니다.

본 연구에서는 7 일 음식 일기와 같은 긴 음식 일기의 높은 응답자 부담과 시간 소모적 인 특성 때문에 4 일 음식 일기가 선택되었습니다. 때문에 영양 섭취에 높은 사람 내 변화,그것은 섭취의 매우 정확한 추정치를 가지고 오랜 기간 동안식이 섭취량을 기록하는 것이 좋습니다. 그러나 4 일간의 음식 일기가 무작위로 다른 날을 다루는 경우식이 섭취량에 대한 정확한 추정치를 제공 할 수 있습니다.

태양 노출 및 피부색,영양 보충제 및 후속 특수식이 요법에 관한 정보는 현재 연구 목적을 위해 특별히 고안된 설문지에 의해 수집됩니다. 태양 노출 설문 조사에는 태양 노출에 대한 간병인의 신념과 태도에 대한 질문뿐만 아니라 임신 중 거주 국가 및 도시,출생 계절 및 온도 및 빛 극단에 대한 자녀의 민감도에 대한 질문이 포함됩니다.

약물 준수/연구 프로토콜 준수

간병인은 온라인 준수 및 위장 문제 일기에 대한 링크와 자폐증 및 영양 문제에 대한 팁/사실이 포함 된 주간 이메일을 받게됩니다. 간병인은 사기 목적 및 준수를 장려하기 위해 1,3,6 및 9 개월에 전화로 연락합니다. 간병인은 또한 분기 별 시험 뉴스 레터를 받게됩니다. 이 뉴스레터에는 연구에 대한 업데이트,자가면역결핍에 관한 일반적인 주제,그 주제와 관련된 간병인의 경험,그리고 연구 어린이들을 위한 오락/대회가 포함될 것입니다.

새로운 개입 자료는 4 개월마다 참가자에게 발송되며 간병인은 다음 방문(6 개월 또는 12 개월)에 반환 할 이전 달의 병을 따로 보관하도록 요청받습니다. 치료에 대한 순응도는 각 참가자의 남은 보충제가 개입을 완료 한 후 계산하여 분석됩니다.

부작

모든 참가자들이 회상에 6 개월 동안에 대한 여부를 확인하기 위한 혈액검사 과다증 D(혈청 25 일(OH)D>225nmol/L)및 hypercalcaemia(캘리포니아 혈청>2.7mmol/L). 결과는 눈을 멀게 한 제 3 자에 의해 검사될 것입니다(그러나 결과의 분석에는 관련이없습니다). 제 3 자는 혈액 검사 결과를 확인하고 검토 및 권고를 위해 시험 소아과 의사 및 선임 조사관에게 보낼 것입니다. 고칼슘 혈증이있는 경우 용량 투여가 조정됩니다.

순응도 및 위장 증상 일기는 매주 모니터링되며 모든 부작용은 어린이의 일반적인 건강 및 행동 반응을 추적하기 위해 부작용 로그에 기록됩니다. 이상 반응의 경우,아동의 건강은 3-4 주 연속으로 더 면밀히 모니터링되며,이상 반응이 지속되면 보고서는 추가 조사를 위해 시험 소아과 의사 및 선임 조사관에게 회부됩니다.

결과의 보급

음식 일기의 수령 및 분석 및 스크리닝시 생화학 분석 완료 후 각 참가자는 피드백 양식을 받게됩니다. 인체 측정 및 혈액 결과(철분 연구,비타민 비 12,엽산 및 전체 혈구 수)도 포함됩니다. 임상시험에 참가하지 않은 참가자는 자신의 비타민 및 적혈구 지방산 수치에 대한 통지를 받게 됩니다.

시험 완료시 참가자는 기준선 및 최종 비타민 디 과 적혈구 지방산 상태,그리고 그들이 복용했는지 여부 활성 또는 위약 복용량. 그들은 또한 심리 평가 결과에 대한 요약을 받게됩니다.

참가자 및 기타 이해 관계자(예:보건 전문가,지구 보건위원회,1 차 보건기구,국제 보건 지원 그룹)는 연구 결과에 액세스 할 수 있습니다. 결과는 국내 및 국제적으로 과학 컨퍼런스에서 발표 될 것이며,동료 검토 저널에 출판 될 준비를하고 언론에 배포 될 것입니다.

데이터 처리 및 통계 분석

이름과 주소 세부 사항은 마이크로 소프트 엑셀에서 유지됩니다. 체크 박스는 연구를 통해 참가자의 진행 상황을 기록합니다. 다른 모든 데이터는 하나의 마이크로 소프트 엑셀 스프레드 시트에 입력되며 참가자는 고유 한 제목 번호로 만 식별됩니다. 설문지의 득점은 심리학자와 연구원에 의해 두 번 확인 될 것입니다. 모든 항목은 연구 팀의 다른 구성원에 의해 두 번 확인됩니다. 모든 문서는 기밀 조건 하에서 안전하게 보관되며 5 년간 보관됩니다.

윈도우 버전 21.0 에 대한 통계. 미국,뉴욕 주 아르 몽크). 통계 분석을 시작하기 전에 데이터를 정리하고 코딩 오류를 확인합니다. 데이터는 무작위로 정확성과 완전성을 확인하고 소스 데이터에 대해 확인하여 타당성을 확인합니다. 변수는 콜 모고 로프-스 미르 노프 테스트,샤피로-윌크 테스트 및 정규성 플롯을 사용하여 정규성에 대해 테스트됩니다. 정규 분포가 아닌 데이터는 로그 변환에 의해 대략적인 정규 분포로 변환됩니다. 데이터는 정규 분포 데이터에 대한 평균(표준 편차)으로 적절하게보고됩니다; 변환 된 데이터는 요약 통계에서 기하 평균으로 역 변환되며,비 정규 분포 데이터는 중앙값(25 번째,75 번째 백분위 수)으로 설명되고 범주 형 데이터는 빈도로 설명됩니다.

참가자의 기준선 특성은 파라 메트릭 데이터에 대한 분산 분석(분산 분석)과 비 파라 메트릭 데이터에 대한 크루 스칼-월리스 테스트를 사용하여 그룹간에 비교됩니다. 12 개월 이상 자폐증 증상에 대한 치료 효과를 비교하는 1 차 분석은 일반화 된 선형 혼합 모델 절차를 사용하여 수행됩니다. 치료 및 시간은 고정 효과로 포함되며 개입과 시간 간의 상호 작용이 테스트됩니다. 중요한 주 효과 또는 상호 작용 효과가 관찰되면 본 페로 니 조정을 사용한 사후 분석이 수행됩니다. 잠재적 혼란 요인 및 효과 수정 자(예:기준선 25(오)디 및 적혈구 지방산,기준선에서의 자폐증 증상,연령 및 성별)모델 내에서 조사됩니다. 로지스틱 회귀는 곱셈 상호 작용을 테스트하는 데 사용됩니다. 로스만의 시너지는 지는 것 같은 화합에서 가산성,보다 적은 화합 제안할 때 적개심 될 것입니다 활용하는 검사 postulated 상호작용 효과의 비타민 D 와 오메가-3LCPUFAs 에 핵심 증상의도 포함할 수 있습니다.

12 개월 동안 위장 증상에 대한 치료의 효과를 비교하는 2 차 분석은 동일한 절차를 사용하여 수행됩니다. 잠재적 혼란 요인 및 효과 수정 자(예:모든 위장 증상 및 약물/보충제 사용의 기준선 진단)모델 내에서 조사됩니다.

시험을 완료하고 철회 한 참가자 간의 차이는 연속 변수(예:연령)에 대한 독립적 인 테스트 또는 만–휘트니 테스트를 사용하여 분석됩니다 범주 형 변수(예:성별)에 대한 카이 제곱.

사이의 연관의 심각도 ASD 증상 및 영양 상태(특히,비타민 D,RBC 지방산,철과 비타민 B12)에서 초기 평가를 사용하여 회귀 분석한다. 이 정보는 영양 상태의 삼위 일체에 따라 치료 반응을 평가하는 데 사용됩니다.

치료 의도 및 프로토콜 별 분석이 모두 활용되지만 주요 분석 방법은 치료 의도입니다. 통계적 유의성은 양측 테스트를 기반으로합니다 피<0.05 중요한 것으로 간주.