isolatie-en identificatiemethoden van Rothia-soorten in orale Holten

Rothia dentocariosa en Rothia mucilaginosa die Gram-positieve bacteriën zijn, maken deel uit van de normale flora in de menselijke mondholte en keelholte. Verder wordt verwacht dat Rothia aeria, die voor het eerst werd geïsoleerd uit luchtmonsters in het Russische ruimtestation Mir, een orale bewoner is. Immuungecompromitteerde patiënten worden vaak geïnfecteerd door deze organismen, wat leidt tot verschillende systemische ziekten. De betrokkenheid van deze organismen bij orale infecties heeft weinig aandacht getrokken, en hun verdeling in de mondholte is niet volledig opgehelderd vanwege moeilijkheden bij het nauwkeurig identificeren van deze organismen. Een geschikt selectief medium voor orale Rothia-soorten, waaronder R. aeria, is noodzakelijk om de werkelijke prevalentie van deze organismen in de mondholte te beoordelen. Om de bacteriepopulatie in de mondholte te onderzoeken, werd in deze studie een nieuw selectief medium (ORSM) ontwikkeld voor het isoleren van orale Rothia-soorten. ORSM bestaat uit tryptone, natriumgluconaat, Lab-Lemco poeder, natriumfluoride, neutrale acriflavin, lincomycine, colistin, en agar. Het gemiddelde groeiherstel van orale Rothia soorten op ORSM was 96,7% vergeleken met die op BHI-Y agar. De groei van andere representatieve orale bacteriën, d.w.z. genera Streptococcus, Actinomyces, Neisseria en Corynebacterium, werd Opmerkelijk geremd op het selectieve medium. PCR primers werden ontworpen gebaseerd op gedeeltelijke opeenvolgingen van de 16S rDNA genen van mondelinge Rothia species. Deze primers reageerden op elk organisme en reageerden niet op andere niet-orale Rothia-soorten of representatieve orale bacteriën. Deze resultaten gaven aan dat deze primers nuttig zijn voor het identificeren van orale Rothia soorten. Een eenvoudige multiplex PCR procedure die deze inleidingen gebruiken was een betrouwbare methode om mondelinge Rothia species te identificeren. Het aandeel van orale Rothia-soorten in speekselmonsters van 20 proefpersonen werd onderzocht met behulp van een kweekmethode met behulp van ORSM. Rothia dentocariosa, Rothia mucilaginosa en R. aeria waren goed voor 1,3%, 5,9% en 0.8% van het totale aantal te kweken bacteriën op BHI-Y agar in de orale holtes van alle proefpersonen, respectievelijk. Er werd aangegeven dat bij orale Rothia-soorten R. mucilaginosa het meest overheersend is in de mondholte van de mens. Een nieuw selectief medium, ORSM, was nuttig voor het isoleren van elke orale Rothia-soort.



+