Definisjon Av Falske Positive Reaksjoner I Screening For Hepatitt C Virus Antistoffer

i daglig laboratorierutine er pålitelig diagnose av hepatitt c-virus (HCV) – infeksjon ikke alltid mulig ved bruk av EN HCV-enzymimmunoassay (EIA), siden det er velkjent at denne analysen for en rekke pasienter gir falske positive resultater (4, 8, 17). Derfor må resultatene oppnådd AV EIA bekreftes ved ytterligere testing. Den kommersielt tilgjengelige analysen RIBA 2.0 (Chiron Corporation) oppfyller imidlertid ikke kriteriene som definerer en bekreftelsesanalyse, siden den består av rekombinante proteiner som er identiske med DE I EIA (1, 5, 9). HCV PCR kan ikke brukes til bekreftelse av positive EIA-resultater, da et negativt PCR-resultat ikke utelukker MULIGHETEN FOR HCV-infeksjon med lavt viremi (under deteksjonsgrensen). VIDERE ER PCR for arbeidskrevende og dyrt å brukes regelmessig som en bekreftende analyse. DERFOR har VI etablert EN HCV strip immunoblot assay (Sia) (Universitetä-Krankenhaus Eppendorf SIA) som består av fire rekombinante proteiner, avledet fra kjernen og tre ikke-strukturelle regioner (NS3, NS4 og NS5) AV HCV, som er forskjellige fra de som brukes I HCV EIA (5).

i denne studien sammenlignet vi resultatene av en ANDRE generasjon HCV EIA med DE AV UKE SIA for 2,283 serumprøver. Målet var å vurdere betydningen av positive resultater i HCV EIA for å definere kriterier for utførelse av ytterligere tester for pålitelig diagnostisering AV HCV-infeksjon i den daglige laboratorierutinen. Sera ble trukket fra 2,283 personer som bor i nord-Tyskland rundt Hamburg. De ble sendt til vårt laboratorium under mistanke OM HCV-infeksjon på grunn av enten forhøyede leverenzymverdier (alaninaminotransferase, >45 U/liter) eller kliniske tegn på hepatitt (gulsott og øvre magesmerter) eller risikofaktorer for parenteralt overførbare sykdommer, som kronisk hemodialyse, blodtransfusjon eller intravenøs narkotikabruk. På undersøkelsestidspunktet testet de negativt for akutt infeksjon MED HAV (anti-HAV immunoglobulin m antistoffer) og hbv (hepatitt b overflateantigen). Gjentatte undersøkelser ble utført som oppfølging hver 3. måned i 1 år. For serologisk screening EN andre generasjon HCV EIA (Abbott Laboratories, North Chicago, Ill.) ble utført. For bekreftelse AV HCV VV-resultater ble sera testet parallelt AV UKE SIA som tidligere beskrevet (5). Immunoblotanalysen ble ansett som positiv når antistoffer mot minst to forskjellige rekombinante proteiner kunne påvises. Reaktivitet mot bare ett enkelt protein ble vurdert som et ubestemt resultat. FOR påvisning AV HCV rna revers transkripsjon-PCR ble utført som tidligere beskrevet (6, 7).

HCV EIA var negativ for 469 prøver, hvorav 456 (97%) også var negative VED UKE SIA. FOR 13 prøver BLE UKE SIA ansett som ubestemt. Alle 469 av disse seraene var negative VED HCV PCR, og ingen av pasientene utviklet kliniske eller biokjemiske tegn på hepatitt under oppfølgingen.

HCV EIA var reaktiv for 1814 prøver, hvorav 1394 (77%) var også positive VED UKE SIA (Tabell 1). I 240 tilfeller (13%) kunne imidlertid ikke reaktiviteten i HCV EIA bekreftes AV UKE SIA. Egnede prøver FOR HCV PCR var tilgjengelige for 193 av disse 240 prøvene, og et positivt PCR-resultat ble oppnådd med 13 prøver. Av disse ble ni positive VED UKE SIA når de ble testet etter 3 måneder, noe som tyder på at disse pasientene hadde fått HCV-infeksjon kort tid før den første undersøkelsen. I de resterende fire pasientene, som gjentatte ganger testet PCR positivt til tross for et negativt resultat AV UKE SIA, kunne immunsuppressive forhold bli funnet. En hadde Et b-celle lymfom, en ble kronisk hemodialysert, og to praktiserte intravenøs narkotikabruk. Det er tidligere vist at serologisk respons hos pasienter med immunsuppressive tilstander er lav eller til og med fraværende (10, 14, 15). Dette kan føre til negative eller ubestemte resultater i serologiske analyser selv om personen lider av INFEKSJON MED HCV (13). DERFOR BØR PCR alltid utføres hos pasienter med kjente immunsuppressive lidelser. De 180 FØRSTE PCR-negative forsøkspersonene forble negative VED UKE SIA og HCV PCR ved gjentatte undersøkelser under oppfølgingen. Videre utviklet disse pasientene ikke kliniske eller biokjemiske tegn på hepatitt. Dette indikerer at i minst disse 180 prøvene (10%) oppstod falske positive resultater. VI må anta AT EIA også var falsk positiv i prøvene som ikke var egnet MATERIALE FOR PCR, siden UKE SIA forblir negativ og ingen av pasientene utviklet kliniske eller biokjemiske tegn på hepatitt under oppfølgingen. Dette indikerer at så lenge ingen bedre screeninganalyser er kommersielt tilgjengelige, må alle POSITIVE HCV EIA-resultater bekreftes.

et ubestemt resultat i UKE SIA ble observert med 180 AV DE 1814 EIA-positive prøvene (10%). Egnede prøver FOR HCV PCR ble oppnådd for 134 av disse 180 prøvene, OG HCV RNA kunne detekteres hos 58 av dem. Under oppfølgingen ble det observert full serokonversjon hos fire pasienter. Alle av dem avslørte først antistoffer rettet utelukkende mot NS3-proteinet I UKE SIA. I oppfølgingsprøver oppsto reaktivitet mot ytterligere rekombinante proteiner. Disse resultatene støtter den tidligere antagelsen om at antistoffreaktivitet mot NS3 spiller en viktig rolle i tidlig serologisk påvisning AV HCV-infeksjon (5). Videre er det funnet en særlig høy korrelasjon mellom HCV viremi og antistoffreaktivitet mot c33c-antigenet i kommersielt TILGJENGELIG RIBA (2). Prøver med positivt RESULTAT VED HCV EIA og et ubestemt resultat ved immunoblotanalyse må underkastes PCR, siden VI oppdaget HCV RNA i 43% av prøvene (58 av 134). Prosentandelen av ubestemte resultater VED UKE SIA er bemerkelsesverdig lav sammenlignet MED RIBA 2.0 eller 3.0 (2, 3, 11, 16). En årsak til dette kan være at lokale isolater ble brukt til å etablere UKE SIA, siden serologiske tester som inneholder rekombinante proteiner fra lokale isolater har vist seg å ha bedre sensitivitet og spesifisitet enn kommersielt tilgjengelige analyser (5, 12). Dette er imidlertid lite sannsynlig å være den eneste grunnen, siden UKE SIA ble evaluert med serumprøver som inneholdt EN REKKE HCV-genotyper som tidligere beskrevet (5).

DIAGNOSEN HCV positiv har en dyp innvirkning på livet til den rammede personen. Derfor må det nås så pålitelig som mulig. Våre data indikerer at DEN mye brukte HCV EIA gir en høy prosentandel (10%) av falske positive resultater. Sammenlignet med andre screeningsanalyser, f. eks. Humant immunsviktvirus EIAs, er dette uakseptabelt høyt. Derfor er bekreftelse av hvert positivt HCV VV-resultat ved supplerende tester obligatorisk. Som vi har vist med VÅR INTERNE UKE SIA, er en mulighet for å forbedre påliteligheten AV HCV-diagnosen å introdusere proteiner i bekreftelsesanalysen som er forskjellige fra de som brukes i screeningsanalysen.