unele microorganisme au capacitatea de a reduce compușii care conțin sulf (sulf) la hidrogen sulfurat în timpul metabolismului, care este utilizat în mod obișnuit ca măsură de testare pentru identificarea lor în laboratoare. Numeroase metode sunt utilizate pentru a detecta producția de H2S de către microorganisme care variază în funcție de sursa de sulf și de sărurile metalice utilizate pentru a indica formarea H2S. SIM este mai sensibil în detectarea H2S decât TSI sau KIA, din cauza naturii sale semisolide, a lipsei de carbohidrați interferenți și a utilizării fierului peptonizat ca indicator. Cu toate acestea, hârtia cu acetat de plumb este de 10 ori mai sensibilă decât alte medii.
obiective
pentru a determina dacă microbul reduce compușii care conțin sulf la sulfuri pentru a produce hidrogen sulfurat gazos.
principiu
un compus de fier și un compus de sulf sunt incluse în mediul de testare pentru a testa producția de hidrogen sulfurat gazos. Hidrogenul sulfurat este produs dacă compusul de sulf este redus de tulpina bacteriană. Acest test determină astfel dacă microbul reduce compușii care conțin sulf la sulfuri în timpul procesului de metabolizare. H2S este produs de anumite bacterii prin reducerea aminoacizilor care conțin sulf, cum ar fi cistina, metionina sau prin reducerea compușilor anorganici ai sulfului, cum ar fi tiosulfații, sulfații sau sulfiții în timpul degradării proteinelor sau atunci când respirația anaerobă transferă electronii la sulf în loc de oxigen. În ambele cazuri se produce H2S (hidrogen sulfurat gazos) care reacționează cu compusul de fier pentru a forma precipitatul negru al sulfurii ferice. Culoarea neagră acționează ca un indicator pentru prezența hidrogenului sulfurat. Detectarea hidrogenului sulfurat (H2S) gaz produs de un organism. este utilizat în principal pentru a ajuta la identificarea organismului respectiv.
Media:
acest test poate fi efectuat cu ajutorul mai multor medii, inclusiv fier triplu de zahăr (sti), Agar de fier Kligler (KIA), mediu SIM și hârtie acetat de plumb.
- mediu de motilitate a indolului sulfit (SIM) pentru detectarea H2S
acest mediu conține sulfat de amoniu feros și tiosulfat de sodiu, care apoi servesc împreună ca indicatori pentru producerea de hidrogen sulfurat. Producția de hidrogen sulfurat poate fi detectată atunci când sulfura feroasă, un precipitat negru, este produsă ca urmare a reacției sulfatului de amoniu feros cu gazul H2S.
compoziție:
extract de carne de vită 3,0 g peptonă 30,0 g sulfat feros de amoniu 0,2 g tiosulfat de sodiu 0,025 g Agar 3,0 g Ph Final ( la 25 c) 7,3 0.2 apă distilată 1000ml
- Agari de fier pentru a detecta H2S
acest mediu este potrivit pentru detectarea producției de H2S prin enterobacterii. H2S este detectat de citratul feric conținut în mediu - testul de hârtie cu acetat de plumb pentru a detecta H2S
atunci când este necesară o tehnică sensibilă pentru detectarea producției de H2S, se recomandă testul de hârtie cu acetat de plumb.
procedură
I. în mediul de motilitate a indolului sulfit (SIM)
- se inoculează organismul în tub marcat prin inoculare prin înjunghiere.
- se incubează tuburile inoculate la 37 CTC timp de 24-48 ore.
- observați formarea precipitatului negru pe mediu.
II. în agar de fier Kligler (KIA) și triplu Agar de fier de zahăr (TSIA)
- inoculați organismul de testare în KIA și incubați-l la o temperatură adecvată peste noapte.
- observați înnegrirea mediului.
III. testul de hârtie cu acetat de plumb
- inoculați cu organismul testat un tub sau o sticlă de apă peptonă sterilă sau bulion nutritiv.
- introduceți o bandă de hârtie de acetat de plumb în gâtul flaconului sau tubului deasupra mediului și închideți bine.
- incubați mediul inoculat la 35-37oC și examinați zilnic pentru o înnegrire a părții inferioare a benzii.
rezultate
- rezultat pozitiv: înnegrirea pe mediu
- rezultat negativ:Fără înnegrire pe mediu
utilizări
- este utilizat în principal pentru a ajuta la identificarea membrilor familiei Enterobacteriaceae și ocazional pentru a diferenția alte bacterii, cum ar fi Bacteroidessps și Brucella sps.
- testul ajută la identificarea și diferențierea membrilor Enterobacteriaceae (enterice) de alți Gram – bacili.
- este deosebit de util în identificarea Salmonella, Francisella, și specii Proteus.
limitări
- producția de H2S poate fi inhibată în STI pentru organismele care utilizează zaharoză și suprimă mecanismul enzimatic care are ca rezultat producerea de H2S.
- acetatul de plumb este toxic pentru bacterii și poate inhiba creșterea unor bacterii. Nu permiteți mass-media să atingă banda.
- se recomandă efectuarea testelor biochimice, imunologice, moleculare sau de spectrometrie de masă pe colonii din cultură pură pentru identificarea completă.
- Tille, P. M., & Forbes ,Ba (2014). Bailey & Microbiologia diagnostică a lui Scott (ediția a treisprezecea.). St. Louis, Missouri: Elsevier.
- Cappuccino J. G. și Sherman N. 2008. Microbiologie: un Manual de laborator, ediția a 8-a. Pearson Benjamin Cummings, San Francisco, CA, Statele Unite ale Americii.
- www.vumicro.com/vumie/help/VUMICRO/Hydrogen_Sulfide_Production_Test.htm
- mic.microbiologyresearch.org/content/journal/micro/10.1099/00221287-8-3-397
- https://microbenotes.com/hydrogen-sulfide-h2s-production-test/
- www.microbiologyresearch.org/docserver/fulltext/micro/8/3/mic-8-3-397.pdf?expires=1543332392&id=id&accname=guest&checksum=C42277C712F05E5951241893FC8EC3F7
- spot.pcc.edu/~jvolpe/b/bi234/lab/differentialMedia/H2Sproduction.html
- https://senthilprabhu.blogspot.com/2017/10/hydrogen-sulphide-h2s-production-test.html
- https://jb.asm.org/content/jb/10/5/439.full.pdf
