technische informatie en aanverwante producten
kenmerken van het Product voor inheemse Mierikswortelperoxidase
Extinctiecoëfficiënt: EmM = 100 bij meting bij 403 nm.1
molecuulgewicht: (CA. 44 kDa)
omvat de polypeptideketen (33.890 Dalton), hemin plus Ca2+ (CA. 700 Dalton),
en koolhydraten (9400 Dalton).3
iso-elektrisch punt: iso-enzymen variëren van 3,0-9,0
er bestaan ten minste zeven iso-enzymen van HRP.2
Mierikswortelperoxidase (HRP) is geïsoleerd uit mierikswortelwortels (Amoracia rusticana) en behoort tot de ferroprotoporfyrinegroep van peroxidasen. HRP is één enkel kettingpolypeptide dat vier disulfidebruggen bevat. Het is een glycoproteïne met 18% koolhydraten. De koolhydraatsamenstelling bestaat uit galactose, arabinose, xylose, fucose, mannose, mannosamine en galactosamine, afhankelijk van het specifieke isozym.2
Substraatspecificiteit
HRP combineert gemakkelijk met waterstofperoxide (H2O2), en het resulterende complex kan een grote verscheidenheid aan chromogene waterstofdonoren oxideren. Het kan chemiluminescente substraten zoals luminol en isoluminol, en fluorogenic substraten zoals tyramine, homovanillic zuur, en 4–hydroxyfenyl azijnzuur ook gebruiken.
de Substraatindex van de Enzyme Explorer geeft links naar verschillende chromogene en chemiluminescente waterstofdonoren die worden gebruikt om de peroxidase-activiteit te bepalen.
Remmers
De volgende verbindingen zijn remmers van mierikswortel peroxidase: natriumazide, cyanide, L–cystine, dichromate, ethylenethiourea, hydroxylamine, sulfide, vanadate, p–aminobenzoëzuur, Cd+2 Co+2, Cu+2 Fe+3, Mn+2, Ni+2, Pb+2.4
pH-Afhankelijkheid
Het pH-optimum van HRP in het bereik van 6,0 tot 6,5. De activiteit bij pH 7,5 is 84% van het maximum. Het enzym is het meest stabiel in het pH-bereik van 5,0 tot 9,0.5
toepassingen
Mierikswortelperoxidase wordt veel gebruikt als etiket voor immunoglobulinen in veel verschillende immunochemische toepassingen, waaronder ELISA, immunoblotting en immunohistochemie. HRP kan aan antilichamen door verscheidene verschillende methodes, met inbegrip van glutaraldehyde, parodate oxidatie, door disulfidebanden, en ook via amino en thiol worden geconjugeerd die cross-inkers. HRP is het meest gewenste etiket voor antilichamen aangezien het kleinste en stabielste van de drie populairste enzymetiketten (HRP, alkalische fosfatase, en B-galactosidase) is, en zijn glycosylation leidt tot lagere niet-specifieke band.6 protocollen die de glutaaraldehyde en parodaatconjugatiemethodologieën beschrijven kunnen in Harlow, E. et al worden herzien.7
wij bieden verschillende chromogene en chemiluminescente detectiereagentia voor blotting, histologie en ELISA toepassingen.
We bieden ook een complete lijn geconjugeerde HRP-antilichamen aan.
bereidingsinstructies
de keuze van het oplosmiddel is afhankelijk van de beoogde toepassing. De enzymen in poedervorm zijn oplosbaar water of 0,1 M fosfaatbuffer, pH 6 (10 mg / mL). De suspensie (P6140) mag worden verdund in water.
opslag / stabiliteit
de peroxidasen in poedervorm dienen in de koelkast bij 2-8 °C Te Worden bewaard. De suspensie (P6140) moet worden bewaard bij 2-8 °C. Als deze producten op de juiste manier worden bewaard, hebben ze een houdbaarheid van ten minste twee jaar.
temperatuurstabiliteit van gevriesdroogde poeders
temperatuurstabiliteit van oplossingen
stabiliteit van oplossingen vs. pH
stabiliteit van oplossingen vs. concentratie
RZ profiel
RZ (Reinheitszahl): de absorptieverhouding A403/A275. Het is een maat voor het heminegehalte van de peroxidase, niet voor de enzymactiviteit. Zelfs preparaten met een hoge RZ-waarde kunnen een lage enzymatische activiteit hebben. Voor het vervoegen van eiwitten zoals antilichamen tegen peroxidase, kies een peroxidase met een RZ-waarde van ten minste 3,0.
Spectrophotometric Method to Determine the RZ Value for Peroxidase
Peroxidase Enzymes for Labeling
« Menu
