Progrese în testarea genomică-ce trebuie să știți

progrese în testarea genomică-ce trebuie să știți

de Dr. C. H. Weaver MD actualizat 9/1/2018

Î: Ce este testarea genomică?

A: testarea genomică analizează un grup de gene și diferitele lor niveluri de exprimare. Această expresie sau activitate genică poate caracteriza modul în care genele interacționează între ele și pot prezice comportamentul anumitor țesuturi din corp. Acest lucru este în contrast cu testarea genetică, care analizează o schimbare specifică în cadrul unui cromozom sau genă individuală, adesea ca parte a unei trăsături moștenite.

Î: Ce rol joacă testarea genomică într-un diagnostic de cancer?
a: testarea genomică poate oferi informații despre prognosticul unui pacient pe baza expresiei genei din țesutul canceros al unui individ și poate prezice adesea dacă o anumită terapie (cum ar fi chimioterapia) va fi benefică.

Î: În ce moment al procesului de diagnosticare are loc testarea genomică?
A: Testarea genomică poate apărea în orice moment după ce a fost dobândită o probă de țesut (biopsie sau rezecție) a cancerului.

Î. Ce întrebări ar trebui să adresez echipei mele de asistență medicală despre testarea genomică?
A: Următoarele sunt întrebările principale pe care trebuie să le adresați furnizorului dvs. de asistență medicală.

• sunt disponibile teste genomice pentru tipul de cancer pe care îl am, pentru a ajuta la determinarea prognosticului meu general?
• rezultatele acestor teste vor avea potențialul de a schimba managementul cancerului? Mai exact:
  • testul îmi va putea spune dacă anumite terapii vor fi benefice în tratamentul meu?
• ați avut rezultate pozitive în utilizarea acestui test cu alți pacienți?
• această testare este acoperită de planul meu de asigurare? (Acest tip de testare poate rula în mii de dolari, deși multe planuri acoperă testele fără o cheltuială out-of-buzunar.)

Î: există tipuri specifice de cancer pentru care rolul testării genomice este deosebit de semnificativ?

A: Există trei tipuri de pacienți cu cancer pentru care testarea genomică poate fi deosebit de avantajoasă:

• pacienții cu cancer de sân pozitiv la receptorul de estrogen care nu s-a răspândit încă la ganglionii limfatici (cancer de sân în stadiu incipient) pot avea un prognostic dificil de prezis doar prin biopsie tisulară. Testarea genomică nu numai că poate ajuta la furnizarea de informații prognostice (adică, supraviețuirea prevăzută la 10 ani), dar poate prezice, de asemenea, dacă chimioterapia va avea vreun beneficiu semnificativ, permițând unui pacient să evite toxicitatea chimioterapiei atunci când este posibil.
• pacienții cu anumite tipuri de cancer de colon pot beneficia, de asemenea, de testarea genomică în ceea ce privește determinarea prognosticului, prezicerea beneficiului chimioterapiei și selectarea chimioterapiei (determinarea agenților chimici care vor avea cel mai mare beneficiu).
• pacienții cu cancer care s-a răspândit în alte zone ale corpului (boală metastatică) sau care a recidivat local (în ciuda intervenției chirurgicale și/sau chimioterapiei) pot fi supuși unor teste genomice care analizează expresia într-o mare varietate de gene, inclusiv cele care nu sunt asociate în mod obișnuit cu locul inițial al cancerului. Acest tip de testare genomică poate identifica anumite gene care ar putea fi o țintă pentru terapia care inițial nu a fost luată în considerare. O schimbare a unei terapii vizate ar avea potențialul de a îmbunătăți semnificativ supraviețuirea.

rolul emergent al genomicii în diagnosticarea și monitorizarea cancerului

Prezentare generală

cancerul este rezultatul anomaliilor genetice care afectează funcția anumitor gene. Genele determină forma, funcția și modelele de creștere ale celulelor. Cei care accelerează sau suprimă creșterea sunt adesea implicați în cancer. De exemplu, multe tipuri de cancer au o anomalie într-o genă care este responsabilă pentru stimularea creșterii celulare și/sau gena care previne în mod normal cancerul nu funcționează corect. Ambele anomalii genetice pot duce la creșterea celulară necontrolată și excesivă, trăsătura distinctivă a cancerului. Testele genomice, sau testele așa cum sunt numite de oamenii de știință, sunt un instrument pentru identificarea genelor specifice într-un cancer care sunt anormale sau nu funcționează corect. În esență, acest lucru este ca identificarea semnăturii genetice sau a amprentei unui anumit cancer.

testarea genomică este diferită de testarea genetică. Testele genetice sunt de obicei folosite pentru a determina dacă un individ sănătos are o trăsătură moștenită (genă) care îi predispune la dezvoltarea cancerului. Testele genomice evaluează genele dintr-un eșantion de țesut bolnav de la un pacient care a fost deja diagnosticat cu cancer. În acest fel, genele care au mutat sau au dezvoltat funcții anormale sunt identificate pe lângă cele care ar fi putut fi moștenite.

testarea genomică poate ajuta medicii să:

• determinați prognosticul unui pacient (rezultatul potențial)
• determinați dacă un cancer este agresiv/în creștere rapidă sau în creștere lentă
• alegeți cel mai eficient tratament pentru fiecare cancer în parte
• monitorizați pacienții care urmează tratament pentru a determina dacă tratamentul funcționează
• monitorizați pacienții care sunt în remisie pentru a detecta o posibilă progresie a bolii tratabile

poate cea mai mare promisiune a testării genomice este potențialul său de individualizare a tratamentului. Aceasta înseamnă că pacienții cu afecțiuni mai grave pot fi identificați și li se pot oferi terapii agresive și inovatoare care le pot prelungi viața, în timp ce pacienții diagnosticați cu o afecțiune mai puțin gravă pot fi scutiți de tratamente inutile. De exemplu, unele femei cu cancer de sân nod-negativ vor recidiva după ce au fost tratate doar cu o intervenție chirurgicală. S-a demonstrat că testarea genomică face diferența între pacienții cu cancer de sân nod-negativ care au mai multe șanse să recidiveze și, prin urmare, beneficiază de chimioterapie suplimentară și care pacienți ar putea să nu aibă nevoie de chimioterapie.

pentru a aprecia modul în care știința geneticii este aplicată diagnosticului și monitorizării cancerului, este util să înțelegem principiile de bază ale geneticii. Aceasta include cunoașterea ADN-ului, a cromozomilor și a genelor, a modului în care funcționează și a modului în care informațiile conținute în ADN sunt transformate, prin expresia genelor, în structuri specifice care dictează funcțiile unei celule.

cu aceste cunoștințe de bază, este posibil să înțelegem promisiunea testelor pentru detectarea anomaliilor genetice, cum ar fi:

• fluorescență hibridizare in situ (pește)
• reacția în lanț a polimerazei (PCR)
• transcriere inversă PCR
• tehnologia Microarray
• proteomica serică

fundal—principiile de bază ale geneticii

importanța geneticii în ereditate este bine cunoscută; cu toate acestea, rolul pe care îl joacă genetica în controlul structurii și funcției celulelor poate fi și mai critic pentru un organism individual. Ereditatea asigură că oamenii și toate speciile sunt capabile să se reproducă și să-și perpetueze trăsăturile unice și direcționarea modului în care sunt construite celulele, ce muncă fac și cum cresc este necesară pentru a se asigura că un organism va supraviețui pentru a se reproduce. O înțelegere a acestui rol critic pe care ADN-ul și genele îl au în determinarea vieții minut cu minut a unei celule este, de asemenea, importantă pentru înțelegerea modului în care genetica este implicată în cancer.

ADN: Informația genetică pentru un întreg organism este conținută în nucleul fiecărei celule sub formă de acid dezoxiribonucleic, cunoscut sub numele de ADN. ADN-ul este o moleculă elicoidală dublu catenară (înfășurată). Fiecare catenă este compusă dintr-o coloană vertebrală structurală plus o secvență de compuși care conțin azot numiți baze azotate, care pot fi considerate alfabetul geneticii. Există patru baze: adenină, guanină, timină și citozină. Cele două fire sunt conectate la baze.

codul genetic, sau Informația genetică care controlează structura și funcția celulei, este conținută în secvența bazelor. Secvența de bază controlează în cele din urmă secvența de aminoacizi care sunt conectați împreună pentru a face o moleculă de proteine. Secvențele diferite produc proteine diferite. Proteinele care sunt sintetizate într-o celulă determină structura și funcția acelei celule.

cromozomi: ADN-ul este ambalat într-un număr specific de unități numite cromozomi. Oamenii au 46 de cromozomi în fiecare celulă. De cele mai multe ori, cromozomii sunt împachetați strâns în jurul proteinelor din nucleul celulei, astfel încât să nu poată fi văzuți. Cu toate acestea, în etapele vieții celulei chiar înainte de diviziunea celulară, cromozomii devin vizibili cu un microscop luminos. Ele apar ca un „H” capital cu patru lungimi de ADN încolăcit Unite de o proteină ca „cruce”a ” H”.

gene: ADN-ul este organizat în gene, care sunt segmente lungi de ADN care includ regiuni care conțin coduri pentru proteine numite exoni, precum și regiuni necodificate numite introni. Genele sunt definite ca unitatea de bază a eredității, deoarece sunt transmise descendenților și apoi reproduse și transmise celulelor individuale în timpul diviziunii celulare. Replicarea implică utilizarea ambelor fire de ADN ca șabloane pentru a sintetiza ADN-ul complementar (ADNc), care este o catenă potrivită. Rezultatul este două copii identice ale ADN-ului pentru fiecare celulă după finalizarea diviziunii celulare. În condiții normale, structura ADN-ului și, prin urmare, a genelor, rămâne relativ constantă prin replicare și diviziune celulară.

expresia genelor: Informația genetică conținută în gene este tradusă în structura și funcția celulară printr-un proces numit expresie genetică. Genele pot fi considerate coduri sau rețete pentru fabricarea proteinelor. Proteinele sunt componenta de bază a structurii și funcției celulare. Atunci când o genă este „exprimată”, proteina sau proteinele pe care le codifică sunt construite în mod activ în celulă și funcția pe care o servesc aceste proteine este îndeplinită. De exemplu, atunci când gena HER-2/neu este exprimată în cancerul de sân, există mai mulți receptori ai factorului de creștere epidermică (EGFRs) prezenți, care sunt proteine pe suprafața celulară pe care o codifică HER-2/neu. Mai mult, funcția EGFR este de a stimula creșterea celulară; deci o celulă care exprimă HER-2/neu are multe EGFRs și crește activ.

expresia genelor are loc printr-un sistem complex care implică următorii pași:

• separarea temporară a celor două catene ale moleculei ADN la o anumită genă.
• Transcrierea segmentului de ADN, care este sinteza unei copii monocatenare a secvenței ADN care este expusă; această copie se numește ARN mesager (ARNm).
• sinteza proteinelor sau construirea de noi proteine în celulă, pe baza informațiilor conținute în ARNm.

anomalii genetice: Anomaliile genetice sunt modificări ale ADN-ului unei celule care pot apărea întâmplător sau datorită unei influențe de mediu. Aceste modificări conferă celulei afectate un avantaj față de celulele normale care le ajută să crească. Ca urmare, celula este capabilă să se împartă rapid, devenind o creștere a cancerului. Cu toate acestea, acest avantaj de creștere aduce beneficii numai celulei individuale și nu neapărat întregului organism (uman).

tipurile de anomalii genetice includ:

translocații—locurile în schimbare ale unei gene dintr-un cromozom cu o genă pe un alt cromozom; acest tip de anomalie definește numeroasele leucemii diferite

deleții—o genă sau o secvență de nucleotide lipsește în ADN

polimorfisme—variații ale secvenței nucleotidelor

teste pentru detectarea anomaliilor genetice

o varietate de noi teste de laborator pot detecta anomalii genetice. Găsirea unei mutații cauzatoare de boală într-o genă poate confirma un diagnostic suspectat de cancer sau poate identifica persoanele predispuse la anumite tipuri de cancer. Unele dintre aceste tehnici care sunt utilizate în prezent în cadrul clinic includ:

• hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• reacția în lanț a polimerazei (PCR)
• transcriere inversă PCR

mai mult, următoarele tehnici de laborator sunt utilizate în cercetarea cancerului și pot fi disponibile pentru utilizare clinică în viitor:

• Microarray

fluorescență hibridizare in situ (FISH)

FISH este o tehnică de laborator care este utilizată pentru a detecta anomalii genetice la nivel unicelular și cu o singură genă, cum ar fi anomalii numerice (câștiguri și pierderi de nucleotide) și translocații (locurile în schimbare ale unei gene sau segment de gene pe un cromozom cu genă sau un segment pe un alt cromozom). Aceste anomalii joacă un rol în dezvoltarea și progresia unor tipuri de cancer, cum ar fi leucemiile și limfomele1.

cum funcționează peștele? Peștele se efectuează pe celule de probă al căror ADN s-a dezlegat, astfel încât cromozomii individuali să fie vizibili. Acest lucru se întâmplă în timpul fazelor celulare chiar înainte de diviziunea celulară, numită metafază sau interfază. ADN-ul probei este denaturat mai întâi folosind căldură și formamidă chimică, astfel încât firele individuale să se separe, expunând secvența de bază. Apoi, secvențele ADN specifice, numite sonde, care sunt atașate la fluoruri colorate sunt incubate sau combinate cu ADN-ul probei. Sondele hibridizează (se conectează) cu ADN-ul din cromozomi, care este complimentul secvenței de bază din sondă. Prezența sau absența fluorescenței din ADN-ul hibridizat și sonda sunt vizibile cu un microscop specializat și indică dacă secvența ADN de interes este prezentă în probă. Mai mult, tehnicile specializate de pește pot fi utilizate pentru a detecta translocațiile, inversiunile și amplificările care sunt implicate în cancer.2

pește în cancerul de sân și ovarian: o utilizare obișnuită dacă peștele este de a determina dacă pacienții cu cancer de sân și ovarian supraexprimă oncogena HER2/neu, o genă care este frecvent implicată în cancer. HER2 / neu poartă codul genetic pentru receptorul HER2, o proteină de pe suprafața unor celule canceroase. HER2 se leagă de factorii de creștere din sânge, stimulând astfel creșterea celulelor canceroase.

HER2/neu este amplificat în aproximativ 20% până la 30% din cancerele mamare și ovariene, iar această amplificare și/sau supraexprimare indică un prognostic slab.3 peștii pot fi utilizați pentru a observa dacă oncogena HER2/neu trimite semnale multiple la nivelul celulelor individuale, ceea ce indică amplificarea genelor.

pești în cancere hematologice (sânge) : Peștele poate fi, de asemenea, utilizat pentru a diagnostica și gestiona diferite malignități hematologice. Anomalia genetică care stă la baza multor tumori maligne hematologice este translocarea cromozomială sau locurile în schimbare ale genei dintr-un cromozom cu o genă pe un alt cromozom.

reacția în lanț a polimerazei (PCR)

PCR este o metodă de laborator in vitro care este utilă pentru testarea genetică a bolii și detectarea bolii reziduale minime, care este o cantitate mică de boală rămasă după tratament care poate duce la recurență și de obicei nu este detectabilă cu alte tehnici. Această procedură amplifică un segment de ADN dintr-o probă mică, făcându-l detectabil. Cu PCR, secvențe relativ mici de ADN cunoscut pot fi reproduse în milioane de exemplare într-o perioadă scurtă de timp.

cum funcționează PCR? Această metodă necesită patru componente principale: 1) ADN-ul probei, 2) o cantitate amplă de nucleotide, 3) o enzimă polimerază stabilă la căldură care este responsabilă pentru copierea ADN-ului și 4) primeri, secvență scurtă de nucleotide care se află de ambele părți ale fragmentului de ADN de interes și semnalează polimerazei să înceapă replicarea segmentului ADN specific.

PCR este un proces în trei etape, fiecare având loc la o temperatură diferită. ADN-ul probei este încălzit mai întâi la aproximativ 90 de CENTICCI pentru a separa cele 2 catene de ADN pereche. Odată separat, este răcit la o temperatură care permite primerilor să hibridizeze la secvența lor complementară pe ADN-ul țintă, aproximativ 40 de CENTICC. În cele din urmă, replicarea ADN-ului are loc la aproximativ 70 de CENTICC, temperatura la care ADN polimeraza este cea mai activă. Acest proces se repetă de 20 până la 30 de ori, rezultând o amplificare de aproximativ 1 milion de ori a fragmentului de ADN de interes.4

transcriere inversă PCR

transcriere inversă (RT)-PCR este o tehnică care detectează gradul în care genele sunt exprimate. Procesele complicate controlează ce segment de ADN se separă, este transcris (copiat) în ARNm și apoi exprimat ca proteine în celulă. Nu toate genele sunt transcrise și apoi exprimate în mod egal. Datorită multor controale din celulă, unele gene sunt supraexprimate, ceea ce înseamnă că sunt transcrise și exprimate la o rată mai mare decât în mod normal, în timp ce alte gene sunt acum exprimate sau „oprite”, astfel încât anumite funcții să nu se manifeste în celulă.

cum funcționează RT-PCR? RT-PCR folosește aceiași pași ca PCR pentru a amplifica un segment de ADN, dar eșantionul este o copie complementară a ARNm. Începând cu ARNm, acest test măsoară doar ADN-ul care este exprimat, făcând posibilă determinarea gradului în care sunt exprimate anumite gene. Utilizările recente ale RT-PCR în oncologia clinică includ detectarea micrometastazelor ganglionilor limfatici în cancerul de prostată și metastazele osoase în cancerul de sân.5

RT-PCR în cancerul de sân: testul pentru cancerul de sân Oncotype DX XV utilizează RT-PCR pentru a determina riscul individual de recurență la femeile cu cancer de sân pozitiv cu receptor de estrogen (ER) pozitiv. Acest test evaluează expresia a 21 de gene în cancerul de sân. Supraexprimarea unora dintre aceste gene indică un prognostic mai rău, în timp ce exprimarea altora poate indica un prognostic mai bun. Expresia tuturor celor 21 de gene este utilizată pentru a calcula un „scor de recurență” sau probabilitatea ca acel cancer să reapară. Un studiu clinic amplu a arătat că scorul de recurență al implantului a fost mai eficient pentru prezicerea prognosticului femeilor cu cancer de sân nod-negativ, ER-pozitiv decât măsurile standard, cum ar fi vârsta pacientului, dimensiunea cancerului și stadiul cancerului.6

strategii de îmbunătățire a detectării anomaliilor genetice

mai multe metode de detectare a anomaliilor genetice sunt utilizate pentru cercetarea cancerului. Deși nu sunt încă utilizate în mod obișnuit în cadrul clinic, următoarele par a fi promițătoare și pot fi utilizate în viitor pentru diagnosticarea, testarea și monitorizarea cancerului.

Microarrays: analiza Microarray este o tehnică care combină biologia cu informatica pentru a genera un profil genetic pentru o probă de țesut dată care reflectă activitatea a mii de gene. Această tehnologie are avantaje față de FISH sau PCR, deoarece, într-o singură analiză, poate evalua expresia tuturor genelor care pot fi implicate într-un cancer, mai degrabă decât doar câteva. Arătând grafic modul în care toate genele sunt implicate într-un cancer, microarrays poate genera o „semnătură genetică” pentru un anumit cancer. Acest lucru face ca identificarea subtipului de cancer să fie mai precisă. Abilitatea de a lua o imagine a semnăturii genetice a unui cancer poate duce la o mai bună înțelegere a modului în care se dezvoltă cancerul și a modului de proiectare a tratamentului individualizat.

cum funcționează microarrays? În timp ce sunt utilizate diferite metode microarray, fiecare constă din cinci pași de bază:

• pregătirea eșantionului
• combinarea eșantionului cu cipul computerului
• scanarea cipului computerului
• normalizare
• analiza computerizată a rezultatelor.

pregătirea probei: în etapa inițială, ADNc este sintetizat din ARN prin transcriere inversă (amintiți-vă că transcrierea implică copierea ADN-ului pentru a face ARN, deci transcrierea inversă generează ADN din ARN) din ARN care a fost extras atât dintr-un test, cât și dintr-o probă de referință. Segmentele ADN de probă sunt etichetate cu fluorochromi sau substanțe chimice radioactive, astfel încât să poată fi detectate după ce se combină cu cipul computerului.

combinarea eșantionului cu cipul computerului: apoi, eșantionul este combinat cu cipul computerului, care este o grilă dreptunghiulară de pete. Fiecare punct are multe copii ale unei anumite secvențe ADN. Aceste secvențe sunt derivate din baze de date publice ale secvențelor ADN care au fost generate prin Proiectul genomului uman, efortul științific care a identificat practic toate secvențele ADN din specia umană.

când eșantionul este adăugat la cipul computerului, are loc un proces numit hibridizare. Aceasta înseamnă că segmentul ADN-ului probei se leagă (hibridizează) de segmentul de pe cipul computerului care are secvența exactă complementară de nucleotide (cei patru compuși care sunt alfabetul geneticii).

scanarea cipului computerului: odată ce hibridizarea este completă, scanerele sunt utilizate pentru a detecta fluorescența și a crea o imagine digitală care reflectă locul în care ADN-ul eșantionului combinat cu pete pe cipul microarray.

normalizare: Deoarece intensitățile semnalului brut pot varia între cipuri individuale de la mulți pacienți sau experimente, intensitatea cipului individual trebuie ajustată la un standard comun sau normalizată. De exemplu, scăderea zgomotului de fond este o metodă comună de normalizare care se aplică tuturor probelor. Normalizarea face posibilă compararea profilurilor de expresie genetică de la mulți pacienți sau experimente.

analiza computerizată: ultimul pas într-un experiment microarray este analiza computerizată. Miile de puncte de date brute care rezultă din analizele microarray sunt în esență neinteligibile, cu excepția cazului în care sunt evaluate în contextul altor rezultate. De exemplu, profilul expresiei genelor (rezultatele microarray) ale țesutului normal și bolnav poate fi comparat pentru a identifica genele care variază în expresia lor și, de asemenea, pentru a identifica un model (profil) care poate indica o clasă sau o etapă distinctă a bolii.7

Microarrays în oncologie: Analiza Microarray a contribuit la oncologie prin creșterea înțelegerii bazei genetice a mai multor tipuri de cancer, inclusiv limfomul non-Hodgkin cu celule B (BCNHL), leucemia acută și cancerul de sân.

• cunoștințe considerabile privind patologia BCNHL au fost obținute prin compararea modelelor de expresie genetică a țesutului bolnav și normal. Două categorii diferite de boli prezintă profiluri distincte de expresie a genelor. Microarrays au ajutat la stabilirea acestor profiluri de expresie și, în viitor, pot ajuta la clasificarea corectă a noilor cazuri de BCNHL.
• în cazul leucemiei acute, microarrays au ajutat la stabilirea unor modele distincte de expresie a genelor care au ajutat la diferențierea leucemiei limfocitare acute (ALL) și a leucemiei mieloide acute (AML). Folosind aceste profiluri, 29 din 34 de cazuri noi de leucemie au fost prezise corect.
• mai mult, microarrays au ajutat la identificarea a două profiluri distincte de expresie genetică în cancerul de sân, BCRA1 și BCRA2. Această constatare sugerează diferite moduri în care se dezvoltă cancerul de sân și oferă indicii care promovează înțelegerea în continuare a cauzei cancerului de sân.7

1 Spagnolo SD, Ellis DW, Juneja S, Leong AS, și colab. Rolul studiilor moleculare în diagnosticul limfomului: o revizuire. Patologie 2004; 36 (1) 19-44.

2 Spurbeck JL, Adams SA, Stupca PJ, Dewald GW. Primer pe genomica medicală partea XI: vizualizarea cromozomilor umani. Procedurile Clinicii Mayo 2004:79: 58-75.

3 Paik S, Hazan R, Fisher ER, și colab. Constatări patologice din proiectul național chirurgical adjuvant pentru sân și intestin: semnificația prognostică a supraexprimării proteinei erb B-2 în cancerul de sân primar. J Clin Oncol 1990; 8: 103-112.

4 Tefferi a, Wieben ED, Dewald GW și colab. Primer privind genomica medicală partea a II-a: principii și metode de fond în genetica moleculară. Procedurile Clinicii Mayo 2002; 77:785-808.

5 Tefferi a, Wieben ED, Dewald GW și colab. Primer privind genomica medicală partea a II-a: principii și metode de fond în genetica moleculară. Procedurile Clinicii Mayo 2002; 77:785-808.

6 Paik S, Shak s, Tang G, și colab. Testul multi-genă PT-PCR pentru prezicerea recurenței la pacienții cu cancer de sân negativ la noduri—studiile NSABP B-20 și b-14. Proc al 26-lea anual San Antonio cancer de San simpozion. 3-8K decembrie 2003; San Antonio, TX, rezumat #16.

7 Tefferi a, Bolander ME, Ansell SM și colab. Primer pe genomica medicală Partea III: experimente Microarray și analiza datelor. Procedurile Clinicii Mayo 2002; 77:927-940.