Un ghid pentru boala herpesvirusului Koi: cum să detectați, să tratați și să preveniți

primul caz recunoscut de KHV a avut loc în Regatul Unit în 1996 (Haenen și colab. 2004). De atunci, alte cazuri au fost confirmate în aproape toate țările că cultura koi și/sau crapul comun, cu excepția Australiei (Hedrick și colab. 2000; Haenen și colab. 2004, Pokorova și colab. 2005). Această fișă de informații este destinată informării medicilor veterinari, biologilor, producătorilor de pește și pasionaților despre boala KHV.

ce este KHV?

Figura 1. Koi cu branhii pătate și ochi scufundați din cauza bolii herpesvirusului koi.

herpesvirusul Koi (cunoscut și sub numele de herpesvirusul Ciprinid 3; CyHV3) este clasificat ca un virus ADN dublu catenar aparținând familiei Alloherpesviridae (care include herpesvirusurile peștilor). Lucrarea lui Waltzek și a colegilor (Waltzek și colab. 2005, 2009) a arătat că KHV este într-adevăr un herpesvirus, bazat pe morfologia și Genetica virusului și este strâns legat de virusul variolei crapului (herpesvirusul Ciprinid 1; CyHV1) și virusul necrozei hematopoietice a peștilor de aur (herpesvirusul Ciprinid 2; CyHV2). Boala herpesvirusului Koi a fost diagnosticată la koi și crapul comun (Hedrick și colab. 2000; OATA 2001). Alte specii de ciprinide (de exemplu, peștișor auriu; Carassius auratus și crap de iarbă; Ctenofaringodon idella) și non-ciprinide nu sunt de obicei afectate de KHV, deși ADN-ul KHV a fost detectat în țesuturile peștilor aurii și ale altor specii de pești expuși la virus folosind reacția în lanț a polimerazei (PCR) metode de testare (El-Matbouli și colab. 2007, Sadler și colab. 2008, Bergmann și colab. 2009, Kempter și colab. 2009). Pești de aur hibrizi (pești de aur masculi C. auratus x crap comun feminin C. carpio) au fost moderat rezistente la mortalitate în urma infecției experimentale cu KHV (Hedrick și colab. 2006). Indiferent dacă crapul comun hibrid, alte ciprinide sau speciile non-ciprinide pot adăposti KHV și mai târziu pot transmite boala la soiurile de crap comune na, rămâne controversat.

boala herpesvirusului Koi (KHVD) afectează peștii de diferite vârste, ducând adesea la o mortalitate de 80-100% la populațiile sensibile atunci când temperaturile apei sunt cuprinse între 60 și 77. 2004). Cu toate acestea, ca și în cazul altor infecții herpesvirale, KHV poate rămâne în peștii infectați pe viață; prin urmare, peștii care se recuperează dintr-un focar de KHV ar trebui considerați purtători ai virusului (Petty and Fraser 2005, St.Hilaire și colab. 2005, Eide și colab. 2011).

care sunt semnele KHV?

semnele clinice ale KHV sunt adesea nespecifice. Mortalitatea poate începe foarte rapid la populațiile infectate, decesele începând în decurs de 24 până la 48 de ore de la debutul inițial al semnelor clinice. În studiile experimentale, 82% dintre peștii expuși la virus la o temperatură a apei de 72 CTF (22 CTF) au murit în primele 15 zile (Ronen și colab. 2003). Infecția cu KHV poate produce leziuni branhiale severe care se manifestă sub formă de pete roșii și albe (Figura 1) (pot fi similare cu semnele bolii columnaris; publicația SRAC #479b despre boala Columnaris). Petele albe se datorează necrozei (morții) țesutului branhial. Leziunile branhiale cauzate de boala KHV sunt cele mai frecvente semne clinice la koi afectat. Alte semne externe ale KHV pot include branhii sângerânde, ochi scufundați și pete palide pe piele. Unele koi infectate cu KHV pot avea un nas crestat (Goodwin 2012). În unele cazuri, infecțiile secundare bacteriene și parazitare pot fi cea mai evidentă problemă, mascând daunele cauzate de infecția virală primară. Examinarea microscopică a biopsiilor branhiale relevă adesea un număr mare de bacterii și diverși paraziți (Hedrick și colab. 2000; Haenen și colab. 2004).

semnele interne ale KHVD sunt variabile și nespecifice, dar pot include aderențe mai mari decât cele normale în cavitatea corpului și mărirea și/sau aspectul pătat al organelor interne (Hedrick și colab. 2000; Haenen și colab.2004).

comportamental, peștii afectați rămân adesea aproape de suprafață, înoată letargic și pot prezenta detresă respiratorie și înot necoordonat.

cum se infectează peștii cu KHV?

metodele de răspândire (transmitere) a KHV includ contactul direct cu peștii infectați, contactul cu fluidele din peștii infectați; și contactul cu apa, noroiul sau alți fomiți/vectori care au intrat în contact cu sistemele contaminate. Virusul infecțios intră în primul rând în peștii sensibili prin piele, inclusiv țesutul branhial (Costes și colab. 2009). În funcție de temperatura apei, peștii susceptibili care sunt expuși la KHV se pot infecta, dezvolta boli și pot muri; sau pot supraviețui focarului inițial al bolii și pot deveni purtători ai virusului (Petty and Fraser 2005, St.Hilaire și colab. 2005, Eide și colab. 2011). Peștii care supraviețuiesc expunerii la KHV sau primesc vaccinul KHV pot deveni imunizați și pot dezvolta un nivel de protecție împotriva virusului, deși durata protecției rămâne necunoscută (Ronen și colab. 2003, Perelberg și colab. 2008). Supraviețuitorii focarelor de KHV pot deveni purtători ai virusului și pot fi capabili să răspândească boala la peștii sensibili. Este posibil ca acești pești purtători să nu prezinte semne de infecție cu KHV, deși pot transporta și/sau vărsa virusul.

cum afectează temperatura apei boala KHV?

focarele de boală KHVD (KHVD) apar de obicei primăvara și toamna, când temperaturile apei sunt cuprinse între 60 și 77, F (16 și 25, C), cu o perioadă de incubație de 7-21 de zile, în funcție de temperatura apei (Haenen et al. 2004). KHVD la temperaturi de până la 60 CTF f (15,5-16 CTF C) a fost raportat în focarele comune de crap din Japonia, iar studiile experimentale au arătat că virusul poate induce mortalitate până la aproximativ 82 CTF F (28 CTF c). Temperaturile mai calde ale apei induc mai rapid boala clinică în comparație cu peștii ținuți la temperaturi mai scăzute. La temperaturi mai scăzute ale apei (de ex., 55 CTF), virusul poate infecta peștii fără a induce semne clinice de boală, dar atunci când temperaturile permisive ale apei sunt din nou experimentate, peștii prezintă semne tipice KHV și pot muri (Gilad și colab. 2003, St.Hilaire și colab. 2005).

Cum știu dacă peștele meu are KHV?

diagnosticul pozitiv al KHV necesită asistența unui medic veterinar sau a unui specialist în sănătatea peștilor și a unui laborator de diagnosticare a bolilor peștilor. Identificarea diagnostică a KHV poate fi realizată prin mai multe metode directe și indirecte. Metodele directe sunt proceduri care detectează virusul real sau” bucăți ” de virus. Metodele indirecte sunt proceduri care determină dacă un pește a montat un răspuns imun împotriva KHV după expunerea la virus prin măsurarea nivelurilor de anticorpi anti-KHV din sânge (Adkison și colab. 2005, St-Hilaire și colab. 2005, 2009).

metodele directe utilizate pentru identificarea KHV includ: 1) izolarea și identificarea virusului (adică creșterea virusului) folosind o linie celulară susceptibilă, cum ar fi linia celulară Koi Fin (KF-1) {creștere optimă observată la temperaturi cuprinse între 59 și 77. Pentru aceste teste de diagnostic directe, țesuturile sunt îndepărtate din pești care sunt colectați în viață, apoi eutanasiați. Izolarea și detectarea virusului în țesuturi de la pești morți mai mult de câteva ore pot fi nesigure. Testele de diagnostic directe non-letale sunt disponibile pe probe precum sânge, Material fecal, mucus și cleme branhiale (adică biopsii), dar aceste teste pot produce rezultate mai puțin definitive sau mai puțin precise. Un test pozitiv de cultură celulară indică o infecție activă, continuă cu KHV. Detectarea pozitivă a ADN-ului KHV folosind PCR indică faptul că virusul este prezent, deci poate fi utilizat pentru a confirma boala KHV la peștii bolnavi clinic și poate chiar pentru a identifica purtătorii (Eide și colab. 2011).

o metodă de testare indirectă pentru KHV care a fost utilizată pe scară largă este testul imunosorbent legat de enzime (ELISA). KHV Elisa folosește o probă de sânge și, prin urmare, este un instrument de diagnostic neletal. Datele ELISA pot furniza dovezi că un pește montează în prezent sau a montat anterior un răspuns imun (adică producerea de anticorpi) împotriva KHV. Un test ELISA pozitiv pentru KHV indică faptul că peștele a produs anticorpi împotriva KHV după o expunere anterioară la virus. Cu toate acestea, celulele imune producătoare de anticorpi necesită timp pentru a se activa și, în timp, dacă un pește nu mai este bolnav, producția de anticorpi anti-KHV poate încetini sau opri. Prin urmare, este posibil ca ELISA să nu poată detecta anticorpi împotriva KHV dacă infecția a apărut cu ani înainte sau dacă peștele nu a avut încă timp să producă anticorpi.

rezultatele Negative ale testelor directe sau indirecte nu înseamnă neapărat că peștii nu sunt purtători. Nu există niciun test care să detecteze definitiv toți transportatorii sau supraviețuitorii.

există tratament pentru KHV?

nu există tratament pentru KHV. Medicamentele antivirale nu sunt disponibile pentru a trata KHV sau orice alte boli virale ale peștilor de cultură. Studiile au arătat că koi poate supraviețui unui focar de KHV dacă temperaturile apei sunt crescute la 86 CTF (30 CTF C) în timpul focarului (Ronen și colab. 2003). Cu toate acestea, această tehnică crește doar marginal ratele de supraviețuire, iar creșterea artificială a temperaturilor apei peste 80 de metri pătrați în instalațiile de deținere poate duce la o apariție crescută a altor boli bacteriene și parazitare mai frecvente. Temperaturile ridicate ale apei nu sunt, în general, recomandate pentru creșterea de rutină și gestionarea koi și a crapului comun. În plus, și mai important, koi care supraviețuiesc unui focar KHV sau celor expuși la temperaturi ridicate ale apei pot deveni purtători ai virusului. Acești koi purtători sunt o sursă a bolii pentru peștii sensibili atunci când condițiile sunt adecvate pentru vărsarea și infecția virală. Datorită expunerii anterioare și imunizării la virus, peștele purtător nu va ceda de obicei bolii KHV sau nu va prezenta semne de infecție clinică.

recent, USDA APHIS a aprobat utilizarea unui vaccin viu atenuat pentru prevenirea KHVD, care trebuie administrat crapului comun sau koi mai greu de 100 de grame (vaccinul nu este aprobat pentru utilizare în puiet). Vaccinul, dezvoltat inițial de un grup de cercetare israelian (Ronen și colab. 2003), generează titruri ridicate de anticorpi anti-KHV și protejează crapul comun vaccinat sau koi la provocarea virală ulterioară (Ronen și colab. 2003, Perelberg și colab. 2008). Cu toate acestea, au fost ridicate îngrijorări cu privire la eficacitatea vaccinului și durata protecției acordate peștilor vaccinați. În prezent, nu se știe dacă peștii vaccinați devin purtători ai tulpinii vaccinate sau dacă sunt protejați împotriva infecției cu tulpina de tip sălbatic care ar reprezenta o amenințare pentru crapul comun nevaccinat. O altă provocare în ceea ce privește vaccinul este că nu există teste de diagnostic disponibile în comerț care să poată diferenția peștii vaccinați față de cei infectați/expuși în mod natural.

deoarece focarele de KHV au cauzat pierderi mari la koi și la instalațiile comune de crap și pentru că există îngrijorarea că supraviețuitorii sunt purtători, oricine cu koi care a fost diagnosticat cu KHV ar trebui să ia în considerare depopularea (eliminarea întregii populații) ca o opțiune logică. Toate materialele și sistemele pe care le-au contactat peștii infectați trebuie curățate și dezinfectate.

particulele virale din apa mediului pot rămâne infecțioase până la trei zile (Shimizu și colab. 2006). Cu toate acestea, protocoalele comune de dezinfecție (vezi mai jos) pot fi utilizate pentru a elimina virusul din sistemele și echipamentele de apă. Biofiltrele și mediile biofiltre expuse virusului trebuie, de asemenea, curățate și dezinfectate temeinic. Înainte de dezinfecție, echipamentul trebuie curățat de resturi sau acumulări organice, deoarece acestea pot reduce eficacitatea dezinfectantului. Soluțiile de clor (de exemplu, înălbitor de uz casnic) pot fi utilizate pentru dezinfectarea echipamentelor sau sistemelor mari fără pește. Protocolul recomandat pentru clor este de 200 ppm (200 mg/L) timp de o oră (Noga 1996). Dozarea corectă a acestui ingredient activ depinde de tipul de clor utilizat. Pentru înălbitorul de uz casnic, care este de 5,25% hipoclorit de sodiu pe litru, 35 mililitri pe galon de apă vor da 200 mg/l concentrație finală.

compușii cuaternari de amoniu (QAC) pot fi, de asemenea, utilizați pentru sisteme și echipamente. Compușii cuaternari de amoniu sunt mai blânzi pe plase decât soluțiile de clor. Concentrația QAC recomandată pentru dezinfecție este de 500 ppm (500 mg/L) timp de o oră (Noga 1996). Dozarea corectă a QAC-urilor depinde de tipul/concentrația amestecului utilizat, deoarece concentrațiile variază în funcție de produsul utilizat. Diferite produse QAC pot varia de la 10% la 50% ingredient activ. De exemplu, Roccal-D Plus (Pharmacia & Upjohn Company, Pfizer) este de aproximativ 24% ingredient activ; prin urmare, o concentrație finală de tratament de 500 mg/L ar necesita aproximativ 7,9 mL de Roccal-d plus centiclu pe galon de apă. Clătiți bine după utilizarea oricărui tip de dezinfectant pentru a elimina dezinfectantul rezidual care poate ucide peștii.

cum poate fi prevenit KHV?

înainte de a obține pește, întrebați mai întâi furnizorul dacă au existat pierderi majore inexplicabile în populație. Monitorizarea și testarea pentru KHV se pot face prin teste de laborator, așa că întrebați furnizorii dacă s-au făcut teste pentru KHV și solicitați o copie a documentației rezultatelor laboratorului. Cel mai bun mod de a preveni KHV este să vă cunoașteți furnizorii de pește și să aveți o relație bună de lucru cu aceștia.

carantina (adică separarea de alte koi) este metoda cea mai fiabilă pentru a evita introducerea agenților patogeni într-un iaz sau instalație. Pentru a implementa o procedură eficientă de carantină, toți peștii noi trebuie păstrați într-un sistem separat, în mod ideal într-o clădire sau zonă diferită de peștele rezident. Peștii rezidenți trebuie hrăniți, manipulați și întreținuți înainte de noul pește. Peștii în carantină necesită echipamente dedicate, cum ar fi plase, găleți și furtunuri de sifon care sunt utilizate numai pentru ei. În plus, băile de picioare și spălările de mână ar trebui folosite de oricine intră și iese din zona de carantină. Peștele trebuie pus în carantină timp de cel puțin 30 de zile. În mod specific pentru KHV, noul koi ar trebui să fie pus în carantină în apă care este de 75 CTF (24 Ctfc) timp de cel puțin 30 de zile. La încheierea perioadei de carantină, orice pește bolnav trebuie examinat de un medic veterinar și/sau laborator de diagnostic pentru a exclude KHV sau alte boli. Dacă toți peștii par sănătoși, probele de sânge trebuie colectate de la acești pești în carantină și prezentate pentru detectarea anticorpilor folosind ELISA. (Atkinson și colab. 2005; St.Hilaire și colab. 2009)

pasionații Koi sunt încurajați să promoveze utilizarea spectacolelor koi în stil englezesc, care păstrează diferite surse (proprietari) de koi separate în timpul spectacolului și al judecării. În plus, plasele separate, furtunurile sifonului și alte echipamente ar trebui să fie utilizate de toți participanții la spectacol pentru propriul pește. Stilul japonez de spectacol, în care koi de la diferiți proprietari sunt plasați împreună în același rezervor, poate duce la răspândirea bolii în rândul peștilor sensibili. Indiferent de stilul spectacolului, peștii care se întorc de la spectacole ar trebui să fie în carantină timp de cel puțin 30 de zile și să fie ținuți la 75 de metri pătrați înainte de a fi reintroduși în populația generală. Pentru un plus de securitate, testarea anticorpilor de prelevare de sânge poate fi utilă. Supraviețuitorii (peștii care au fost expuși anterior la boala KHV) nu ar trebui să fie niciodată duși la un spectacol koi.

la sfârșitul perioadei de carantină și înainte de a pune toți peștii împreună, așezați mai mulți koi noi cu mai mulți koi din populația stabilită într-o zonă separată, departe de restul populației stabilite și urmăriți-i pentru semne de boală. Acest” test ” poate ajuta la determinarea cu un număr mai mic de pești dacă plasarea celor două populații împreună după carantină ar putea cauza probleme. Din păcate, nu există garanții.

pe cine ar trebui să contactez dacă bănuiesc că peștele meu are KHV sau dacă vreau mai multe informații?

producătorii comerciali de pește, angrosiștii și comercianții cu amănuntul din Florida pot contacta unul dintre următoarele laboratoare de diagnosticare a bolilor peștilor de la Universitatea din Florida*:

în Florida de Nord:

Thomas B. Waltzek
Wildlife and Aquatic Veterinary Disease Laboratory (WAVDL)
Patobiologie acvatică
Universitatea din Florida
Bldg. 471, 2173 Mowry rutier
Gainesville, Florida 32611
(352) 273-5202
e-mail: [email protected]

în Florida de Sud:

Roy P. E. Yanong sau Deborah Pouder
Laboratorul de acvacultură tropicală
Laboratorul de diagnosticare a bolilor peștilor
Universitatea din Florida
1408 24th St. SE 33570
Ruskin, Florida
(813) 671-5230
http://tal.ifas.ufl.edu

*vă rugăm să rețineți: aceste laboratoare acceptă cazuri numai de la producătorii comerciali de pește, angrosiști și comercianți cu amănuntul.

pasionații și proprietarii personali de iazuri koi (sau producătorii comerciali de pește, angrosiștii și comercianții cu amănuntul din afara Floridei) pot căuta un medic veterinar acvatic sau un laborator de diagnostic acvatic în zona lor pe site-ul AquaVetMed (http://www.aquavetmed.info) sau http://www.myveterinarian.com/avma/vclPublic/#.

care sunt considerațiile de reglementare asociate cu KHV?

începând cu ianuarie 2007, KHV a fost adăugat la Organizația Mondială pentru sănătatea animalelor (OIE; www.oie.int) lista bolilor pentru pești. Din cauza acestei liste, Departamentul Agriculturii al Statelor Unite Serviciul de inspecție a sănătății animalelor și plantelor (USDA APHIS) solicită medicilor veterinari acreditați și laboratoarelor de diagnostic să raporteze cazuri pozitive de KHV către medicul veterinar responsabil (AVIC) din statul în care provine peștele. Cu toate acestea, nu vor fi solicitate informații despre client (de exemplu, nume, adresă). Aceste informații vor ajuta USDA să determine care este prevalența KHV în Statele Unite. USDA APHIS nu are cerințe de sănătate de import specifice pentru KHV pentru koi sau alți pești care se deplasează interstatal sau internațional. Nu există o depopulare obligatorie pentru populațiile de koi infectate cu KHV. Depinde de proprietarul acestor animale și de medicul veterinar al acestora să decidă ce curs să urmeze.

crescătorii de Koi, dealerii, expozanții și medicii veterinari ar trebui să fie conștienți de reglementările internaționale de sănătate la export cu privire la circulația peștilor vaccinați cu KHV. Cerințele de import pentru unele țări specifică faptul că peștilor vaccinați cu KHV nu li se va permite intrarea. Vă rugăm să verificați site-ul APHIS pentru cerințele de sănătate de stat și internaționale (enumerate respectiv): http://www.aphis.usda.gov/animal_health/animal_dis_spec/aquaculture/aquastates.shtml

http://www.aphis.usda.gov/regulations/vs/iregs/animals/

sau contactați biroul local USDA APHIS VS Area pentru asistență (http://www.aphis.usda.gov/animal_health/area_offices/).

oamenii pot obține KHV?

nu există nicio preocupare zoonotică cu KHV. Herpesvirusul responsabil de provocarea bolii KHV la pești nu va provoca boli la om.

cum diferă KHV de alte boli virale?

este important să se diferențieze KHV de alte virusuri care pot provoca boli la crap și koi. Alte două boli virale importante recunoscute la crap sunt viremia de primăvară a crapului (SVC) și variola crapului (herpesvirusul Ciprinid 1; CyHV1). Aceste boli au implicații de gestionare și reglementare semnificativ diferite (Tabelul 1). Atât KHV, cât și SVC sunt acum listate ca boli de pește notificabile de către OIE. Cu toate acestea, în SUA, SVC este considerată o boală de pește străină sau exotică (nu este prezentă) a speciilor sensibile acvaculturate și, ca atare, medicul veterinar sau laboratorul acreditat este obligat să notifice focarele confirmate oficialilor serviciilor veterinare USDA APHIS, care, la rândul lor, vor notifica OIE. Prin comparație, KHV este considerat a fi răspândit în Statele Unite. USDA APHIS solicită medicilor veterinari și laboratoarelor acreditate să raporteze cazurile de KHV către medicul veterinar responsabil (AVIC) din statul în care se produce focarul. Informațiile vor ajuta USDA să determine care este adevărata prevalență a KHV în SUA cu toate acestea, fiecare focar de KHV nu va fi notificat OIE.

viremia de primăvară a bolii crapului este cauzată de un virus ARN monocatenar, rhabdovirus carpio, și a fost raportată la crapul și koi-ul comun (C. carpio), crapul de iarbă (C. idella), crapul cu cap mare (Aristichthys nobilis), crapul de argint (Hypophthalmichthys molitrix), crapul Crucian (Carassius carassius) și peștișorul de aur comun (C. auratus). Pentru mai multe informații privind SVC, a se vedea tabelul 1 și fișa informativă UF/IFAS „viremia de primăvară a crapului” (VM-142).

boala variolei crapului (herpesvirusul Ciprinid 1; CyHV1) este cauzată de un herpesvirus diferit de KHV (Herpesvirus cyprini) care are o distribuție geografică largă și afectează crapul comun și koi. Variola crapului provoacă de obicei creșteri netede ridicate („mase asemănătoare verucilor”) pe pielea și aripioarele peștilor mai în vârstă, dar poate fi asociată cu o mortalitate ridicată la puii cu vârsta mai mică de două luni (Sano și colab. 1990). Variola crapului nu este o boală raportabilă sau notificabilă în SUA temperaturile apei de peste 68% F (20% C) ajută la reducerea creșterii pielii și a aripioarelor la peștii mai în vârstă, dar nu elimină virusul din pește (Tabelul 1). La peștii maturi, variola crapului este de obicei o boală neletală, autolimitantă (adică, majoritatea, dacă nu toate creșterile se vor rezolva la temperaturi mai calde pe cont propriu).

rezumat

boala herpesvirusului Koi este o boală devastatoare a koi ornamental și a crapului comun. Există mai multe metode pentru a detecta diferite stări ale infecției. Nu există un tratament eficient pentru a scăpa peștele de virus. Bunele practici de management, inclusiv carantina, testarea și creșterea adecvată, sunt componente vitale pentru prevenirea acestei boli pentru toți producătorii, dealerii și pasionații de koi și de crap comun.

August 2013